Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 07/04/2026
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-703616)
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Le projet vise à évaluer l’effet sur l’intégrité des vaisseaux sanguins cérébraux d’un composé conçu par un partenaire industriel pour favoriser l’entrée de médicaments dans le cerveau. Ce composé cible spécifiquement une protéine des cellules des vaisseaux cérébraux de souris, dénommée « la cible » dans le projet. Ces cellules seront cultivées in vitro puis exposées au composé à une concentration et pendant un temps variables. Pour ce projet, les cellules doivent être obtenues directement à-partir de cerveaux de souris car les lignées existantes diffèrent trop des cellules originales. La culture est réalisée à partir de cerveaux de souris prélevés après analgésie et anesthésie profonde suivies de la mise à mort des animaux.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Ce projet permettra d’évaluer si le composé présente une toxicité spécifique sur les cellules des vaisseaux sanguins du cerveau de souris, une étape essentielle au développement d’un futur agent permettant d’augmenter le passage de médicaments dans le cerveau.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Tous les animaux seront mis à mort sous anesthésie générale profonde après analgésie sans aucun traitement préalable. Chaque animal recevra 2 injections (30 secondes par injection). La procédure chirurgicale d’exsanguination par perfusion transcardiaque dure 4 minutes.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Les seules nuisances sont les injections utilisées pour l’administration des analgésiques et des anesthésiques. Ces injections n’entrainent qu’une douleur et un stress légers des animaux.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Tous les animaux (Lot 1 de 454 souris mâles, Lot 2 de 75 souris femelles) sont mis à mort afin de prélever leur cerveau et de réaliser des cultures de cellules à partir des vaisseaux sanguins cérébraux.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Il n’est pas possible de remplacer les cultures primaires de cellules endothéliales cérébrales par des lignées immortalisées car celles-ci ont un phénotype trop différent du phénotype observé in vivo.
2. Réduction
La réalisation de cette étude sur des cellules endothéliales en culture primaire et non sur des animaux permet de diminuer fortement le nombre d’animaux utilisés puisque les expériences in vitro permettent de tester un grand nombre de conditions en parallèle. Le nombre d’animaux inclus dans le projet (529 souris) a été calculé au plus juste afin d’obtenir des résultats statistiquement significatifs compte-tenu des résultats précédemment obtenus au laboratoire. De plus l’étude sera réalisée dans un premier temps chez la souris mâle (454 souris) pour déterminer la concentration maximale et le temps d’exposition maximal au composé qui peuvent être utilisés sans entrainer d’efftes cytotoxiques. Seules ces valeurs limites seront ensuite testées chez la souris femelles (75 souris) pour vérifier l’absence de toxicité dans les deux sexes.
3. Raffinement
Tous les animaux seront hébergés en groupes sociaux dans des cages avec enrichissement. La mise à mort des animaux se fera toujours après analgésie et anesthésie générale profonde. Les animaux sont surveillés sur la base de points limites préalablement définis et si un animal présente des signes de souffrance importants, il sera mis à mort par dislocation cervicale.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Ce projet a pour but de tester in vitro l’effet d’un composé spécifiquement développé contre une protéine des cellules endothéliales cérébrales de souris. Souris jeunes adultes de 12 à 16 semaines pour que le barrière hémato-encéphalique soit mature