Greffe de cellules souches et nanotechnologies comme stratégie thérapeutique innovante dans un modèle rat d’AVC. Suivi de l’évolution du tissu cérébral par IRM et histologie EU 2/2.

L’accident vasculaire cérébral est une maladie grave entrainant un déficit neurologique lié à des lésions vasculaires. L’accident vasculaire cérébral est le résultat de l’obstruction d’un vaisseau sanguin (ischémique) ou de la rupture d’un vaisseau (hémorragique). Si les progrès actuels dans le domaine des organoides cérébraux ou de l’impression 3D de tissu cérébral in vitro sont remarquables, ils ne permettent toujours pas de recréer l’ensemble fonctionnel d’un cerveau. En particulier, les aspects vasculaires et les intéractions sytémiques ne sont pas encore accessibles avec ces méthodes alternatives à l’utilisation d’animaux. En effet, l’accident vascilaure cérébral conduit à des mécanismes comme l’inflammation, la migration cellulaire de cellules souches, la formation d’une cicatrice , la dégénérence des fibres nerveauses, et des processus de reconnexion dont la complexité et les interactions ne peuvent pas actuellement être simulées sur plusieurs mois par des approches in vitro ou ex vivo. Ainsi l’objectif de notre projet nécessite l’utilisation d’un modèle animal d’accident vasculaire cérébral. Le bénéfice de notre stratégie thérapeutique par greffe de biomatériaux (avec ou sans cellules) sur la récupération fonctionnelle de la motricité doit être évaluée sur des animaux vivants. La force d’agrippement, et le statut neurologique des animaux seront testés sur le long terme. Les effets des atteintes cérébrales et de la greffe sur l’architecture tissulaire du cerveau seront évaluée sur plusieurs mois par Imagerie par Résonance Magnétique. Nous avons déjà fait la preuve de concept de l’efficacité de notre stratégie thérapeutique sur le rat en utilisant des biomatériaux non biodégradables et projetons de la répliquer avec des biomatériaux biodégradables pour nous rapprocher de la situation physiologique.

L’utilisation de méthodes non invasive comme l’IRM et l’évaluation motrice permettent le suivi longitudinal sur un même groupe d’animaux. Ainsi, les données peuvent être appariées, ce qui augmente la puissance statistique et limite le nombre d’animaux nécessaires dans l’étude. Des tests statistiques non paramétriques et de corrélation seront utilisés pour évaluer notre approche thérapeutique innovante de l’accident vasculaire cérébral. Nous réutiliserons les données d’animaux contrôles d’un protocole antérieur si possible.

Le principe fondamental des 5 libertés est respecté sur toute la durée de l’étude. Les rats sont hébergés dans des cages ventilées, en groupes de 2 (étant des animaux grégaires), dans une salle spécialement réservée aux rats. L’alimentation est disponible en permanence (ad libitum), y compris pendant les phases d’entraînement et d’évaluation motrice, sans jeûne ni restriction alimentaire. Le suivi de l’état de santé général des animaux est assuré par le personnel de zootechnie, qui les pèse chaque semaine et effectue des contrôles vétérinaires réguliers. Une attention particulière est portée aux animaux opérés, qui font l’objet d’une surveillance quotidienne par le personnel compétent. Cette surveillance inclut l’observation de l’appétit, du poids corporel, de la mobilité, de l’état du pelage et du comportement des animaux et fait l’objet d’un scoring clinique. La valeur du score détermine l’action à réaliser sur l’animal pour une prise en charge de la douleur, une notification de surveillance accrue, une exclusion de l’étude ou une mise à mort. La prise en charge de la douleur est mise en place avec des protocoles stricts validés, prenant en compte le principe de nociception et son impact sur les animaux et les résultats de l’étude. Un enrichissement environnemental est intégré au protocole, comprenant divers éléments pour stimuler cognitivement les rats (tunnels, boule de fouille, boule traversante, odeur naturelles variées, ..), ainsi qu’une composante sociale (arène de rencontre intercage). Les animaux sont conditionnés pour la réalisation de tâches motrices, renforcés positivement. Le procédé est très peu anxiogènes.