Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 20/11/2023
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-162261)
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Le Psoriasis est une maladie cutanée chronique qui touche environ 5% de la population générale. De plus en plus d’études suggèrent un rôle du microbiote intestinal (bactéries intestinales) dans le développement des lésions de psoriasis. Ces découvertes permettent d’envisager le développement de traitements probiotiques, à base de « bonnes » bactéries intestinales, qui viendraient améliorer les lésions cutanées après administration orale. Dans cette étude, nous testerons l’impact d’une « bonne bactérie » administrée par voie orale chez une souris atteinte de psoriasis. Le but est démontrer que ce nouveau type de traitement fonctionne sur un modèle de souris (amélioration du psoriasis) avant d’envisager son développement chez l’homme.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
En cas de résultats positifs, une étude chez l’homme sera envisagée : nous pourrons dans ce cas étudier si un traitement oral par P. distasonis (une « bonne » bactérie intestinale aux propriétés anti-inflammatoires) permet d’améliorer le psoriasis chez l’homme.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Le traitement à base de P. distasonis, une bactérie intestinale bénéfique, sera réalisé par gavage sur animaux vigiles, 5 fois par semaine sur 28 jours (durée 30 sec). Afin de mimer des lésions de psoriasis, une crème (imiquimod) sera appliquée sur les oreilles des animaux sous anesthésie pendant 30min. Pour cela, les animaux seront anesthesiés 3 jours consécutifs sur 2 semaines consécutives et une derniere fois après resolution de l’inflammation 7 jours plus tard (7 injections = 30sec). La mesure de la réponse clinique (mesure de l’épaisseur de l’oreille) sera réalisée sous anesthésie 5jours/7 pendant 30 secondes.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Le gavage répété 5j/7 sur plusieurs semaines pourrait induire une inflammation de la sphère ORL et de la partie haute de l’oesophage. Cette inflammation pourrait entraîner une perte de poids par défaut d’alimentation. Ce modèle engendre une inflammation legère au niveau de l’oreille qui ne gène pas la souris et ne gènere pas de grattage. Les souris seront régulièrement anesthesiées (5j/7) durant plusieurs semaines, ce qui peut génerer un stress.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Après anesthésie, tous les animaux seront mis à mort à la fin de l’étude afin de récupérer les organes ce qui permettra d’analyser les propriétés anti-inflammatoires de P. distasonis
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
L’objectif de cette étude est d’évaluer l’impact d’un candidat médicament sur un modèle d’inflammation cutanée (psoriasis). Aucun test in vitro ne permet d’intégrer la réaction immunitaire de la peau et des organes immunitaires associés dans leur ensemble dans le cadre de cette pathologie. Celle-ci ne peut donc être conduite qu’in vivo.
2. Réduction
L’estimation du nombre d’animaux par groupe est réalisée sur la base de notre expérience ainsi que sur la littérature scientifique et a été réduit au maximum sans mettre en péril une interprétation statistique de nos résultats. Aussi, un minimum de 10 animaux par groupe (3 dosages de P. distasonis et un groupe contrôle non traité) est nécessaire afin de réaliser des analyses statistiques pertinentes et robustes. Trois dosages de P. distasonis seront testés, celle-ci n’ayant jamais été testée auparavant.
3. Raffinement
Des mesures seront mises en oeuvre pour optimiser le bien-être des animaux. A leur arrivée dans l’animalerie, une période d’acclimation d’une semaine sera respectée avant le debut de la procédure expérimentale, et les souris seront maintenues entre 4 et 5 souris par cage, afin de les maintenir au maximum en groupe social. Des points limites bien définis et suffisamment précoces et prédictifs pour prévenir tout stress et toute douleur de l’animal ont été mis en place. L’observation des animaux sera effectuée 5jours/7 et nous attacherons une grande importance à l’apparence physique externe et aux changements comportementaux de ceux-ci. Dans le cas où des animaux perdraient du poids, des aliments réhydratés seraient disposés dans la cage. Pour les gavages, des sondes gastriques souples reconnus pour etre moins irritante pour les animaux seront utilisées et les gavages seront réalisés par une personne expérimentée ayant déjà réalisé des gavages répétés.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
L’espèce souris est un modèle très utilisé en pathologie immunologique, telle que l’inflammation cutanée et notamment le psoriasis, en raison des nombreux outils mis à disposition pour l’analyse des réponses immunes. Cette espèce est également proche de l’homme en ce qui concerne certains marqueurs de la réponse immunologique comme la production de cytokines inflammatoires. De plus, l’utilisation de ce modèle, couramment employé dans ce domaine, nous permettra de discuter nos résultats par rapport aux données existantes de la littérature. Les souris provenant de fournisseurs arrivent à l’âge de 6 semaines et sont acclimatées au moins une semaine au sein de notre animalerie avant d’entrer dans nos protocoles. Les souris entrent dans les procédures à 7-25 semaines, âge auquel les souris présentent un système immunitaire suffisamment mature pour effectuer une sensibilisation efficace.