Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 2026-08-28 00:00:00
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-333269)
480 souris vont être utilisées, toutes tuées à l’issue, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance sévère. Dès le jour de leur naissance et jusqu’à trois jours d’âge, les souriceaux reçoivent une injection dans le cerveau sous anesthésie, avec un risque d’hémorragie, d’hypothermie et de rejet de la portée par leur mère, puis subissent la pose chirurgicale d’un dispositif sur la tête, une privation visuelle installée par chirurgie et maintenue 72 heures, et jusqu’à trois séances d’enregistrement d’une heure la tête immobilisée. Ce que le porteur en attend reste lointain, mieux comprendre comment se construisent les circuits du cortex visuel et, à plus long terme, éclairer des troubles du développement cérébral ou des atteintes précoces de la vision. Le calendrier des mises à mort suit celui de la période sensible du cortex visuel de la souris, située entre 21 et 27 jours après la naissance, les analyses ayant lieu entre 18 et 21 jours, autour de 23 à 30 jours, ou entre 49 et 110 jours.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Ce projet vise à comprendre pourquoi une zone spécifique du cerveau nommée cortex visuel est particulièrement malléable pendant une courte période du développement. Nous étudierons comment certaines connexions entre neurones se mettent en place avant, pendant et après cette période, et comment une modification temporaire de l’expérience visuelle peut remodeler ces circuits. L’objectif est d’identifier les mécanismes qui rendent le cerveau plus sensible à l’expérience à ce moment précis de la vie.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Ce travail permettra de mieux comprendre comment se construisent les circuits de la zone spécifique du cerveau étudiée ici (cortex visuel) au cours du développement. À plus long terme, il pourrait aider à mieux comprendre certaines situations dans lesquelles cette maturation se déroule mal, par exemple lors de troubles du développement du cerveau ou de certaines atteintes précoces de la vision. Il pourrait aussi contribuer à identifier des pistes pour restaurer de la plasticité (faculté à se remodeler) dans le cerveau adulte.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Tous les souriceaux recevront une injection dans une zone du cerveau (1 fois, durée 5minutes environ) sous anesthésie générale. Minimum 10 jours après cette injection, ces animaux auront une procédure chirurgicale pour l’implantation d’un dispositif sur leur tête. Cette chirurgie sera réalisée sous anesthésie générale et analgésie adaptée (1 fois, durée 1h maximum). Il y aura ensuite une première séance d’enregistrement par imagerie sous anesthésie générale pour une partie des animaux (60minutes maximum, 1 seule session) ou éveillés pour l’autre partie. Dans ce dernier cas, les animaux seront habitués au dispositif expérimental pendant 2-3 jours, avec 1 à 2 sessions quotidiennes en commençant par quelques minutes et en augmentant progressivement jusqu’à 1h maximum. Une chirurgie sera ensuite réalisée pour tous les animaux afin de mettre en place notre modèle de privation sensorielle (une fois, sous anesthésie générale et analgésie adaptée, durée 10 minutes). Ce modèle sera maintenu pendant 72 h maximum, puis retiré sous anesthésie générale (une fois, durée 5 minutes). Chez les animaux imagés sous anesthésie, l’enregistrement post-privation est réalisé dans le prolongement direct de cette même anesthésie, sans réveil intermédiaire (1 session, 60 minutes maximum) : aucune anesthésie supplémentaire n’est donc nécessaire pour ces animaux. Chez les animaux imagés en condition vigile, le retrait des sutures est suivi d’un réveil complet en chambre chauffée, puis les enregistrements sont réalisés chez l’animal éveillé, à raison d’une session par jour d’une heure maximum, pendant 3 jours consécutifs au maximum, soit 3 sessions par animal.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Les animaux pourront ressentir un stress dû aux manipulations et contentions nécessaires au cours du projet. L’injection chez les souriceaux est associée à un risque d’hémorragie, une hypothermie et un risque de rejet de la portée par la mère. Les chirurgies seront associées à un risque de douleur et d’inconfort pendant quelques jours. Les anesthésies générales entraineront des risques d’hypothermie, de sécheresse oculaire et de difficultés cardiorespiratoire. De plus, après l’implantation du dispositif, l’animal pourra ressentir un inconfort et une gêne due à l’encombrement. Il existe également un risque rare de perte ou d’infection du dispositif. L’habituation des animaux à la condition de fixation de la tête peut également représenter une source de stress. La privation sensorielle impliquera des risques de gênes, d’inconfort et de stress pour les animaux. Afin de réaliser une imagerie du cerveau chez les animaux éveillés leur tête devra être immobilisée, ce qui limitera les mouvements de leur tête et génèrera un stress pour les animaux.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Tous les animaux seront euthanasiés par une méthode réglementaire à l’issue de la procédure afin de prélever les organes d’intérêt pour réaliser des analyses histologiques, anatomiques, électrophysiologiques ou d’imagerie ex vivo indispensables pour répondre à l’objectif scientifique du projet.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Il n’existe pas aujourd’hui de méthode alternative permettant de reproduire fidèlement l’ensemble des interactions entre le cerveau en développement, les voies visuelles et l’expérience sensorielle. L’étude de la période critique nécessite donc l’utilisation d’animaux vivants. Des approches sur cellules sont toutefois utilisées en amont lorsque cela est possible, par exemple pour vérifier certains outils expérimentaux, afin de limiter le recours aux animaux.
2. Réduction
Le nombre d’animaux a été limité au strict nécessaire pour obtenir des résultats solides et statistiquement analysables. Les groupes ont été définis à partir des questions scientifiques posées, des connaissances déjà disponibles et d’estimations d’effectifs permettant d’éviter des répétitions inutiles. Le projet comprend 480 souris réparties en 48 lots de 10 animaux, cet effectif a été déterminé à partir de calcul statistiques et permettra de comparer les conditions essentielles tout en respectant le principe de réduction. Les résultats seront analysés avec les tests statistiques adaptés.
3. Raffinement
Les animaux seront hébergés dans des conditions conformes à la réglementation en vigueur pour l’espèce, avec accès à l’eau et à l’alimentation à volonté, et bénéficieront d’un enrichissement du milieu adapté. Ils feront l’objet d’une observation quotidienne ; toute anomalie sera prise en charge en concertation avec la structure chargée du bien-être animal et les vétérinaires. Des points limites prédéfinis seront appliqués afin de prévenir toute souffrance. Pour toutes les interventions chez les souriceaux un raffinement spécifique sera mis en œuvre, en réduisant au strict minimum la durée de manipulation et de séparation de la mère, en utilisant un matériel adapté (cadre stéréotaxique équipé d’adaptateurs pour souriceaux, système de fixation de tête léger et de profil bas (anneau de 20 mm, < 1 g) et en veillant à la récupération de la température corporelle avant la remise en cage. Nous vérifierons également leur bonne prise en charge par leur mère après leur retour en cage. Par ailleurs, pendant la gestation, les mères seront habituées à l’expérimentateur par des manipulations régulières, afin de limiter le stress lors des interventions sur les souriceaux. Les procédures seront réalisées sous anesthésie et analgésie adaptées selon leur nature. Après les chirurgies, les animaux seront maintenus au chaud, surveillés jusqu’au réveil complet avant d’être replacés avec leurs congénères. Ils seront ensuite suivis quotidiennement pendant 3 jours jusqu’à récupération clinique satisfaisante. Un soutien alimentaire sera mis à disposition en période post-opératoire pour faciliter la récupération des animaux. Pour les procédures d’imagerie, la durée sera limitée au minimum nécessaire, lors des imageries anesthésiées un maintien de la température corporelle, une protection oculaire et une surveillance adaptée seront assurées. Les animaux réalisant les imageries éveillées seront tout d’abord habitués au dispositif de manière progressive pendant plusieurs jours.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Chez les mammifères, y compris l’humain, le cerveau possède des mécanismes de plasticité assez similaires. Ainsi, les résultats obtenus chez la souris peuvent aider à mieux comprendre certains processus comparables chez l’humain. La souris est un modèle particulièrement utile pour étudier le développement et l’adaptation du cortex visuel, notamment pendant une phase clé appelée « période critique de plasticité ». Durant cette période, le cerveau est très sensible aux expériences visuelles et peut modifier son fonctionnement en réponse à son environnement. Dans ce projet, nous utiliserons quatre lignées de souris génétiquement modifiées. Elles permettront d’observer ou de cibler certaines populations de neurones, en particulier les neurones inhibiteurs. Certaines de ces souris expriment également un indicateur fluorescent qui permet de suivre l’activité des neurones. Ces outils nous aideront à mieux comprendre comment différentes populations de cellules participent au développement du cortex visuel et à son adaptation après une privation sensorielle. Chez la souris, la période critique du cortex visuel a lieu principalement entre 21 et 27 jours après la naissance. Afin d’étudier le rôle de certains gènes dans ce phénomène, leur activité sera modifiée avant cette période, pour laisser le temps à la modification d’être efficace. Les injections nécessaires seront donc réalisées très tôt après la naissance, entre le jour de la naissance et 3 jours d’âge. Une privation sensorielle sera ensuite effectuée à différents moments du développement, avant, pendant ou après cette période sensible, afin d’évaluer la capacité du cortex visuel à s’adapter. Les analyses seront réalisées à différents âges selon les groupes, notamment entre 18 et 21 jours, autour de 23 à 30 jours, ou plus tard, entre 49 et 110 jours, à l’aide de techniques d’imagerie et de marquage cellulaire.