Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 21/09/2022
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-332477)
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Le but de la redérivation sera de maintenir les lignées de souris sous un statut sanitaire acceptable. Dans notre établissement, beaucoup de souris (60% environ) sont immunodéprimées. Par conséquent, la présence de certains microorganismes mettrait en péril leurs bien être. La congélation des lignées des souris permet de répondre à la règle des 3R (réduction du nombre de souris) tout en protégeant ces lignées d’une dérive génétique, d’une contamination génétique ou d’une catastrophe naturelle. La modification du patrimoine génétique des souris permet de répondre à des problématiques diverses et variées (recherche fondamentale ou appliquée).
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
La redérivation de nos souris permet de garder des souris immunodéprimées au sein de notre service. La congélation de nos souris répond à la règle des 3R , c’est à dire réduire au maximum le nombre de souris. La transgénèse permet aux équipes de recherche d’obtenir des modèles de recherche.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Certaines souris subiront 2 Injections d’hormones à 48 heures d’intervalle, en sous cutané, réalisées en 5 secondes. Chaque chirurgie serat réalisée une fois, sous anesthésie générale. La souris reste sous anesthésie durant 40 minutes. La chirurgie dure 15 minutes.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Au cours de nos procédures, nous réalisons des microchirurgies sous anesthésie générale. Les effets indésirables pourraient être des infections. Nous devons également conserver des mâles stériles individualisés. Ce type d’hébergement est une source de stress.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Toutes les femelles donneuses d’ovocytes sont mises à mort afin de récupérer un maximum d’ovocytes. Les mâles fertiles sont mis à mort afin de récupérer un maximum de sperme lors de la congélation de sperme.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Notre structure propose la redérivation, la congélation et la modification du patrimoine génétique de la souris. Chaque chercheur justifie l’utilisation de la souris comme modèle de recherche.
2. Réduction
Nous utilisant des hormones non néfastes (PMSG, hyperOva et hCG) pour la souris, permettant d’obtenir un nombre maximal d’ovocytes et d’embryons, et par conséquent de réduire le nombre de femelles utilisées. La congélation des lignées murines est une méthode permettant de réduire au maximum le nombre de souris et limiter au maximum le maintient d’animaux respirant aux phénotypes dommageables non utiles immédiatement à une recherche expérimentale. Le maximum de mâles vasectomisés sera de 280 animaux (28*2*5). Nous avons en permanence 28 males vasectomisés qui nous permet de détecter 10 femelles en œstrus (chiffre empirique), c’est à dire les mères porteuses. A l’âge de 4 mois, ils sont mis en accouplement avec les futures mères porteuses. On les garde jusqu’à l’âge de 9 mois car, passé cette date, ils sont peu actifs et le nombre de femelle pluggée chute dramatiquement. Par conséquent, on les renouvelle, 2 fois par an. Un maximum de 2100 mères porteuses seront utilisées au cours des 5 ans à venir. Pour les redérivations, on prévoit 30 projets par an, incluant un lot de 4 mères porteuses soit 30 * 4 *5 souris. Pour les projets « transgénèse », on prévoit 15 projets par an, nécessitant un maximum de 5 expérimentations incluant à chaque fois un lot de 4 mères porteuses soit : 15*5*4*5 mères porteuses soit (30*4*5) +(15*5*4*5) = 2100 mères porteuses.
3. Raffinement
Toutes les chirurgies sont réalisées sous anesthésie générale. Les yeux des animaux sont protégés du dessèchement par du collyre « OcryGel ». Au cours de la chirurgie, réalisée sous loupe binoculaire, les animaux sont placés sur une table chauffante thermostatée à 28°C. Tous les animaux sont ensuite accueillis dans une cage, elle-même chauffée par un tapis. Le tapis chauffant est retiré après le réveil de tous les animaux. De plus, des analgésiques adaptées (métacam ou doliprane) sont introduit dans l’eau de boisson durant 3 jours après l’intervention. Les mâles individualisés reçoivent un enrichissement supplémentaire, un igloo en carton.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Notre structure met à disposition une prestation de redérivation des souris afin de maintenir un statut sanitaire à l’élevage des souris immunodéprimées. La congélation des souris transgéniques permettra de garder ces modèle sous la forme congelée et non respirante. La création de modèles murins transgéniques permettra d’obtenir des modèle pertinents pour des études en recherche fondamentale, ainsi qu’en recherche clinique. Les mâles subiront une vasectomie seront âgés entre 8 et 10 semaines. On les gardera au maximum 10 mois. Les femelles donneuses d’ovocytes seront âgées entre 4 et 6 semaines. On utilise des femelles prés pubères afin d’induit facilement un cycle hormonal en injectant les hormones appropriées. Les souris mises en accouplement auront au minimum 5 semaines. Les mères porteuses seront matures, âgées entre 2 et 9 mois.