Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 15/10/2025
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-609534)
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Chez l’Homme, la thérapie cellulaire et l’utilisation des cellules souches est une approche thérapeutique prometteuse dans le cadre de nombreuses maladies dégénératives telles que les dystrophies rétiniennes. À l’heure actuelle, la majorité des essais cliniques ont mis en évidence la faisabilité et l’innocuité de l’utilisation des cellules souches. Malgré des résultats encourageants, ces approches doivent être améliorées afin d’optimiser la récupération de l’acuité visuelle. Le but de ce projet est d’améliorer les conditions de thérapies cellulaires en testant différents types de cellules dans plusieurs modèles de rat présentant spontanément une dégénérescence rétinienne. Après transplantation rétinienne chez le rat de cellules de la rétine humaine obtenues par culture in vitro à partir de sujets sains (sans pathologie oculaire), nous étudierons à différents temps après transplantation l’intégration et la survie des cellules transplantées et nous mesurerons l’acuité visuelle des rats.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Les bénéfices à court terme sont d’évaluer les effets de la transplantation (innocuité, intégration et maintien de l’acuité visuelle) de différentes populations rétiniennes dans plusieurs modèles de rat présentant spontanément une cécité. A long terme, ce projet permettra d’améliorer les thérapies cellulaires des pathologies rétiniennes dégénératives chez l’Homme. En effet, le développement de l’utilisation des cellules souches est une approche thérapeutique prometteuse dans le cadre de nombreuses maladies dégénératives.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Les animaux seront transplantés sous anesthésie (durée de l’anesthésie : 30 minutes). L’acuité visuelle sera mesurée sur les animaux vigiles la veille de la transplantation et en fonction des groupes d’animaux, à une, deux ou trois reprises supplémentaire plusieurs semaines après transplantation. Le test d’acuité visuelle dure 20 minutes par animal, sans intervention directe de l’expérimentateur. A la fin de l’étude, une chirurgie (sous anesthésie) sans réveil sera réalisée pour des prélèvements.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Les nuissances ou effets indésirables attendus sur les animaux sont : stress et photophobie des animaux lors des tests comportementaux lié au changement d’environnement (durée courte de 1 à 5 minutes).
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Les 240 animaux transplantés seront mis à mort à la fin de l’étude de façon à coupler les résultats de mesure de l’acuité visuelle à des analyses moléculaires des yeux et des cerveaux. Les nimaux surnuméraires seront proposées à la communauté pour d’autres projets.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
En amont de ce projet, nous avons développé et caractérisé des cellules rétiniennes in vitro. Ces cellules sont vouées à restaurer l’acuité visuelle grâce à la thérapie cellulaire. Ainsi, il nous est indispensable d’avoir accès à un modèle animal modélisant les dystrophies rétiniennes, nous permettant d’apprécier les bénéfices amenés par la transplantation
2. Réduction
Afin de diminuer le nombre d’animaux, nous procéderons par étape : les résultats de la première étape conditionneront la réalisation de l’étape suivante. De plus, les croisements seront faits au besoin et non pas en continu. Ainsi le nombre d’animaux indiqués ne sera pas nécessairement utilisé. La réduction du nombre d’animaux nécessaires à l’expérimentation a été calculé en s’assurant d’avoir un nombre suffisant d’animaux pour garantir la qualité statistique des données et ainsi empêcher la reproduction de ces expérimentations.
3. Raffinement
Les méthodes expérimentales utilisées dans cette étude sont validées, reproductibles et classiquement retrouvées en laboratoire. Différents dispositifs seront mis en place afin de réduire au maximum la souffrance, la douleur et l’angoisse des animaux. Les animaux seront observés tous les jours afin de mettre en évidence des signes de détresse. Ainsi, des points limites gradés ont été prévus et conduiront sans délai à un arrêt de la souffrance. La transplantation sera réalisée sous ansthésie et sous couverture antalgique. Par ailleurs, les animaux utilisés sont immunodéficients afin qu’il n’y ait pas de rejet de la greffe des cellules humaines. Pour éviter que ces animaux ne développent des infections, ils sont hébergés dans des conditions sanitaires strictes. De plus, le test comportemental utilisé dans ce projet, ne nécessite pas d’intervention directe de l’expérimentateur.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Le modèle utilisé est largement décrit dans de nombreuses études précliniques des pathologies rétiniennes. La cécité débute vers 18 jours et est totale environ 3 mois après la naissance. Par ces caractéristiques, l’utilisation d’une telle espèce animale est pertinente et justifiée pour tester la capacité des transplantations sous rétiniennes sur la restauration visuelle. Dans cette étude, nous souhaitons réaliser des transplantations à 22 jours post-natal, période précoce de la dégénérescence, qui est représentatif de la fenêtre temporelle qui serait utilisée dans le cas d’une transplantation chez l’Homme (phase précoce et diagnostique de la maladie).