Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 2024-02-26 00:00:00
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-011266)
Rendues septiques par l’injection dans l’abdomen d’un mélange de selles, 2 464 souris subissent cinq jours de réanimation puis des tests d’activité physique, dans des procédures d’un niveau de souffrance sévère, toutes tuées à l’issue. Le porteur indique que les souris septiques présentent des signes de douleur modérée à sévère, et utilise un score clinique validé comme « substitut de mortalité », ce qui revient à fixer des points limites en deçà de la mort. L’objectif déclaré est de démontrer l’implication d’un récepteur dans la faiblesse musculaire qui persiste après un sepsis, en suivant les animaux jusqu’à trois mois. Le porteur mentionne des organoïdes musculaires issus de biopsies de patients, qu’il juge insuffisants à ce jour pour reproduire le vieillissement post-septique.
Résumé produit par un modèle de langage à partir du seul texte du laboratoire, selon une méthode arrêtée par l’OXA. Publié sans relecture individuelle préalable, sous la responsabilité de l’association, et corrigé au fil des relectures.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
Décrire les objectifs du projet.
Note de l'OXA. Cette question est celle du formulaire européen de résumé non technique. Elle est posée au laboratoire qui demande l'autorisation, et sa réponse est écrite avant que la première procédure commence (arrêté du 1er février 2013, art. 5). Ces objectifs servent à justifier l'utilisation des animaux devant le comité d'éthique. Aucun document public ne dira ensuite s'ils ont été atteints : la directive permet aux États de faire mettre à jour le résumé avec les résultats de l'appréciation rétrospective (directive 2010/63/UE, art. 43), la base européenne prévoit de les recevoir, et aucune entrée française n'en porte (base ALURES).
Dans quel but fait-on ça ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les objectifs scientifiques du projet sont de démontrer l’implication du récepteur aux Advanced Glycation End Product (RAGE) dans le vieillissement du muscle après une infection bactérienne grave (sepsis), en utilisant des souris n’ayant pas ce récepteur ou en utilisant des médicaments bloquant ce récepteur. A terme, l’objectif est de prévenir le vieillissement musculaire provoqué par une infection bactérienne.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Note de l'OXA. Le formulaire européen demande les bénéfices « susceptibles de découler » du projet. Il appelle donc une projection, et il l'obtient : ce que le laboratoire écrit ici est ce qu'il espère, avant d'avoir commencé. Deux chercheuses ont repris six corpus d'études précliniques déjà menées et pesé les dommages réellement infligés aux animaux contre les bénéfices cliniques réellement obtenus : moins de 7 % de ces études ressortaient défendables (Pound et Nicol, 2018).
Est-ce « inutile » ou « nécessaire » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les patients ayant séjourné en réanimation pour une infection bactérienne grave, appelée sepsis, présentent des séquelles persistantes dans le temps, parmi lesquelles une faiblesse de la force musculaire comme observée au cours du vieillissement. Les mécanismes sous-jacents sont mal compris et il n’existe aucun médicament permettant d’améliorer ces atteintes musculaires. Notre modèle animal va reproduire l’infection bactérienne et sa prise en sa prise en charge clinique afin de se rapprocher le plus possible de la maladie humaine. Nos premières données ont pu valider le modèle utilisé puisqu’il reproduit la faiblesse musculaire et une incapacité des muscles à produire de l’énergie jusqu’à 10 jours après le début de la maladie. Cette nouvelle étude va nous permettre de déterminer si ces altérations perdurent dans le temps (jusque 3 mois après l’infection chez la souris), et d’en comprendre les mécanismes sous-jacents. Les données chez l’Homme indiquent l’importance du RAGE, un récepteur des cellules connu pour jouer un rôle dans le vieillissement, et des voies associées dans cette atteinte induite par l’infection bactérienne (sepsis). Nous allons explorer plus en détail comment ce récepteur participe au développement de la maladie en utilisant des souris n’exprimant pas ce récepteur ou des souris sauvages qui seront injectées par des inhibiteurs pharmacologiques de RAGE. A terme, nous espérons montrer que l’inhibition du RAGE empêche la perte de force musculaire provoquée par l’infection bactérienne chez la souris, pour ensuite initier une étude chez l’Homme.
Nuisances prévues, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Note de l'OXA. La formule « en règle générale » autorise une réponse générale, et c'est l'un des points sur lesquels les examens de qualité trouvent ces documents défaillants. Un examen publié en 2018 a établi que les résumés allemands et britanniques décrivaient mal ce qui est fait aux animaux et ce que ceux-ci pourraient éprouver (Taylor et al., 2018). L'adoption d'un modèle commun européen a nettement amélioré le premier point, à peine le second (Taylor et al., 2024).
Le droit d'accès aux documents · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les animaux subiront des injections d’un mélange de selles pour induire le sepsis sous forme d’une injection intrapéritonéale puis une période de réanimation pendant 5 jours. Pour certaines interventions, une anesthésie sera nécessaire pour l’analyse en IRM. Les animaux seront également soumis à des tests d’activité physique. Le niveau d’activité spontanée des animaux et leur respiration seront aussi analysés. Les animaux qui seront injectés pour des molécules pharmacologiques subiront un prélèvement sanguin pour analyse.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Note de l'OXA. C'est l'endroit du document où les animaux devraient apparaître, et c'est celui qui résiste. Un nouvel examen, publié en 2024, a mesuré que cinq des six éléments attendus sur les dommages prévus progressaient depuis l'adoption d'un modèle commun européen. Les effets indésirables sont le sixième : 41 % des résumés allemands et 48 % des britanniques les décrivent complètement. Les auteurs relèvent aussi des effets présentés comme minimes sur des projets classés modérés ou sévères (Taylor et al., 2024). Ces mesures portent sur l'Allemagne et le Royaume-Uni. L'examen de 2018 classait la France parmi les pays les moins bons pour l'identification, l'accessibilité et la qualité de ses résumés, sans les noter rubrique par rubrique (Taylor et al., 2018). Les résumés français suivent aujourd'hui le modèle européen commun.
Les animaux souffrent-ils ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les souris sont soumises à différentes injections et peuvent développer des douleurs légères liées à ces piqures. Les souris septiques présentent des signes de douleur modérée à sévère. Une injection d’analgésie sera mise en place pour palier à ces douleurs. Des pertes de poids et d’activité modérées sont attendues.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Note de l'OXA. Le formulaire demande de justifier ce sort, non de le décrire. L'analyse dommage-avantage que la directive impose au comité d'éthique porte sur « la souffrance, la douleur et l'angoisse » infligées aux animaux (directive 2010/63/UE, art. 38). Quand ce sort est la mise à mort, celle-ci ne figure donc pas parmi les dommages que le comité met en balance avec les bénéfices annoncés. L'OXA écrit « mise à mort » plutôt que « sacrifice », qui emprunte au registre du don consenti, ou « euthanasie », qui désigne une mort décidée dans l'intérêt de celui qui meurt.
Peut-on parler d'éthique en expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
L’ensemble des animaux prévus sera utilisé pour le projet. Aucun animal ne sera maintenu en vie à la fin du projet afin de collecter les tissus sans avoir à réserver un lot de souris à cette fin. Cela permet de réduire le nombre d’animaux et de les réutiliser.
Application de la règle des "3R", selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
1. Remplacement
Note de l'OXA. La directive demande au résumé « une démonstration de la conformité » aux exigences de remplacement, de réduction et de raffinement (directive 2010/63/UE, art. 43). C'est donc le demandeur qui démontre sa propre conformité, dans le document même qui sollicite l'autorisation. Cette démonstration peut prendre la forme d'une affirmation qu'aucune méthode de substitution n'existe, que le document n'a pas à sourcer. Ces trois exigences sont par ailleurs subordonnées à l'objectif du projet : elles cherchent à remplacer les animaux dans un projet donné, elles n'interrogent pas ce projet.
Comment avancer vers la fin de l'expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Nous utilisons des approches complémentaires à l’expérimentation animale de type organoïdes musculaires obtenus par des biopsies musculaires de patients contrôle et admis en réanimation pour un sepsis à l’hôpital. Néanmoins, cette nouvelle approche ne suffit pas à reproduire la complexité du vivant à l’heure actuelle, notamment à reproduire pleinement les caractéristiques du vieillissement accéléré post-septique. En effet, le sepsis est définie par une dysfonction d’organes menaçant le pronostic vital en raison d’une réponse immunitaire inappropriée de l’hôte. La pathogénie des dysfonctions d’organes implique des interactions complexes entre les organes du corps entier. Ainsi, à ce jour, il n’existe pas de modèles cellulaires satisfaisants pour étudier les mécanismes de vieillissement post-septique. Seuls les mammifères ont été validés comme des modèles expérimentaux de sepsis.
2. Réduction
Note de l'OXA. La réduction dont il est question ici porte sur le nombre d'animaux par groupe expérimental, calculé pour que l'analyse statistique tienne. Le total annoncé dans la fiche est une estimation portant sur une autorisation de cinq ans au maximum (code rural, art. R214-123) : il ne dit pas combien d'animaux seront effectivement utilisés, et il ne se rapporte pas à une année.
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Des calculs statistiques détaillés ont été effectués pour déterminer le nombre approprié d’animaux pour ce projet. Le nombre d’animaux est cohérent avec la littérature. Ce nombre d’animaux permettra de générer des données scientifiquement solides permettant de les analyser statistiquement. Chaque animal sera soumis à plusieurs tests plutôt que d’utiliser des animaux différents pour chaque test, afin d’obtenir un maximum de données de chaque animal. Cela permet de réduire le nombre total d’animaux nécessaires. En outre, des analyses post mortem seront effectuées sur les tissus (muscles squelettiques, cœur, foie, reins, poumons, vaisseaux, tissus adipeux) de tous les animaux afin de garantir la collecte d’un maximum d’informations sur chaque animal. Le nombre d’animaux et la conception expérimentale de ce projet ont également été revus et approuvés par un biostatisticien expérimenté.
3. Raffinement
Note de l'OXA. Le raffinement nomme une amélioration technique de la procédure, sans dire ce qu'elle change pour l'animal qui la subit. La réglementation impose d'atténuer la douleur, dans une limite qu'elle inscrit elle-même : « pour autant que cela soit compatible avec la finalité de la procédure expérimentale » (code rural, art. R214-109). Ce qui reste de souffrance après cette limite est autorisé. Le raffinement ne porte par ailleurs que sur la procédure : les souffrances de la captivité elle-même, confinement, bruit, lumière, manipulations d'entretien, ne relèvent d'aucun des trois R.
La réglementation est-elle « très stricte » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les souris seront manipulées de manière appropriée et les interactions avec elles seront fréquentes, ce qui réduira le niveau de stress pendant les procédures. Lorsque nécessaire, les animaux recevront une analgésie et/ou une sédation afin de minimiser la douleur et la souffrance. Afin de garantir le bien-être des animaux, ceux-ci seront surveillés et notés fréquemment à l’aide de score de gravité et de bien-être animal, afin de s’assurer qu’aucun animal ne dépasse un niveau de détresse strictement prédéterminé, et des mesures finales sans cruauté seront mises en œuvre immédiatement si un animal présente des effets indésirables inattendus. -Surveillance : poids, température, score de gravité de l’état général (Murine Sepsis Score, MMS) validé dans la littérature comme substitut de mortalité, bien-être biquotidienne initialement puis selon le niveau de gravité. -Analgésie : toutes les 12 heures tant que le score de gravité murin (MSS) est supérieur à 3/28. -Sédation par inhalation de gaz pour tout examen stressant de classe de gravité légère avec réveil (IRM musculaire). -Sédation et analgésie pour tout examen stressant et invasif de classe sans réveil : sédation par inhalation de gaz et analgésie par injection intrapéritonéale. Des doses supplémentaires d’analgésie seront injectées si nécessaire selon la durée de l’expérience. Les possibilités d’améliorer les procédures seront continuellement explorées (veille de la littérature) et mises en œuvre autant que possible. Le groupe de recherche maintiendra une interaction forte avec les animaliers et le bureau du bien-être animal, afin de permettre une surveillance optimale des animaux et rechercher un enrichissement de leur environnement.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Note de l'OXA. Le dossier d'autorisation demande de justifier l'origine des animaux, leur espèce, leur nombre estimé et leur stade de développement (arrêté du 1er février 2013, art. 5). La justification attendue est technique : elle porte sur l'adéquation de l'espèce à l'objectif poursuivi. Ce que l'appartenance à une espèce autorise à faire subir à un individu est une question morale, et le formulaire ne la pose pas. L'appartenance à une espèce, prise seule, ne fonde pourtant pas de différence de statut moral entre des individus également capables de souffrir.
Spécisme et expérimentation animale · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
L’injection dans le ventre d’un mélange de selles est validée chez les souris, les rats, les brebis et les cochons comme modèle d’infection bactérienne (sepsis) et reproduit en grande partie ce qui est retrouvé chez l’Homme. Ce modèle est publié dans la littérature. L’utilisation de la souris permet la réalisation de tests sur leur motricité et leur respiration en parallèle sur notre site. Cette espèce permet également d’avoir des animaux qui n’expriment plus le récepteur RAGE que l’on pense être impliqué dans la faiblesse musculaire provoquée par l’infection bactérienne. Enfin, il existe des scores cliniques pour évaluer la gravité et la douleur, ainsi que des protocoles d’analgésie bien validés dans ce modèle de souris. Enfin, des points limites ont été proposés dans ce modèle comme substituts de la mortalité. Le but de ce projet est d’étudier les mécanismes impliqués la faiblesse musculaire, qui ressemble à celle observée dans le vieillissement, provoquée par une infection bactérienne. Nous utiliserons des souris âgées de 17 à 30 semaines mâles et femelles. Cet âge correspond chez l’Homme à des individus âgés de 25 à 35 ans.