Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 19/09/2023
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-913858)
26 veaux de quatre à huit semaines vont être utilisés dans des procédures impliquant un niveau de souffrance modéré, 20 tués à l’issue et 6 gardés en réserve, réaffectés s’ils ne servent pas. Une injection de lipopolysaccharide provoque une inflammation, puis 20 prélèvements sanguins sur 72 heures retirent jusqu’à 262 mL de sang par animal, pour tester l’association d’un anti-inflammatoire et d’un antibiotique. Le porteur prévoit une mise à mort par tige perforante et exsanguination, les produits testés n’ayant pas d’autorisation de mise sur le marché. Il affirme qu’aucune méthode alternative ne reproduit la diffusion des principes actifs et juge « indispensable » le recours à l’animal entier.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Ce projet présente 4 différents objectifs: 1- Étudier les symptômes cliniques après une stimulation par LPS par administration sous cutannée 5.0 µg/kg par animal. 2- Évaluer la sécurité et l’efficacité d’une injection sous-cutanée d’un AINS en association avec un antibiotique longue action après une provocation expérimentale au Lipopolysaccharide (LPS) en comparaison avec l’antibiotique longue action seule (sous-cutané) et l’ AINS seul (sous-cutané) en tant que monoproduits et une solution saline. 3- Évaluer les propriétés pharmacocinétiques des doses sélectionnées de l’AINS en association avec l’antibiotique longue action. 4- Évaluer l’évolution de certains marqueurs inflammatoires pertinents après le traitement.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Ce projet permettra de mettre en avant les bénéfices de l’association de l’AINS avec l’antibiotique longue action, l’efficacité et la sécurité de cette administration conjuguée. Cela permettra de mettre en avant l’action de ce complexe sur les marqueurs de l’inflammation.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
La première étape est de créer le modèle inflammatoire. Pour cela, les 20 animaux sélectionnés recevront une administration de LPS ( Lipopolysaccharide provenant des bactéries Escherichia Coli) à la dose de 5.0 µg/kg soit 1 mL/50 kg. Puis les animaux seront répartis en 4 groupe de 5 animaux. Ils auront une administration sous cutanée de formulations tests c’est à dire d’une injection sous-cutanée d’un AINS en association avec un antibiotique longue action en comparaison avec l’AINS seul, l’antibiotique longue action seule en tant que monoproduits et une solution saline. Volume administré: 1 mL/40 kg. Puis Des prélèvements de sang seront également réalisés, 20 temps de prélèvements sur 72h (T0, 0.25, 0.5, 1, 1.5, 2, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 6, 9, 12, 18, 24, 28, 32, 48, 56, 72 h aprés administration. La collecte de sang sera effectuée à l’aide d’un vacutainer avec des tubes d’héparine de lithium (LiHe) et d’héparine de sodium (SoHe) et des aiguilles stériles de taille appropriée. Les aiguilles seront remplacées entre chaque veau et chaque prélèvement. Les échantillons de sang seront prélevés au niveau des veines jugulaires. Les sites de prélèvement seront alternés autant que possible. Volume total prélevé: 262 mL de sang par animal sur 72h. La création du modèle inflammatoire se fait le jour des administrations des produits tests et consiste à faire une administration en sous cutannée. Toutes les administations se font sur une seule journée. Les prélèvements sanguins seront réparti sur 3 jours. La phase animale de ce projet se terminera 72h aprés l’administration des éléments tests.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Il est possible d’observer des effets indésirables. Il peut s’agir d’une forte fièvre, modification de la respiration, modification du comportement général des animaux ( exemple déambulation, toux…), présence éventuelle d’écoulement occulaire ou nasal.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
A la fin de ce projet, tous les animaux traités seront euthanasiés selon les bonnes pratiques vétérinaires et la réglementation en vigueur, car ces animaux auront reçu des éléments tests sans AMM. Méthode physique: étourdissement à l’aide d’une tige perforante suivi de l’exsanguination. L’exsanguination consiste à la section des veines jugulaires et/ou artères carotides. Il est prévu 6 animaux réserves. Si les 6 animaux réserves ne sont pas utilisés ils pourront dans ce cas être replacés. La décision sera prise par le vétérinaire responsable.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Aucune méthode alternative ne permet actuellement de reproduire la diffusion d’un ou de plusieurs principes actifs dans le sang et leurs effets sur l’animal, il est donc indispensable de recourir à l’animal entier.
2. Réduction
Dans cette étude, il est prévu d’inclure 26 animaux ( 20 animaux administrés et 6 animaux de réserve). C’est le nombre d’animaux minimum requis pour avoir des résultats interprétables.
3. Raffinement
Les animaux auront une période d’acclimatation d’au minimum 2 semaines. De leur arrivée à la fin de l’étude, les veaux seront logés en groupes de 5 animaux. Les veaux seront couchés sur de la paille dans un système de litière profonde, de la paille propre étant fournie si nécessaire. Une attention particulière sera portée au raffinement et à l’enrichissement du milieu autant que possible. La thermorégulation et la ventilation des logements des animaux ne seront pas contrôlées puisque les logements sont ouverts sur l’environnement extérieur. L’éclairage naturel sera utilisé. La température et l’humidité du logement des veaux seront enregistrées pendant la phase animale.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Les veaux sont particulièrement sensibles aux LPS, et constituent donc une espèce de choix pour créer un modèle de l’inflammation. Les jeunes veaux sont très sensibles aux maladies respiratoires et constituent donc un modèle approprié à utiliser pour tester l’efficacité des produits contre les maladies respiratoires. Ils constituent également l’espèce cible de ce produit. Les veaux auront 4 à 8 semaines le jour de l’administration