Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 2022-09-06 00:00:00
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-811872)
236 souris vont être utilisées, toutes tuées à l’issue, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance léger à modéré. Cent quarante souris nude reçoivent une greffe tumorale sous la peau et quatre-vingt-seize souris ApoE-/- un régime enrichi en cholestérol, puis toutes une injection de radiotraceur et une séance d’imagerie sous anesthésie. Le porteur indique qu’un criblage in vitro sur plus de mille anticorps a réduit à dix les candidats testés, mais affirme qu’aucun modèle alternatif ne remplace le test in vivo. Le projet vise à mettre au point un agent d’imagerie de l’athérothrombose transférable en clinique.
Résumé produit par un modèle de langage à partir du seul texte du laboratoire, selon une méthode arrêtée par l’OXA. Publié sans relecture individuelle préalable, sous la responsabilité de l’association, et corrigé au fil des relectures.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
Décrire les objectifs du projet.
Note de l'OXA. Cette question est celle du formulaire européen de résumé non technique. Elle est posée au laboratoire qui demande l'autorisation, et sa réponse est écrite avant que la première procédure commence (arrêté du 1er février 2013, art. 5). Ces objectifs servent à justifier l'utilisation des animaux devant le comité d'éthique. Aucun document public ne dira ensuite s'ils ont été atteints : la directive permet aux États de faire mettre à jour le résumé avec les résultats de l'appréciation rétrospective (directive 2010/63/UE, art. 43), la base européenne prévoit de les recevoir, et aucune entrée française n'en porte (base ALURES).
Dans quel but fait-on ça ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Le projet vise à développer un radiotraceur ciblant le processus d’athérothrombose, responsable de la majorité des évènements cardiovasculaires. Il a donc pour objectif de générer des fragments d’anticorps ciblant le facteur tissulaire, protéine impliquée dans l’activation de la cascade de la coagulation, de les radiomarquer et de sélectionner le candidat le plus pertinent pour l’imagerie de l’athérothrombose, avec pour finalité son transfert clinique.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Note de l'OXA. Le formulaire européen demande les bénéfices « susceptibles de découler » du projet. Il appelle donc une projection, et il l'obtient : ce que le laboratoire écrit ici est ce qu'il espère, avant d'avoir commencé. Deux chercheuses ont repris six corpus d'études précliniques déjà menées et pesé les dommages réellement infligés aux animaux contre les bénéfices cliniques réellement obtenus : moins de 7 % de ces études ressortaient défendables (Pound et Nicol, 2018).
Est-ce « inutile » ou « nécessaire » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Ce projet permettra aux cliniciens de mieux stratifier et identifier les patients à très haut risque d’évènements cardiovasculaire par l’évaluation in vivo de la présence ou non de facteur tissulaire, marqueur de risque d’athérothrombose. De plus, cet agent d’imagerie contribuera à mieux comprendre la physiopathologie des plaques vulnérables et permettra l’évaluation de thérapeutiques ciblant directement ce mécanisme.
Nuisances prévues, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Note de l'OXA. La formule « en règle générale » autorise une réponse générale, et c'est l'un des points sur lesquels les examens de qualité trouvent ces documents défaillants. Un examen publié en 2018 a établi que les résumés allemands et britanniques décrivaient mal ce qui est fait aux animaux et ce que ceux-ci pourraient éprouver (Taylor et al., 2018). L'adoption d'un modèle commun européen a nettement amélioré le premier point, à peine le second (Taylor et al., 2024).
Le droit d'accès aux documents · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Le protocole d’imagerie n’entrainera pas de douleur, souffrance ou angoisse supplémentaire en dehors d’un stress bref et modéré lié à l’injection intra veineuse du radiotraceur aux animaux vigiles. L’acquisition des images sera réalisée chez des animaux sous anesthésie volatile pour une durée inférieure à 1h. Un onguent sera appliqué sur la cornée pour éviter toute sécheresse oculaire. Une seule procédure d’imagerie sera effectuée par souris . L’implantation tumorale sur le flan des souris entrainera un léger stress à l’implantation, cependant ce geste bien maitrisé au laboratoire est très rapide (5 min maximum) et se fait sous anesthésie volatile. Un suivi régulier permettra d’éviter toute souffrance de l’animal si les tumeurs atteingnent un volume impactant le bien-être animal. Les souris ApoE-/- seront nourries avec un régime hypercholestérolémique contenant entre autre 0.5% de cholestérol.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Note de l'OXA. C'est l'endroit du document où les animaux devraient apparaître, et c'est celui qui résiste. Un nouvel examen, publié en 2024, a mesuré que cinq des six éléments attendus sur les dommages prévus progressaient depuis l'adoption d'un modèle commun européen. Les effets indésirables sont le sixième : 41 % des résumés allemands et 48 % des britanniques les décrivent complètement. Les auteurs relèvent aussi des effets présentés comme minimes sur des projets classés modérés ou sévères (Taylor et al., 2024). Ces mesures portent sur l'Allemagne et le Royaume-Uni. L'examen de 2018 classait la France parmi les pays les moins bons pour l'identification, l'accessibilité et la qualité de ses résumés, sans les noter rubrique par rubrique (Taylor et al., 2018). Les résumés français suivent aujourd'hui le modèle européen commun.
Les animaux souffrent-ils ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Un léger stress sera induit lors de l’injection du radiotraceur dans la veine latérale de la queue sur souris vigiles. Durant la procédure d’imagerie, les souris seront anesthésiées par anesthésie volatile à l’isoflurane (1.5-2%). La formation de lésions athéromateuses accélérée par la mise sous régime hyperlipidémique des souris ApoE-/- ne s’accompagne pas de douleurs particulières ni d’un risque de mortalité plus élevée. En effet, contrairement à l’homme, ces lésions avancées ne sont pas sujettes à rupture, n’entrainant par conséquent aucun infarctus du myocarde et dans de très rares cas, des accidents vasculaires cérébraux. L’implantation de cellules tumorales sur souris vigiles entrainera un léger stress aux animaux. L’imagerie sera effectuée a des volumes tumoraux compris entre 50 et 500 mm3, ne provoquant peu ou pas de gêne pour l’animal. Des points limites ont été bien établits (volume tumorale>1000mm3, comportement,…) afin d’éviter toutes douleurs excessives.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Note de l'OXA. Le formulaire demande de justifier ce sort, non de le décrire. L'analyse dommage-avantage que la directive impose au comité d'éthique porte sur « la souffrance, la douleur et l'angoisse » infligées aux animaux (directive 2010/63/UE, art. 38). Quand ce sort est la mise à mort, celle-ci ne figure donc pas parmi les dommages que le comité met en balance avec les bénéfices annoncés. L'OXA écrit « mise à mort » plutôt que « sacrifice », qui emprunte au registre du don consenti, ou « euthanasie », qui désigne une mort décidée dans l'intérêt de celui qui meurt.
Peut-on parler d'éthique en expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
A la fin de la procédure d’imagerie, les souris seront euthanasiées. Des analyses post mortem seront effectuées afin de caractériser et sélectionner le clone au potentiel le plus important pour l’imagerie de l’athérothrombose.
Application de la règle des "3R", selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
1. Remplacement
Note de l'OXA. La directive demande au résumé « une démonstration de la conformité » aux exigences de remplacement, de réduction et de raffinement (directive 2010/63/UE, art. 43). C'est donc le demandeur qui démontre sa propre conformité, dans le document même qui sollicite l'autorisation. Cette démonstration peut prendre la forme d'une affirmation qu'aucune méthode de substitution n'existe, que le document n'a pas à sourcer. Ces trois exigences sont par ailleurs subordonnées à l'objectif du projet : elles cherchent à remplacer les animaux dans un projet donné, elles n'interrogent pas ce projet.
Comment avancer vers la fin de l'expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Aucun modèle alternatif n’est disponible actuellement pour s’affranchir de ce type d’étude. Seuls les tests in vivo pourront nous permettre de valider le meilleur candidat pour l’imagerie de l’athérothrombose. Cependant, les études préliminaires réalisées in vitro sur protéine recombinante et sur cellules ont permis de se restreindre à 10 candidats pour ces tests in vivo, sélectionnés parmi une importante bibliothèque contenant >1000 anticorps dirigés contre le facteur tissulaire (FT).
2. Réduction
Note de l'OXA. La réduction dont il est question ici porte sur le nombre d'animaux par groupe expérimental, calculé pour que l'analyse statistique tienne. Le total annoncé dans la fiche est une estimation portant sur une autorisation de cinq ans au maximum (code rural, art. R214-123) : il ne dit pas combien d'animaux seront effectivement utilisés, et il ne se rapporte pas à une année.
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Nous limiterons notre étude au strict minimum requis dans le nombre de souris et les différents modèles murins à utiliser afin de sélectionner et de caractériser le clone présentant les meilleures propriétés pour l’imagerie de l’athérothrombose. Un premier criblage in vitro sur protéine recombinante et sur cellules, parmi une importante bibliothèque contenant plus de 1000 anticorps dirigés contre le FT, a permis de réduire à 10 le nombre de candidats à tester in vivo. Dans ce projet, ce nombre est fixé à 236 animaux, à savoir 140 souris nude et 96 souris femelles ApoE-/-. Le nombre d’animaux choisi est basé sur une étude permettant de détecter des différences de l’ordre de 25% en valeur moyenne.
3. Raffinement
Note de l'OXA. Le raffinement nomme une amélioration technique de la procédure, sans dire ce qu'elle change pour l'animal qui la subit. La réglementation impose d'atténuer la douleur, dans une limite qu'elle inscrit elle-même : « pour autant que cela soit compatible avec la finalité de la procédure expérimentale » (code rural, art. R214-109). Ce qui reste de souffrance après cette limite est autorisé. Le raffinement ne porte par ailleurs que sur la procédure : les souffrances de la captivité elle-même, confinement, bruit, lumière, manipulations d'entretien, ne relèvent d'aucun des trois R.
La réglementation est-elle « très stricte » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Une attention particulière sera apportée au bien-être des animaux avec enrichissement du milieu de vie, un hébergement par groupe et un suivi de leur bien-être sera effectué quotidiennement. Les sessions d’imagerie seront réalisées sous anesthésie volatile, avec une anesthésie inférieure à 1h. Les animaux seront placés sur un lit thermostaté le temps de l’imagerie et la fréquence respiratoire sera monitorée en continu afin de contrôler le degré d’anesthésie et de le moduler si nécessaire. Le protocole d’imagerie n’entrainera pas de douleur, souffrance ou angoisse en dehors d’un stress bref et modéré lié à l’injection intra veineuse de radiotraceur.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Note de l'OXA. Le dossier d'autorisation demande de justifier l'origine des animaux, leur espèce, leur nombre estimé et leur stade de développement (arrêté du 1er février 2013, art. 5). La justification attendue est technique : elle porte sur l'adéquation de l'espèce à l'objectif poursuivi. Ce que l'appartenance à une espèce autorise à faire subir à un individu est une question morale, et le formulaire ne la pose pas. L'appartenance à une espèce, prise seule, ne fonde pourtant pas de différence de statut moral entre des individus également capables de souffrir.
Spécisme et expérimentation animale · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Le protocole concernera uniquement des souris adultes. La souris nude est un modèle idéal pour réaliser un premier criblage in vivo des nanobodies dans le but d’évaluer la fixation de ces différents clones sur des cellules exprimant le facteur tissulaire murin et humain. Les souris nude seront implantées à l’âge de 6 semaines environ afin d’optimiser la prise tumorale en sous cutanée. La souris ApoE-/- est le modèle animal de référence pour l’étude de l’athérosclérose. Au laboratoire, nous connaissons déjà ce modèle puisque nous l’avons utilisé pour valider et caractériser un radiotraceur ciblant l’inflammation actuellement en essai clinique de phase I/IIa. En accord avec la littérature ces souris seront mis sous régime hyperlipidémique durant 20 semaines et ce à partir de leur 15ème semaine. Ces 2 modèles d’étude nous permettront également de comparer nos résultats aux données historiques du laboratoire.