Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 2024-02-16 00:00:00
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-854194)
Pour tester le caractère perturbateur endocrinien de substances soumises par des industriels, 7050 xénopes sont exploités dans des procédures impliquant un niveau de souffrance allant jusqu’à sévère pour 1950 d’entre eux, tous tués à la fin de l’essai. Le RNT indique que l’essai de toxicité aiguë peut aller jusqu’à la mort et que l’exposition aux substances peut provoquer malformations, difformités des membres, lésions hémorragiques et infections. La description des procédures se limite à une exposition de 96 heures à 21 jours, sans autre détail sur le suivi des animaux. Cette prestation de service commerciale répond aux exigences de l’essai réglementaire OCDE 231.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Dans le cadre de prestation de service pour des industriels, des institutionnels ou des bureaux d’étude, des essais sont menés sur les amphibiens afin de déterminer le caractère perturbateur endocrinien en adéquation avec les règlementations des différents pays.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Ce projet permet de déceler les substances susceptibles de présenter un caractère perurbateur endocrinien dans un but de protection de l’homme et de l’environnement.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Exposition aux substance de 96h à 21j.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
L’essai préliminaire étant un essai de toxicité aiguë, les nuisances attendues peuvent aller jusqu’à la mort. L’essai définitif visant à déceler des perturbations sur le développement des amphibiens, les nuisances attendues peuvent être l’apparition de malformations ou des retards de développement. L’exposition à des substances chimiques peut également entrainer des signes de toxicité tel que des malformations apparentes et les lésions se manifestant éventuellement par des anomalies morphologiques (par exemple difformité des membres), des lésions hémorragiques et des infections bactériennes ou fongiques pouvant aller jusqu’à la mort.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Tous les animaux de la procédure sont mis à mort à la fin de l’essai, des mesures post-mortem et de l’histopathologie devant être réalisées.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Le guide définit une approche par niveau des tests à réaliser. Ainsi, dans un premier temps, la substance ou le mélange est évalué(e) à l’aide de méthode in vitro. L’essai OCDE 231 est réalisé dans le cadre de demande des autorités pour la confirmation ou non du caractère perturbateur endocrinien.
2. Réduction
Le nombre minimum requis comprend trois concentrations d’essai et 2 témoins. La Concentration Maximale à Tester est définie comme la concentration de la substance d’essai la plus élevée entraînant moins de 10 % de mortalité aiguë. Pour recourir à cette approche, des données empiriques relatives à la mortalité aiguë permettant d’estimer la valeur de la CMT sont nécessaires. La détermination de la CMT peut s’avérer inexacte, et requiert donc généralement un avis professionnel. Si les modèles de régression constituent les outils les plus solides techniquement pour estimer la CMT, il est néanmoins possible d’en obtenir une approximation utile en divisant par trois les données existantes de toxicité aiguë exprimée par la CL50. Les données de toxicité aiguë peuvent cependant manquer pour les espèces employées dans l’essai. Si ces valeurs ne sont pas disponibles pour ces espèces, un essai de CL50 peut être effectué sur 96 h avec des têtards représentatifs (c’est-à-dire au même stade de développement) de la population soumise à l’EMA. Il est également possible, lorsque des données sur d’autres espèces aquatiques sont disponibles (par exemple des études de CL50 chez les poissons ou chez d’autres amphibiens), de faire appel à l’avis d’un professionnel qui fournira une estimation de la CMT probable, au moyen d’une extrapolation interespèces.
3. Raffinement
Les amphibiens seront maintenus dans un environnement permettant une croissance optimale en termes de qualité d’eau et d’alimentation. Les animaux seront surveillés quotidiennement. Une grille de points limites prenant en compte des critères comportementaux et morphologiques permettant de scorer les individus sera utilisée. Un score intermédiaire déclenchera un suivi plus rapproché (2 fois par jours week-end compris). L’atteinte d’un point limite entrainera le retrait de l’organisme et sa mise à mort.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
L’espèce utilisée est celle préconisée dans les normes imposées par les règlementations Xenopus laevis est une espèce élevée couramment dans les laboratoires du monde entier, et aisément accessible auprès de fournisseurs commerciaux. Sa reproduction peut être induite facilement tout au long de l’année au moyen d’injections de gonadotropine chorionique humaine (hCG), les larves ainsi obtenues peuvent être élevées en grand nombre de manière systématique jusqu’aux stades de développement voulus, afin d’appliquer des protocoles d’essai spécifiques au stade de développement. Dans le cadre du présent essai, il est préférable d’utiliser des larves issues d’adultes élevés in situ. Bien qu’il ne s’agisse pas de la procédure privilégiée, il est également possible de transférer les œufs et les embryons à partir d’un autre laboratoire menant cet essai, et de leur permettre de s’acclimater. En revanche, l’expédition d’animaux au stade larvaire destinés à l’essai n’est pas acceptable L’exposition commence avec des embryons au stade de développement 51 de la table de Niewkoop et Faber et durera 21 jours.