Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 2024-02-07 00:00:00
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-934308)
320 souris vont être utilisées, toutes tuées à l’issue, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance modéré. Des souris immunodéficientes reçoivent une greffe de peau humaine sous anesthésie, une irradiation, une injection de lymphocytes T régulateurs et des prélèvements sanguins répétés sur trois mois. Le projet valide une thérapie cellulaire censée remplacer les immunosuppresseurs pour éviter le rejet de greffe. Le porteur qualifie ces expériences d' »indispensables » pour obtenir l’autorisation de l’agence du médicament et convaincre les financeurs de l’essai clinique.
Résumé produit par un modèle de langage à partir du seul texte du laboratoire, selon une méthode arrêtée par l’OXA. Publié sans relecture individuelle préalable, sous la responsabilité de l’association, et corrigé au fil des relectures.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
Décrire les objectifs du projet.
Note de l'OXA. Cette question est celle du formulaire européen de résumé non technique. Elle est posée au laboratoire qui demande l'autorisation, et sa réponse est écrite avant que la première procédure commence (arrêté du 1er février 2013, art. 5). Ces objectifs servent à justifier l'utilisation des animaux devant le comité d'éthique. Aucun document public ne dira ensuite s'ils ont été atteints : la directive permet aux États de faire mettre à jour le résumé avec les résultats de l'appréciation rétrospective (directive 2010/63/UE, art. 43), la base européenne prévoit de les recevoir, et aucune entrée française n'en porte (base ALURES).
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les immunosuppresseurs induisent des effets secondaires graves chez les patients transplantés avec un organe solide ou atteints de maladie auto-immune tels que des cancers et infections fréquentes et graves et ne sont pas efficaces chez les patients greffés avec des cellules souches après chimiothérapie. La thérapie cellulaire a pour but de remplacer les traitements immunosuppresseurs pour éviter leurs effets secondaires et être plus efficaces, par une injection unique de cellules régulatrices. Les essais cliniques de phase I/IIa avec ces cellules ont montré des résultats encourageants. Il existe plusieurs types de cellules que nous pourrions associer et dont l’efficacité thérapeutiquepeut être optimisée. Nous avons précisé ces associations et optimisations in vitro et nous devons évaluer la dose thérapeutique et l’absence d’effet secondaire dans les modèles pré-cliniques de souris avant de pouvoir les administrer chez l’Homme.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Note de l'OXA. Le formulaire européen demande les bénéfices « susceptibles de découler » du projet. Il appelle donc une projection, et il l'obtient : ce que le laboratoire écrit ici est ce qu'il espère, avant d'avoir commencé. Deux chercheuses ont repris six corpus d'études précliniques déjà menées et pesé les dommages réellement infligés aux animaux contre les bénéfices cliniques réellement obtenus : moins de 7 % de ces études ressortaient défendables (Pound et Nicol, 2018).
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Cette thérapie vise à empêcher le rejet d’organe et soigner les patients greffés avec des cellules souches après chimiothérapie, sans immunosuppresseurs pharmacologiques et sans effets secondaires. Ces expériences précliniques sont indispensables pour évaluer la sécurité d’emploi et l’efficacité de cette thérapie cellulaire pour obtenir l’approbation de l’Agence Nationale de Sécurité du Médicament et des produits de santé de leur application chez l’Homme, et pour convaincre les agences nationales de financer l’essai clinique.
Nuisances prévues, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Note de l'OXA. La formule « en règle générale » autorise une réponse générale, et c'est l'un des points sur lesquels les examens de qualité trouvent ces documents défaillants. Cruelty Free International a établi en 2018 que les résumés allemands et britanniques, les seuls examinés à ce jour, décrivaient mal ce qui est fait aux animaux et ce que ceux-ci pourraient éprouver (Taylor et al., 2018). L'adoption d'un modèle commun européen a nettement amélioré le premier point, à peine le second (Taylor et al., 2024).
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Des animaux seront greffés avec de la peau sous anesthésie générale gazeuse durant environ 30 minutes et analgésie générale et locale chimique. Des animaux seront irradiés une fois pendant 3 minutes. Les animaux seront injectés une fois avec des cellules sous anesthésie gazeuse de quelques minutes. Du sang sera prélevé toutes les 2 semaines sous anesthésie générale gazeuse de quelques minutes et analgésie locale chimique. Les souris seront manipulées quotidiennement quelques minutes pour suivre leur poids et le rejet de greffe. Les souris seront euthanasiées après anesthésie gazeuse.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Note de l'OXA. C'est l'endroit du document où les animaux devraient apparaître, et c'est celui qui résiste. Cruelty Free Europe a mesuré en 2024 que cinq des six éléments attendus sur les dommages prévus progressaient depuis l'adoption d'un modèle commun européen. Les effets indésirables sont le sixième : 41 % des résumés allemands et 48 % des britanniques les décrivent complètement. Les auteurs relèvent aussi des effets présentés comme minimes sur des projets classés modérés ou sévères (Taylor et al., 2024). Ces deux pays sont les seuls dont les résumés ont été examinés. Les résumés français relèvent du même modèle européen, et leur qualité n'a jamais été mesurée.
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
L’administration unique des cellules nécessite une immobilisation de la souris de quelques minutes et peut induire une perte de poids. Les souris seront manipulées quotidiennement pour suivre leur poids et le rejet de greffe. Les souris seront anesthésiées par inhalation gazeuse pendant environ 30 minutes pendant la greffe de peau, ce qui peut diminuer la température corporelle. La chirurgie de greffe peut causer des douleurs. Un pansement sera maintenu sur la greffe pendant 12 à 14 jours après chirurgie et l’animal sera anesthésié le temps de refaire un bandage si besoin et lors du retrait du bandage. Du sang sera prélevé au sinus toutes les 2 semaines pouvant causer une douleur. Les souris immunoincompétentes seront par groupe de 5 maximum par cage ventilée pour éviter les infections opportunistes.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Note de l'OXA. Le formulaire demande de justifier ce sort, non de le décrire. L'analyse dommage-avantage que la directive impose au comité d'éthique porte sur « la souffrance, la douleur et l'angoisse » infligées aux animaux (directive 2010/63/UE, art. 38). Quand ce sort est la mise à mort, celle-ci ne figure donc pas parmi les dommages que le comité met en balance avec les bénéfices annoncés. L'OXA écrit « mise à mort » plutôt que « sacrifice », qui emprunte au registre du don consenti, ou « euthanasie », qui désigne une mort décidée dans l'intérêt de celui qui meurt.
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les souris injectées avec des cellules ne pourront pas être utilisées à nouveau. Les injecter avec les cellules d’un second donneur induirait une reconnaissance des cellules entre elles et serait ininterprétable.
Application de la règle des "3R", selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
1. Remplacement
Note de l'OXA. La directive demande au résumé « une démonstration de la conformité » aux exigences de remplacement, de réduction et de raffinement (directive 2010/63/UE, art. 43). C'est donc le demandeur qui démontre sa propre conformité, dans le document même qui sollicite l'autorisation. Cette démonstration peut prendre la forme d'une affirmation qu'aucune méthode de substitution n'existe, que le document n'a pas à sourcer. Ces trois exigences sont par ailleurs subordonnées à l'objectif du projet : elles cherchent à remplacer les animaux dans un projet donné, elles n'interrogent pas ce projet.
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les études fonctionnelles in vitro sont limitées par l’absence du contexte physiologique et de la complexité du système immunitaire et ne peuvent remplacer les études in vivo. La preuve de concept a été faite dans ces modèles de souris, et ces thérapies doivent être évaluées dans les mêmes modèles. Ces modèles de souris avaient été choisis en remplacement de modèles primates non humains, et sont plus pertinents (test direct de cellules humaines et non de cellules de primates non humains).
2. Réduction
Note de l'OXA. La réduction dont il est question ici porte sur le nombre d'animaux par groupe expérimental, calculé pour que l'analyse statistique tienne. Le total annoncé dans la fiche est une estimation portant sur une autorisation de cinq ans au maximum (code rural, art. R214-123) : il ne dit pas combien d'animaux seront effectivement utilisés, et il ne se rapporte pas à une année.
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Le nombre d’animaux par groupe est réduit à 10, nombre nécessaire et suffisant pour obtenir des résultats statistiquement significatifs. Le nombre de groupes a été réfléchi de sorte à avoir les contrôles suffisants pour pouvoir conclure quant aux résultats obtenus.
3. Raffinement
Note de l'OXA. Le raffinement nomme une amélioration technique de la procédure, sans dire ce qu'elle change pour l'animal qui la subit. La réglementation impose d'atténuer la douleur, dans une limite qu'elle inscrit elle-même : « pour autant que cela soit compatible avec la finalité de la procédure expérimentale » (code rural, art. R214-109). Ce qui reste de souffrance après cette limite est autorisé. Le raffinement ne porte par ailleurs que sur la procédure : les souffrances de la captivité elle-même, confinement, bruit, lumière, manipulations d'entretien, ne relèvent d'aucun des trois R.
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Pour le modèle de greffe, les souris seront sous anesthésie générale gazeuse et analgésie chimique durant la chirurgie de la greffe de peau. Les animaux seront ensuite placés sur tapis chauffant et surveillés jusqu’à leur réveil, le greffon sera recouvert de tulle gras et d’une compresse stérile maintenue par un pansement puis d’un bandage pendant 12 à 14 jours. L’animal sera anesthésié quelques minutes de façon gazeuse le temps de refaire un bandage si besoin ou pour son retrait. Pour les prélèvements de sang, les souris seront anesthésiées quelques minutes sous forme gazeuse, analgésiées localement, et prélevées d’ un faible volume de sang avec 2 semaines de récupération entre 2 ponctions. Les souris seront par groupe de 5 maximum par cage ventilée sur un portoir à l’animalerie. Tous les animaux seront suivis pour leur poids, leur comportement, leur intégrité, le développement de la GVH et/ou du rejet de greffe et seront euthanasiés après anesthésie gazeuse à l’atteinte des points limites définis selon une grille de score ou 100 jours après l’injection des cellules.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Note de l'OXA. Le dossier d'autorisation demande de justifier l'origine des animaux, leur espèce, leur nombre estimé et leur stade de développement (arrêté du 1er février 2013, art. 5). La justification attendue est technique : elle porte sur l'adéquation de l'espèce à l'objectif poursuivi. Ce que l'appartenance à une espèce autorise à faire subir à un individu est une question morale, et le formulaire ne la pose pas. L'appartenance à une espèce, prise seule, ne fonde pourtant pas de différence de statut moral entre des individus également capables de souffrir.
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Nous avons choisi les souris immunoincompétentes qui permettent l’acceptation de cellules immunes et/ou d’un greffon de peau humain. Un tel protocole chez des souris immunocompétentes ne serait pas possible, les cellules et tissus humains seraient détruites par le système immunitaire d’une souris. Ces souris présentent aussi des facilités de reproduction, d’hébergement et de manipulation. Les souris doivent avoir atteint un poids adulte pour le suivi de perte de poids résultant de l’injection des cellules, les expériences sont standardisées telles que les cellules sont injectées chez des souris agées de 8 à 12 semaines.