Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 2024-09-06 00:00:00
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-571176)
Chaque souris subit un unique prélèvement de sang par ponction intracardiaque, dix minutes sous anesthésie, sans jamais se réveiller. 15 souris génétiquement modifiées pour exprimer un récepteur humain vont être utilisées ainsi, tuées avant tout réveil, la mise à mort servant à obtenir le volume de sang voulu. Deux expériences en laboratoire doivent vérifier que le gène humain fonctionne chez elles, l’objet réel étant de préparer des études réglementaires et une demande d’essai clinique. Le candidat médicament a déjà montré un effet sur du sang humain et du sang de singe, et le bénéfice avancé est de « limiter drastiquement » le recours aux primates non humains dans les tests de toxicité à venir.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Dans le contexte du développement d’un futur médicament pour le traitement de maladies inflammatoires chroniques de l’intestin (Maladie de Crohn et Rectocolite hémorragique), nous souhaiterions utiliser des souris génétiquement modifiées (souris exprimant un gène humain) afin d’évaluer la possibilité d’utiliser cette lignée de souris pour des futures études réglementaires. En effet, le futur médicament cible spécifiquement un gène humain et ne fonctionne pas avec ce même gène chez la souris, c’est pourquoi ces souris génétiquement modifiées ont été dévellopées. Le but de notre projet est de vérifier si le gène humain fonctionne correctement dans ces souris modifiées. Pour cela, nous avons besoin de récupérer le sang de ces souris pour isoler les cellules sanguines et réaliser des expériences au laboratoire. Les souris seront anesthésiées pour effectuer un prélèvement sanguin, un anti-douleur sera administré avant le prélèvement sanguin et le sang obtenu sera traité pour isoler les cellules sanguines (neutrophiles). Deux expériences seront realisées au laboratoire sur ces cellules sanguines pour démontrer que le gène humain fonctionne bien dans ces souris. L’objectif final de ce projet est de préparer la mise en place d’un essai clinique en Europe et aux Etats Unis pour montrer l’efficacité de notre futur médicament pour le traitement des maladies inflammatoires chroniques de l’intestin .
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
En cas de résultats positifs avec ces souris génétiquement modifiées, nous pourrions les utiliser lors d’études réglementaires pour tester la tolérance et la toxicité de notre médicament dans le but de limiter drastiquement le recours à des singes (primates non humains).
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Injection en intrapéritonéale d’un analgésique, puis prélèvement sanguin sur animal anesthésié. Fréquence : 1 seul prélèvement sanguin par animal. Durée : 10min
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Ces souris ne présenteront pas d’effets indésirables visibles à l’oeil. Le prélèvement sanguin sera réalisé sous antalgie et anesthésie pour éviter les douleurs/souffrances aux animaux. Cependant, un analgésique sera administré en intra péritonéal aux souris 1h avant la ponction intra-cardiaque pouvant engendrer une nuisance aux souris mais la douleur sera légère et de courte durée.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Tous les animaux seront mis à mort afin d’obtenir le volume sanguin nécessaire au projet.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
L’efficacité du candidat médicament a été validé au préalable dans un modèle cellulaire humain ainsi que dans un modèle cellulaire chez le singe. En effet, des tests préliminaires ont été réalisés en utilisant du sang humain et du sang de singe montrant un effet thérapeutique. Dans le cadre de notre demande d’autorisation d’essai clinique, ces tests doivent être réitérés chez la souris.
2. Réduction
Le nombre de souris utilisé pour le projet principal (10 souris: 5 males et 5 femelles) a été défini en fonction du nombre de cellules pouvant être isolées par millilitre de sang et du nombre de conditions expérimentales nécessaires pour répondre aux objectifs du projet. De plus, en mélangeant le sang des souris males et femelles, nous limitons les croisements et donc reduisons le nombre d’animaux utilisés.
3. Raffinement
Les souris bénéficieront d’une période d’acclimatation de 1 semaine dans l’établissement utilisateur avant le début du projet afin de réduire le stress dû au transport et au changement d’animalerie. Les souris seront réparties en deux groupes de 5 souris par cage en fonction de leur sexe. Les cages seront enrichies avec des buchettes, du coton et de la frisure de papier craft. Afin d’appliquer le principe de raffinement, un anti douleur sera administré aux souris 1h avant le prélèvement sanguin. De plus, un anesthésique local sera également appliqué au niveau de la cage thoracique pour limiter la douleur induite par le prélèvement sanguin qui sera effectué sur un animal vivant anesthésié.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Notre molécule thérapeutique est spécifique d’une protéine humaine et n’interagit pas avec la souris. Pour palier à cela, nous avons développé un modèle de souris qui exprime cette protéine humaine afin de réaliser des études nécessaires au développement pré-clinique de notre candidat médicament. Pour ce projet, des souris adultes de 8 semaines seront utilisées car cela représente l’âge adulte. De plus, cet âge est optimum car il permet d’obtenir le volume sanguin nécessaire à la réalisation du projet avec seulement 10 souris.