Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 2022-09-21 00:00:00
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-582586)
506 souris vont être utilisées, toutes tuées à l’issue, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance léger à modéré. Génétiquement modifiées pour développer une polykystose rénale, elles reçoivent un vecteur de thérapie génique par injection oculaire, intrapéritonéale puis directement dans le rein, avec prélèvements sanguins mensuels et IRM sous anesthésie, avant une mise à mort à vingt semaines pour prélever les organes. Le porteur indique qu’en cas de succès la recherche se poursuivra sur un « modèle félin », soit des chats. Il affirme l’usage de la souris « indispensable » pour évaluer l’effet à l’échelle de l' »organisme entier ».
Résumé produit par un modèle de langage à partir du seul texte du laboratoire, selon une méthode arrêtée par l’OXA. Publié sans relecture individuelle préalable, sous la responsabilité de l’association, et corrigé au fil des relectures.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
Décrire les objectifs du projet.
Note de l'OXA. Cette question est celle du formulaire européen de résumé non technique. Elle est posée au laboratoire qui demande l'autorisation, et sa réponse est écrite avant que la première procédure commence (arrêté du 1er février 2013, art. 5). Ces objectifs servent à justifier l'utilisation des animaux devant le comité d'éthique. Aucun document public ne dira ensuite s'ils ont été atteints : la directive permet aux États de faire mettre à jour le résumé avec les résultats de l'appréciation rétrospective (directive 2010/63/UE, art. 43), la base européenne prévoit de les recevoir, et aucune entrée française n'en porte (base ALURES).
Dans quel but fait-on ça ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
La polykystose rénale autosomique dominante représente l’une des principales causes de l’insuffisance rénale d’origine génétique et touche plus d’une naissance sur 400 -1000 et approximativement 13 millions de personnes dans le monde entier. La polykystose rénale est caractérisée par le développement bilatéral de kystes rénaux qui augmentent progressivement la masse de l’organe et conduit à la perte de la fonction rénale. L’insuffisance rénale chronique est la complication sévère la plus fréquente. Notre projet porte sur le développement d’une approche par thérapie génique pour traiter cette maladie. Les vecteurs virus adéno-associé recombinants (rAAV) ont récemment montré des résultats encourageants pour le traitement de maladies génétiques. En particulier, le sérotype AAV9 est décrit dans la littérature pour le ciblage des reins et du foie entre autre. Pour cela, notre choix s’est porté sur l’utilisation d’AAV9 pour le traitement de la polykystose rénale. Des études ont mis en évidence l’importance de l’adénosine monophosphate cyclique dans la croissance des kystes rénaux. La protéine kinase A est le majeur effecteur de dans la croissance des kystes rénaux. Notre stratégie est d’évaluer l’effet d’un vecteur portant le gène modifié de la protéine kinase A au stade précoce de la formation des kystes. Nous utiliserons les vecteurs AAV pour introduire le gène humain modifié de la protéine kinase A dans un modèle murin de polykystose rénale dans le but de bloquer partiellement la voie de la protéine kinase A.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Note de l'OXA. Le formulaire européen demande les bénéfices « susceptibles de découler » du projet. Il appelle donc une projection, et il l'obtient : ce que le laboratoire écrit ici est ce qu'il espère, avant d'avoir commencé. Deux chercheuses ont repris six corpus d'études précliniques déjà menées et pesé les dommages réellement infligés aux animaux contre les bénéfices cliniques réellement obtenus : moins de 7 % de ces études ressortaient défendables (Pound et Nicol, 2018).
Est-ce « inutile » ou « nécessaire » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Notre but est de développer une étude preuve de concept de thérapie génique pour la polykystose rénale. Notre but est de d’examiner l’effet du vecteur thérapeutique sur le nombre, la taille, et le développement des kystes. Si notre approche thérapeutique est efficace nous poursuivrons notre recherche sur de plus gros animaux (modèle félin)
Nuisances prévues, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Note de l'OXA. La formule « en règle générale » autorise une réponse générale, et c'est l'un des points sur lesquels les examens de qualité trouvent ces documents défaillants. Un examen publié en 2018 a établi que les résumés allemands et britanniques décrivaient mal ce qui est fait aux animaux et ce que ceux-ci pourraient éprouver (Taylor et al., 2018). L'adoption d'un modèle commun européen a nettement amélioré le premier point, à peine le second (Taylor et al., 2024).
Le droit d'accès aux documents · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Injection du vecteur : – 1 fois par animal à J10 post-natal pour l’injection rétro-orbitale ou intrapéritonéale (durée 3 min), – et à l’âge de 4-6 semaines pour l’injection rénale (durée 45 min) . – Prélèvement sanguin: 1 fois par mois à partir du sevrage sous anesthésie. – Imagerie par résonance magnétique : 1 fois par animal, sous anesthésie, durée : 1 heure
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Note de l'OXA. C'est l'endroit du document où les animaux devraient apparaître, et c'est celui qui résiste. Un nouvel examen, publié en 2024, a mesuré que cinq des six éléments attendus sur les dommages prévus progressaient depuis l'adoption d'un modèle commun européen. Les effets indésirables sont le sixième : 41 % des résumés allemands et 48 % des britanniques les décrivent complètement. Les auteurs relèvent aussi des effets présentés comme minimes sur des projets classés modérés ou sévères (Taylor et al., 2024). Ces mesures portent sur l'Allemagne et le Royaume-Uni. L'examen de 2018 classait la France parmi les pays les moins bons pour l'identification, l'accessibilité et la qualité de ses résumés, sans les noter rubrique par rubrique (Taylor et al., 2018). Les résumés français suivent aujourd'hui le modèle européen commun.
Les animaux souffrent-ils ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les animaux peuvent ressentir une douleur passagère au site d’injection. Il existe également un léger risque d’hémorragie ou d’infection du site chirurgical, mais si l’un ou l’autre de ces phénomènes se produit, les animaux seront immédiatement euthanasiés et ne devraient donc pas ressentir ces effets pendant une longue période. L’anesthésie peut provoquer une légère gêne mais aucun autre effet indésirable n’est attendu.Les animaux peuvent ressentir une douleur passagère au site d’injection. Il existe également un léger risque d’hémorragie ou d’infection du site chirurgical, mais si l’un ou l’autre de ces phénomènes se produit, les animaux seront immédiatement euthanasiés et ne devraient donc pas ressentir ces effets pendant une longue période. L’anesthésie peut provoquer une légère gêne mais aucun autre effet indésirable n’est attendu. Chez le patient la présence de kystes reste longtemps indolore et imperceptible jusqu’à ce que le volume kystique devienne important et qu’il entraine une pesanteur et une douleur diffuse dans le flanc, le dos ou l’abdomen. Notre stratégie est d’évaluer notre thérapie au stade précoce cde la formation des kystes, lorsqu’ils ne présentent pas d’inconfort pour la souris.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Note de l'OXA. Le formulaire demande de justifier ce sort, non de le décrire. L'analyse dommage-avantage que la directive impose au comité d'éthique porte sur « la souffrance, la douleur et l'angoisse » infligées aux animaux (directive 2010/63/UE, art. 38). Quand ce sort est la mise à mort, celle-ci ne figure donc pas parmi les dommages que le comité met en balance avec les bénéfices annoncés. L'OXA écrit « mise à mort » plutôt que « sacrifice », qui emprunte au registre du don consenti, ou « euthanasie », qui désigne une mort décidée dans l'intérêt de celui qui meurt.
Peut-on parler d'éthique en expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Tous les animaux inclus dans les procédures seront euthanasiés. Le but est de prélever les organes post-mortem des animaux, et d’effectuer des analyses biomoléculaires et histologiques.
Application de la règle des "3R", selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
1. Remplacement
Note de l'OXA. La directive demande au résumé « une démonstration de la conformité » aux exigences de remplacement, de réduction et de raffinement (directive 2010/63/UE, art. 43). C'est donc le demandeur qui démontre sa propre conformité, dans le document même qui sollicite l'autorisation. Cette démonstration peut prendre la forme d'une affirmation qu'aucune méthode de substitution n'existe, que le document n'a pas à sourcer. Ces trois exigences sont par ailleurs subordonnées à l'objectif du projet : elles cherchent à remplacer les animaux dans un projet donné, elles n'interrogent pas ce projet.
Comment avancer vers la fin de l'expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
La complexité du rein et de la polykystose rénale rénale nécessite l’utilisation d’un modèle animal. Mais, les constructions génétiques utilisées seront caractérisées in vitro avant leur utilisation chez l’animal. L’utilisation d’un modèle murin est indispensable afin d’évaluer l’efficacité des vecteurs pour corriger les manifestations cliniques de la maladie à l’échelle de l’organisme entier.
2. Réduction
Note de l'OXA. La réduction dont il est question ici porte sur le nombre d'animaux par groupe expérimental, calculé pour que l'analyse statistique tienne. Le total annoncé dans la fiche est une estimation portant sur une autorisation de cinq ans au maximum (code rural, art. R214-123) : il ne dit pas combien d'animaux seront effectivement utilisés, et il ne se rapporte pas à une année.
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Des calculs statistiques ont été effectués sur la base des résultats d’études similaires dans ce domaine. Dans la mesure du possible, les organes obtenus des souris seront conservés et stockés pour des tests ultérieurs, ce qui permettra de maximiser les données obtenues de chaque animal. Le nombre de souris nécessaires à cette étude est réduit en enregistrant autant de paramètres que possible à partir d’une seule souris, sans compromettre le bien-être des animaux.
3. Raffinement
Note de l'OXA. Le raffinement nomme une amélioration technique de la procédure, sans dire ce qu'elle change pour l'animal qui la subit. La réglementation impose d'atténuer la douleur, dans une limite qu'elle inscrit elle-même : « pour autant que cela soit compatible avec la finalité de la procédure expérimentale » (code rural, art. R214-109). Ce qui reste de souffrance après cette limite est autorisé. Le raffinement ne porte par ailleurs que sur la procédure : les souffrances de la captivité elle-même, confinement, bruit, lumière, manipulations d'entretien, ne relèvent d'aucun des trois R.
La réglementation est-elle « très stricte » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Pour l’administration des vecteurs thérapeutiques, des protocoles anesthésiques et analgésiques adaptés seront mis en place selon la procédure et validés par le vétérinaire. Les prélèvements sanguins se dérouleront sous anesthésie par isoflurane. Notre stratégie est d’évaluer l’efficacité d’un vecteur thérapeutiqque sur la formation des kystes rénaux au stade précode de la formation des kystes, lorsqu’ils ne présentent pas encore d’inconfort pour la souris. Néanmoins un suivi de la fonction rénale sera mis en place chez les souris susceptibles de développer la maladie. Les prélèvements bi-mensuels d’urine permettront de suivre l’évolution de la concentration de l’AMPc, la créatinine et les taux urinaires d’azote uréique. Une observation quotidiennne des animaux, des pesées hebdomadaires et l’application de critères d’arrêts permettent de veiller au bien-être des animaux.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Note de l'OXA. Le dossier d'autorisation demande de justifier l'origine des animaux, leur espèce, leur nombre estimé et leur stade de développement (arrêté du 1er février 2013, art. 5). La justification attendue est technique : elle porte sur l'adéquation de l'espèce à l'objectif poursuivi. Ce que l'appartenance à une espèce autorise à faire subir à un individu est une question morale, et le formulaire ne la pose pas. L'appartenance à une espèce, prise seule, ne fonde pourtant pas de différence de statut moral entre des individus également capables de souffrir.
Spécisme et expérimentation animale · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
La souris est l’espèce de choix pour générer des modèles de maladies humaines. Son anatomie, sa physiologie et sa génétique son bien connues. L’utilisation est justifiée par l’existence d’un modèle de souris transgéniques portant une délétion du gène Pkd1 et reproduisant des aspects cliniques de la polykystose rénale. L’apparition des premiers kystes rénaux est détectée entre 8 à 10 semaines d’âge. A l’âge de 20 semaines, 100% des souris malades non traitées seront porteuses de kystes rénaux. Nous euthanasierons les souris d’intérêt et leurs contrôles à l’âge de 20 semaines. Cela va permettre de mesurer l’effet thérapeutique du vecteur, et sa stabilité dans le temps.