Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 02/10/2025
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-455277)
Privées de nourriture pendant douze à quinze heures, puis gavées d’une formulation d’acides nucléiques, 68 souris saines vont être utilisées dans des procédures impliquant un niveau de souffrance léger. Toutes sont anesthésiées par injection dans l’abdomen, saignées, puis tuées pour que leur intestin soit prélevé. L’enjeu déclaré est une étude de faisabilité, destinée à vérifier si ces formulations pénètrent les cellules intestinales avant d’envisager des expériences thérapeutiques sur un modèle murin de la maladie. Le porteur annonce des mises à mort « à différents temps post-gavage » sans préciser lesquels, et fonde son effectif sur des lots de quatre animaux sans détailler comment il arrive à soixante-huit.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Cette demande d’autorisation de projet concerne une expérience préliminaire de mise au point et de faisabilité chez la souris. Dans le cas de pathologie intestinale, une possibilité de traitement est l’administration d’acides nucléiques par voie orale pour provoquer l’expression d’un gène dans les cellules intestinales. Notre laboratoire met au point des formulations d’acides nucléiques à cet effet. Nous voulons ici étudier sur animaux sains la biodistribution de ces formulations dans le tissu intestinal. Pour cela, les formulations seront administrées aux animaux par gavage. A différents temps post-gavage, les animaux seront mis à mort et les tissus intestinaux prélevés pour analyse histologique ou cytométrique ultérieure. Ceci nous permettra d’évaluer dans quels types cellulaires intestinaux se trouvent les acides nucléiques administrés, dans quelles proportions et pendant combien de temps, et de déterminer si le projet peut être poursuivi par des expériences thérapeutiques chez la souris avec un modèle animal transgénique de la pathologie.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
A court terme, le projet permettra de savoir si nos formulations d’acides nucléiques pénètrent efficacement dans les cellules intestinales, permettant une expression ou inhibition de gène, et pendant combien de temps. En cas de succès, cela nous permettra de poursuivre un projet à plus long terme de thérapie génique contre une maladie génétique intestinale héréditaire.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Les animaux subiront une privation de nourriture (mais pas d’eau) pendant 12 à 15h. Ils subiront ensuite l’acte de gavage, qui dure de 15 à 30 secondes. Au temps nécessaire, les souris seront anesthésiés par injection intrapéritonéale, ce qui dure environ 15 secondes, puis du sang sera prélevé sous anesthésie, l’acte durant quelques secondes.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Les animaux subiront un gavage : la contention et le gavage seront source d’un stress léger à modéré de courte durée, de même que la privation de nourriture pendant 12 à 15h. L’anesthésie par injection intrapéritonéale causera un stress et une douleur légère de courte durée.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Comme les analyses nécessaires seront réalisées sur les tissus intestinaux, que nous devrons prélever, tous les animaux seront mis à mort
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Nous avons effectué toutes les analyses physicochimiques nécessaires à propos de nos formulations d’acides nucléiques, et vérifié leur efficacité sur culture cellulaire. Nous avons également montré que ces formulations transfectent des lignées cellulaires de type intestinal. Mais nous devons nous assurer de l’efficacité réelle sur un intestin complet, pour lequel aucun modèle ex vivo n’existe. Nous devons donc avoir recours à l’expérimentation animale.
2. Réduction
Ce projet n’est pas une évaluation thérapeutique, mais une étude de faisabilité et par expérience d’un projet précédent portant sur la colite ulcérative, et d’autres études de biodistribution du laboratoire, nous savons que 4 animaux par lots suffisent à obtenir une évaluation qualitative exploitable après analyse par un test statistique non paramétrique. Ainsi, le nombre d’animaux a été déterminé sur la base de 4 animaux par lots. Nos études précédentes nous permettent par ailleurs de n’étudier qu’une seule dose de siRNA, que nous savons être efficace. Pour les ARNm messagers, pour lesquels nous avons moins de recul, deux doses seront étudiées, en se basant sur la littérature.
3. Raffinement
Des anesthésiques et analgésiques seront utilisés pour supprimer la douleur. Des points limites spécifiques ont été mis en place pour éviter toute douleur aux animaux. Les animaux seront hébergés par groupes dans un environnement enrichi.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Nous devons réaliser nos études sur un intestin de mammifère. Celui de la souris est suffisamment proche de l’intestin humain pour permettre d’obtenir des résultats pertinents. De plus, un modèle murin de la pathologie existe, avec lequel nous pourrons poursuivre le projet. Nous utiliserons des souris jeunes adultes au système intestinal complet et fonctionnel.