Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 2023-01-31 00:00:00
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-482682)
1 716 souris vont être utilisées, toutes tuées à l’issue, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance modéré. Un traumatisme crânien leur est provoqué sous anesthésie, certaines recevant en plus une injection intracisternale, suivi d’injections répétées et de prélèvements sanguins, pour étudier le rôle d’un récepteur dans les lésions de la substance blanche. Le porteur indique que le traumatisme peut réduire temporairement la prise de nourriture et provoquer une légère perte de poids récupérée en quelques jours. Il affirme que les mécanismes en jeu ne peuvent être reproduits in vitro et qu’il est « indispensable » de recourir à l’animal, les cerveaux étant prélevés après la mise à mort.
Résumé produit par un modèle de langage à partir du seul texte du laboratoire, selon une méthode arrêtée par l’OXA. Publié sans relecture individuelle préalable, sous la responsabilité de l’association, et corrigé au fil des relectures.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
Décrire les objectifs du projet.
Note de l'OXA. Cette question est celle du formulaire européen de résumé non technique. Elle est posée au laboratoire qui demande l'autorisation, et sa réponse est écrite avant que la première procédure commence (arrêté du 1er février 2013, art. 5). Ces objectifs servent à justifier l'utilisation des animaux devant le comité d'éthique. Aucun document public ne dira ensuite s'ils ont été atteints : la directive permet aux États de faire mettre à jour le résumé avec les résultats de l'appréciation rétrospective (directive 2010/63/UE, art. 43), la base européenne prévoit de les recevoir, et aucune entrée française n'en porte (base ALURES).
Dans quel but fait-on ça ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Le traumatisme crânien est un problème majeur de santé publique lourd de conséquences neurologiques et lésionnelles à court et long terme pour lequel il n’existe aujourd’hui aucun traitement. Ces conséquences tardives sont en grande partie reliées aux lésions de la substance blanche jusqu’ici largement sous-estimées et méconnues. La substance blanche contient essentiellement des cellules nerveuses entourées d’une gaine de myéline permettant la transmission des informations dans le cerveau. L’espoir d’améliorer le pronostic du traumatisme crânien repose sur la découverte des mécanismes impliqués dans les lésions de la substance blanche et les désordres neurocomportementaux conséquents. Parmi ces mécanismes, des études suggèrent le rôle de la neuro-inflammation dans les lésions de la substance blanche après un traumatisme crânien. La microglie est une cellule immunitaire du cerveau qui joue un rôle majeur dans la neuro-inflammation. Des études suggèrent que les débris de myéline induits par le traumatisme crânien pourraient activer à leur tour la microglie. Une fois activée, la microglie peut adopter 2 phénotypes distincts, c’est-à-dire qu’elle peut exercer des effets délétères, mais aussi des effets bénéfiques, et ceci, selon son environnement. Ainsi, des études ont rapporté aussi bien des effets pro- ou anti-inflammatoires des débris de myéline, mais à ce jour, aucun lien entre débris de myéline et activation microgliale n’a pu être mis en évidence dans le traumatisme crânien. De plus, la protéine étudiée, qui est notamment exprimée par les microglies, pourrait être impliquée dans la modulation des phénotypes microgliaux. Cependant, à ce jour, il n’existe aucune donnée sur l’implication de cette protéine dans les phénotypes microgliaux induits par les débris de myéline produits à la suite du traumatisme crânien. L’objectif de ce projet est donc d’étudier le rôle de la protéine d’intérêt dans la neuro-inflammation microgliale induite par des débris de myéline produits et les lésions de la substance blanche à la suite d’un traumatisme crânien chez la souris.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Note de l'OXA. Le formulaire européen demande les bénéfices « susceptibles de découler » du projet. Il appelle donc une projection, et il l'obtient : ce que le laboratoire écrit ici est ce qu'il espère, avant d'avoir commencé. Deux chercheuses ont repris six corpus d'études précliniques déjà menées et pesé les dommages réellement infligés aux animaux contre les bénéfices cliniques réellement obtenus : moins de 7 % de ces études ressortaient défendables (Pound et Nicol, 2018).
Est-ce « inutile » ou « nécessaire » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Ce projet s’intègre dans un projet plus large qui permettra (1) une meilleure caractérisation de la neuroinflammation et des lésions de la substance blanche induites par le traumatisme crânien et (2) de proposer une stratégie thérapeutique pour la réparation et la prévention des lésions de la substance blanche induites par le traumatisme crânien.
Nuisances prévues, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Note de l'OXA. La formule « en règle générale » autorise une réponse générale, et c'est l'un des points sur lesquels les examens de qualité trouvent ces documents défaillants. Un examen publié en 2018 a établi que les résumés allemands et britanniques décrivaient mal ce qui est fait aux animaux et ce que ceux-ci pourraient éprouver (Taylor et al., 2018). L'adoption d'un modèle commun européen a nettement amélioré le premier point, à peine le second (Taylor et al., 2024).
Le droit d'accès aux documents · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
• Un traumatisme crânien sera induit sous anesthésie générale. La réalisation de ce modèle de traumatisme crânien nécessite 10 minutes. L’anesthésie générale sera précédée de l’administration d’un analgésique 30 minutes avant par voie sous-cutanée. Cette injection sera réalisée sur animal vigile et prendra moins d’1 minute. Certaines souris recevront en plus une injection intracisternale tout de suite après le traumatisme crânien. Cette injection sera réalisée sous anesthésie générale et prendra moins d’1 minute. Toutes les souris soumises à un traumatisme crânien recevront 5 injections par voie sous-cutanée de sérum physiologique (2 fois par jour pendant 2 jours à compter du jour du traumatisme crânien) et 5 injections par voie sous-cutanée d’analgésique (2 fois par jour pendant 2 jours à compter du jour du traumatisme crânien). Ces injections seront réalisées sur animal vigile et prendront chacune moins d’1 minute. • Des prélèvements de sang seront réalisés chez toutes les souris du projet, soit 1 seule fois, soit 5 fois sur une période de 3 mois. Chaque prélèvement sera réalisé sur animal vigile en moins d’1 minute. • Des tests comportementaux seront réalisés 3 jours (score neurologique), 60 jours (tests de l’open-field et du labyrinthe de Barnes) et 90 jours (test du labyrinthe de Barnes) après le traumatisme crânien, mais également chez les souris contrôles n’ayant pas subi de traumatisme crânien. Le score neurologique, qui évalue les réflexes des souris, dure 2 minutes. Le test de l’open-field, qui évalue les comportements exploratoires des souris, dure 9 minutes. Le test du labyrinthe de Barnes, qui évalue l’apprentissage et la mémoire spatiale des souris, comprend une phase d’apprentissage durant 3 jours consécutifs (3 essais de 3 minutes maximum/jour ; le délai entre 2 essais est de 1 à 2 heures) avant de réaliser le test le 4e jour (une minute). • A la fin du projet toutes les souris seront mises à mort par exsanguination par perfusion intracardiaque de sérum physiologique sous anesthésie générale. La réalisation de cette perfusion nécessite 7-8 minutes. L’anesthésique sera administré sur animal vigile par voie intrapéritonéale en moins d’une minute et cette injection sera précédée 30 minutes avant de l’administration par voie sous-cutanée d’un analgésique en moins d’1 minute.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Note de l'OXA. C'est l'endroit du document où les animaux devraient apparaître, et c'est celui qui résiste. Un nouvel examen, publié en 2024, a mesuré que cinq des six éléments attendus sur les dommages prévus progressaient depuis l'adoption d'un modèle commun européen. Les effets indésirables sont le sixième : 41 % des résumés allemands et 48 % des britanniques les décrivent complètement. Les auteurs relèvent aussi des effets présentés comme minimes sur des projets classés modérés ou sévères (Taylor et al., 2024). Ces mesures portent sur l'Allemagne et le Royaume-Uni. L'examen de 2018 classait la France parmi les pays les moins bons pour l'identification, l'accessibilité et la qualité de ses résumés, sans les noter rubrique par rubrique (Taylor et al., 2018). Les résumés français suivent aujourd'hui le modèle européen commun.
Les animaux souffrent-ils ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
L’induction du traumatisme crânien peut entraîner une diminution temporaire de la prise alimentaire et d’eau (légère perte de poids durant les premières 48 h après le traumatisme crânien avec une récupération du poids initial au bout de 4 jours) . La contention des souris pour réaliser les injections sous-cutanées ou intrapéritonéales peut induire un stress correspondant à la durée du geste, c’est-à-dire moins d’1 minute.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Note de l'OXA. Le formulaire demande de justifier ce sort, non de le décrire. L'analyse dommage-avantage que la directive impose au comité d'éthique porte sur « la souffrance, la douleur et l'angoisse » infligées aux animaux (directive 2010/63/UE, art. 38). Quand ce sort est la mise à mort, celle-ci ne figure donc pas parmi les dommages que le comité met en balance avec les bénéfices annoncés. L'OXA écrit « mise à mort » plutôt que « sacrifice », qui emprunte au registre du don consenti, ou « euthanasie », qui désigne une mort décidée dans l'intérêt de celui qui meurt.
Peut-on parler d'éthique en expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
A la fin de chaque procédure, tous les animaux seront mis à mort et leurs cerveaux seront prélevés pour réaliser différentes analyses.
Application de la règle des "3R", selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
1. Remplacement
Note de l'OXA. La directive demande au résumé « une démonstration de la conformité » aux exigences de remplacement, de réduction et de raffinement (directive 2010/63/UE, art. 43). C'est donc le demandeur qui démontre sa propre conformité, dans le document même qui sollicite l'autorisation. Cette démonstration peut prendre la forme d'une affirmation qu'aucune méthode de substitution n'existe, que le document n'a pas à sourcer. Ces trois exigences sont par ailleurs subordonnées à l'objectif du projet : elles cherchent à remplacer les animaux dans un projet donné, elles n'interrogent pas ce projet.
Comment avancer vers la fin de l'expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les mécanismes impliqués dans les lésions cérébrales induites par le traumatisme crânien mettent en jeu plusieurs types cellulaires dans différentes structures cérébrales qu’il est impossible de reproduire in vitro. Il est donc indispensable d’avoir recours à l’animal, afin de reproduire la pathologie humaine. De plus, les déficits comportementaux et les lésions cérébrales ne peuvent être évalués chez l’animal entier.
2. Réduction
Note de l'OXA. La réduction dont il est question ici porte sur le nombre d'animaux par groupe expérimental, calculé pour que l'analyse statistique tienne. Le total annoncé dans la fiche est une estimation portant sur une autorisation de cinq ans au maximum (code rural, art. R214-123) : il ne dit pas combien d'animaux seront effectivement utilisés, et il ne se rapporte pas à une année.
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Le faible taux d’échec (10%) des gestes pour réaliser le traumatisme crânien, ainsi que la bonne connaissance de la temporalité des mécanismes induits après le traumatisme crânien (activation microgliale, démyélinisation, détection des débris de myéline, déficits comportementaux, lésions de la substance blache) permettront de réduire le nombre d’animaux au minimum. Notre recul sur le modèle de traumatisme crânine nous permettant de déterminer au plus juste la taille des groupes d’animaux à utiliser, aucun test statistique ne sera utilisé pour déterminer le nombre d’animaux par groupe. Ce nombre d’animaux sera suffisant pour appliquer des tests statistiques entre les différentes conditions pour analyser les résulats obtenus.
3. Raffinement
Note de l'OXA. Le raffinement nomme une amélioration technique de la procédure, sans dire ce qu'elle change pour l'animal qui la subit. La réglementation impose d'atténuer la douleur, dans une limite qu'elle inscrit elle-même : « pour autant que cela soit compatible avec la finalité de la procédure expérimentale » (code rural, art. R214-109). Ce qui reste de souffrance après cette limite est autorisé. Le raffinement ne porte par ailleurs que sur la procédure : les souffrances de la captivité elle-même, confinement, bruit, lumière, manipulations d'entretien, ne relèvent d'aucun des trois R.
La réglementation est-elle « très stricte » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
L’eau et la nourriture seront fournies à volonté et le milieu sera enrichi par des cotons compactés. Les animaux seront hébergés en groupes sociaux stables, afin de limiter tout stress et modification de hiérarchie. Afin de s’assurer du bien-être animal, l’intervention chirurgicale permettant de réaliser le traumatisme crânien sera réalisée sous anesthésie générale et un analgésique sera donné en pré- et post-opératoire, afin de limiter la souffrance des animaux. La mise en place de points limites et l’observation du comportement des animaux permettront d’identifier toute souffrance et douleur, et d’entraîner une mise à mort anticipée, si nécessaire. Pour pallier la déshydratation pouvant survenir à la suite du traumatisme crânien, les souris recevront une injection de sérum physiologique par voie sous-cutanée, matin et soir, durant 2 jours, à compter du jour du traumatisme crânien. . De plus, afin de faciliter l’accès à la nourriture, quelques croquettes seront déposées directement sur le fond de la cage des souris durant 2 jours, à compter du jour du traumatisme crânien.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Note de l'OXA. Le dossier d'autorisation demande de justifier l'origine des animaux, leur espèce, leur nombre estimé et leur stade de développement (arrêté du 1er février 2013, art. 5). La justification attendue est technique : elle porte sur l'adéquation de l'espèce à l'objectif poursuivi. Ce que l'appartenance à une espèce autorise à faire subir à un individu est une question morale, et le formulaire ne la pose pas. L'appartenance à une espèce, prise seule, ne fonde pourtant pas de différence de statut moral entre des individus également capables de souffrir.
Spécisme et expérimentation animale · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Au vu de la littérature, la souris est l’espèce la plus utilisée pour la réalisation des modèles de traumatisme crânien et offre un large répertoire d’évaluation comportementale. De plus, cette espèce nous permet d’évaluer le rôle de notre protéine d’intérêt grâce à l’utilisation de souris transgéniques. Le traumatisme crânien sera réalisé chez des souris jeunes (6-8 semaines), puisque c’est un évènement fréquent dans cette tranche d’âge chez l’Homme. Les déficits comportementaux seront évalués 3 jours, 2 mois et 3 mois après le traumatisme crânien.