Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 15/03/2023
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-859801)
202 souris vont être utilisées, toutes tuées à l’issue, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance qualifié de léger à modéré. Elles reçoivent des administrations répétées d’un acide gras oméga3 par voies orale, sous-cutanée, intrapéritonéale ou intranasale, précédées d’un jeûne de quatre heures, puis une ponction intracardiaque terminale sous anesthésie, pour comparer les voies d’acheminement du DHA vers le cerveau. Le porteur présente ce travail comme une piste de prévention de la maladie d’Alzheimer, avec un éventuel essai clinique renvoyé à terme. Il affirme qu’une étude de biodistribution dans l’organisme ne peut se réaliser autrement que sur un modèle vivant, et prévoit la mise à mort de toutes les souris pour prélever fluides et tissus.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
La maladie d’Alzheimer (MA) est la forme la plus fréquente de maladie neurodégénérative associée à une démence chez les sujets âgés. L’élaboration et la mise sur le marché de nouveaux traitements pour lutter contre ce fléau est un défi sanitaire et économique majeur. Le stress oxydant induit par de nombreux facteurs environnementaux (notamment l’exposition à des polluants chimiques) est un évènement extrêmement précoce et jouant un rôle majeur dans la dégénérescence neuronale observée chez les malades d’Alzheimer. Notre projet a pour objectif de reconsidérer l’utilisation des acides gras de la famille oméga3 dans une approche de prévention de la MA, en contournant l’obstacle de leur faible biodisponibilité cérébrale par le biais de leur nanovectorisation et de l’utilisation de la voie d’administration intranasale. Cette étude consistera à évaluer et comparer la cinétique de biodistribution d’une forme nanovectorisée de l’acide docosahexaénoïque (DHA, un acide gras omega3) après administration par voie orale, intrapéritonéale, sous-cutanée, ou intranasale chez la souris. Nous pourrons ainsi déterminer la pertinence de l’administration intranasale par rapport aux autres voies d’administration afin d’enrichir le cerveau en DHA.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Ce projet permettra d’évaluer l’impact de la voie d’administration du DHA sur sa biodistribution et de déterminer si la voie d’administration intranasale offre un bénéfice pour cibler le cerveau par rapport à la voie orale classiquement utilisée (compléments alimentaires). A terme, ce projet a pour objectif de développer une formulation de DHA destinée à une administration par voie intranasale dans le cadre de la prévention de la maladie d’Alzheimer et pourrait donc déboucher sur la mise en place d’une étude clinique.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Les animaux, en fonction de leur groupe, pourront être soumis à : -une ou plusieurs administrations de DHA par voie orale -une ou plusieurs administrations de DHA par voie intrapéritonéale -une ou plusieurs administrations de DHA par voie sous-cutanée -une ou plusieurs administrations de DHA par voie intranasale – En fin de procédure, une ponction intracardiaque sera effectuée sous anesthésie générale.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Les administrations seront effectuées par une personne qualifiée et après une période d’habituation à l’expérimentateur. Les nuisances attendues sont liées au jeûn de 4 heures précédent l’administration de DHA ainsi qu’ à l’administration (ou aux administrations répétées) de la solution de DHA.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Les animaux seront tous euthanasiés afin de pouvoir récupérer les fluides biologiques et tissus pour le dosage du DHA.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
S’agissant d’une étude de l’impact de la voie d’administration du DHA sur sa cinétique de biodistribution dans l’organisme, il n’est pas envisageable de la réaliser autrement qu’en ayant recours à un modèle vivant. Des études préalables ont été réalisées in vitro afin de sélectionner la forme chimique du DHA (phospholipide, ester de cholestérol, triglycéride, libre) la plus adéquate pour favoriser son incorporation dans les cellules.
2. Réduction
Le nombre d’animaux (184) est réduit au minimum pour répondre aux objectifs du projet. Le nombre d’animaux dans chaque groupe, ainsi que le nombre de groupes est basé sur une connaissance approfondie des modèles et de l’expérience acquise par notre équipe et a été déterminé par une analyse de puissance statistique basée sur nos études précédentes Ici, 8 animaux par groupe seront nécessaires pour observer d’éventuels changements. A ce nombre d’animaux une marge de 10% (+18) sera ajoutée afin de compenser les aléas expérimentaux. Nombre total de souris : 202.
3. Raffinement
Afin de minimiser les effets du stress, mais également de contrôler l’état général des animaux, les souris seront manipulées chaque jour par l’expérimentateur en charge de l’expérience, avant chaque procédure. Durant la phase expérimentale, les animaux seront observés afin de déceler immédiatement toute souffrance et d’évaluer les potentiels effets indésirables. Les administrations par voie orale, sous-cutanée, intrapéritonéale ou intranasale seront effectuées par une personne qualifiée et après une période d’habituation.Tous les incidents et toutes observations anormales (comportement, poids, pelage, plaie,…) seront transmis à l’expérimentateur afin d’être traités dans les plus brefs délais et seront notés dans un tableau de suivi expérimental. Un animal sera euthanasié s’il présente : 1- une perte de poids > 15%; 2- une attitude inhabituelle traduisant un mal être (prostration, agressivité…); 3- l’apparition de toute altération de l’état général (altération du pelage, tumeur, excroissance, prolapsus…).
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
La souris est une espèce de choix pour les études pharmacocinétiques. Ces études de biodistribution chez l’animal vigile sont nécessaires pour appréhender la distribution des composés bioactifs chez l’homme dans le cadre du développement de nouvelles stratégies thérapeutiques. Les animaux seront utilisés à l’âge adulte (6 mois) étant donné que notre projet s’inscrit dans le cadre du développment d’une stratégie de prévention de la maladie d’Alzheimer destinée à être testée chez l’adulte.