Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 2023-07-25 00:00:00
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-965044)
840 souris vont être utilisées, toutes tuées à l’issue, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance modéré. Des souriceaux nouveau-nés subissent une chirurgie cérébrale sous anesthésie, dont une électroporation pouvant provoquer un arrêt cardio-respiratoire et la mort, avec un risque de cannibalisme par la mère et un stress lié à la séparation maternelle, avant d’être tués pour des analyses du cervelet. Le projet étudie le rôle des cellules en grain du cervelet dans le traitement des informations sensorielles et motrices. Le porteur affirme qu’aucun modèle in vitro ou in silico ne reproduit ces phénomènes du développement.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Le cervelet est une structure cérébrale qui permet à tout individu de s’adapter à son environnement en contrôlant et corrigeant la posture et les mouvements en fonction des informations qu’il reçoit du monde extérieur et du reste du corps. Une mauvaise transmission de ces informations pourrait être à l’origine de maladies neurologiques et psychiatriques, telles que des ataxies, des dystonies, des formes d’autisme ou de schizophrénie . L’objectif de ce projet est d’identifier comment les différents groupes de cellules en grain du cervelet qui forment la couche de cellules par laquelle les informations arrivent au cortex cérébelleux, influencent le fonctionnement et l’encodage des informations.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Ce projet va permettre de mieux comprendre les bases cellulaires des dysfonctionnements synaptiques dans le cortex cérébelleux chez la souris, en particulier au niveau de la couche d’entrée au cervelet, la couche des cellules en grain. Ces dysfonctionnements pourraient être à l’origine de troubles comportementaux associés à des troubles neurologiques et psychiatriques chez l’homme.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Tous les animaux subiront au moins une procédure d’identification et de génotypage sur animal vigile (durée 5 minutes). Un premier groupe d’animaux nouveau-nés subira une seule intervention chirurgicale d’une durée de 20 minutes maximum sous anesthésie et analgésie profonde. Un deuxième groupe d’animaux nouveau-nés subira une intervention chirurgicale d’une durée de 20 minutes maximum sous anesthésie et analgésie profonde .
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Une des chirurgie peut induire un arrêt cardio-respiratoire conduisant à la mort de la souris nouveau-née dans les minutes qui suivent l’électroporation. La séparation maternelle de plusieurs heures peut induire un stress pour la mère et les souris nouveau-nées. La chirurgie sur les souris nouveau-nées peut induire du cannibalisme par la mère. Des injections peuvent induire des sensations désagréables de piqure et des douleurs abdominales modérées. Des pertes de poids, des douleurs et réactions inflammatoires peuvent être induites par la chirurgie.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Dans les deux procédures les animaux sont mis à mort afin de réaliser des analyses électrophysiologiques, tissulaires et histologiques.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Pour ce projet, nous souhaitons étudier dans le cerveau de souris adultes des phénomènes biologiques complexes qui se mettent en place dans le cerveau des souris nouveau-nées. Ces phénomènes sont contrôlés à tout moment par différentes parties du cerveau. Il n’existe pas de modèle in vitro ou in silico qui puissent reproduire la complexité des phénomènes biologiques qui se mettent en place dans le cerveau pendant la croissance de la souris ce qui signifie que le modèle animal ne peut pas être remplacé.
2. Réduction
Le nombre d’animaux utilisés pour ce projet a été défini au plus juste pour nous permettre d’atteindre nos objectifs scientifiques et être statistiquement valides. Nous utiliserons des individus des 2 sexes afin de réduire le nombre d’individus à produire et produire des résultats spécifiques de genre. Pour définir statistiquement la taille des lots d’animaux à tester, nous nous appuyons sur des travaux publiés, ainsi que sur l’utilisation de logiciel approprié pour l’évaluation statistique du nombre d’animaux requis. l’utilisation conjointe de plusieurs outils expérimentaux permettra de diviser par deux le nombre d’animaux nécessaires pour le projet.
3. Raffinement
Les animaux sont hébergés dans des animaleries dont le fonctionnement a été conçu pour maximiser le confort et limiter la souffrance des animaux. En particulier, les souris sont hébergées en groupes sociaux. Elles font l’objet d’observations régulières tout au long de l’expérience et l’enrichissement (matériel de nidification et bâton à ronger) est systématiquement appliqué à toutes les cages. Les chirurgies seront réalisées sous anesthésie et analgésie. Les animaux seront observés tous les jours et leur comportement sera suivi afin de déceler tout signe d’inconfort ou de stress. Pour limiter le stress et le cannibalisme plusieurs types de raffinements seront utilisés: (1) les animaux seront rendus à la mère après un délai permettant d’attenuer les odeurs étrangères. (2) Nous ajouterons de la frisure et/ou des carrés de coton en quantité suffisante pour l’élaboration du nid, un tunnel et des barres de bois à ronger. Aucun changement de litière ne sera réalisé dans les 24 h qui précèdent et les 72h qui suivent la chirugie. En cas de perte de poids, nous mettrons à disposition de l’eau gélifié et de la nourriture dans la cage. Enfin, des points limites spécifiques ont été définis et le raffinement s’appliquera selon une grille de score pour une prise en charge adaptée des animaux.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Le choix de la souris est justifié par le fait que de nombreux modèles génétiques développés chez la souris ont permis de comprendre les mécanismes physiologiques et moléculaires responsables de pathologies neurologiques humaines. Les voies anatomiques et le traitement réalisé par le cervelet sont similaires chez la souris et chez l’homme. Nous utiliserons des souris transgénique afin de cibler les groupes de cellules que nous allons étudier. Ces groupes de cellules seront manipulées génétiquement très tôt au cours du développement des souriceaux ce qui nous permettra d’étudier leur rôle dans l’encodage des informations pendant le développement du cervelet. Les procédures expérimentales seront donc réalisées chez des souris nouveau-nées (3 à 12 jours après la naissance).