Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 2022-07-29 00:00:00
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-719438)
Neuf babouins olive juvéniles vont être utilisés, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance léger, puis réintégrés à la colonie de l’établissement pour la reproduction ou d’autres expériences. Chaque animal est capturé, anesthésié, perfusé puis soumis à six biopsies musculaires sur trois muscles d’un même membre, pour tester chez un primate un oligonucléotide destiné à moduler un gène impliqué dans la sclérose latérale amyotrophique. Le porteur présente ces gestes comme « peu invasifs et non terminaux ». Il indique que la réglementation impose l’essai sur une espèce non rongeuse proche de l’humain avant tout passage clinique.
Résumé produit par un modèle de langage à partir du seul texte du laboratoire, selon une méthode arrêtée par l’OXA. Publié sans relecture individuelle préalable, sous la responsabilité de l’association, et corrigé au fil des relectures.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
Décrire les objectifs du projet.
Note de l'OXA. Cette question est celle du formulaire européen de résumé non technique. Elle est posée au laboratoire qui demande l'autorisation, et sa réponse est écrite avant que la première procédure commence (arrêté du 1er février 2013, art. 5). Ces objectifs servent à justifier l'utilisation des animaux devant le comité d'éthique. Aucun document public ne dira ensuite s'ils ont été atteints : la directive permet aux États de faire mettre à jour le résumé avec les résultats de l'appréciation rétrospective (directive 2010/63/UE, art. 43), la base européenne prévoit de les recevoir, et aucune entrée française n'en porte (base ALURES).
Dans quel but fait-on ça ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les oligonucléotides (ONs) thérapeutiques, dont les siARN (petits duplexes d’ARN interférant avec la production des protéines), présentent un potentiel révolutionnaire dans les approches thérapeutiques par leur capacité à moduler l’expression génique, ouvrant la porte au traitement de nombreuses pathologies jusque-là sans traitement. Néanmoins, la délivrance de ces agents thérapeutiques dans les différents tissus et organes, notamment dans les tissus musculaires ou le système nerveux central, reste un défi majeur. La superoxide dismutase 1 (SOD1) est une protéine exprimée dans tous les organes du corps qui nous protégé du stress oxydatif (e.g. lors d’un épisode ischémique) et qui joue aussi un rôle protecteur en empêchant les processus de mort cellulaire. Cette protéine est fortement impliqué dans le développement des maladies humaines comme la sclérose latérale amyotrophique (cf. SLA ou maladie de Charcot), maladie neuromusculaire la plus fréquente touchant le SNC et les muscles et caractérisée par une perte progressive des neurones moteurs. L’objectif de la présente étude est de confirmer l’efficacité d’une molécule conjuguée crée par notre équipe, la C5-siSOD1, à moduler la production de SOD1 à niveau intracellulaire chez une espèce animal proche de l’Homme.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Note de l'OXA. Le formulaire européen demande les bénéfices « susceptibles de découler » du projet. Il appelle donc une projection, et il l'obtient : ce que le laboratoire écrit ici est ce qu'il espère, avant d'avoir commencé. Deux chercheuses ont repris six corpus d'études précliniques déjà menées et pesé les dommages réellement infligés aux animaux contre les bénéfices cliniques réellement obtenus : moins de 7 % de ces études ressortaient défendables (Pound et Nicol, 2018).
Est-ce « inutile » ou « nécessaire » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les oligonucléotides (ONs) thérapeutiques sont de plus en plus reconnus comme ayant un potentiel révolutionnaire dans les approches thérapeutiques par leur capacité à moduler l’expression génique, ouvrant la porte au traitement de nombreuses pathologies jusque-là sans traitement. Grâce à des designs spécifiques leur conférant différents modes d’action sur l’ADN ou l’ARN, les limites des applications et des cibles des ONs thérapeutiques vont bien au-delà des molécules jusque-là développées par le secteur pharmaceutique. En théorie, les ONs thérapeutiques pourraient permettre de corriger toute pathologie trouvant son origine dans un défaut d’expression génique. Malgré ce potentiel, es ONs thérapeutiques souffrent d’un handicap majeur pour permettre leur développement thérapeutique : leur difficulté à traverser les membranes cellulaires et accéder au matériel génétique. Il est attendu de ce projet la validation chez une espèce non-rongeur proche de l’homme du potentiel de délivrance d’ONs thérapeutiques grâce à leur couplage à des molécules « vecteurs ». Cette validation préliminaire doit permettre à notre équipe de proposer cette technologie pour une application thérapeutiques à grande échelle. A terme, ce projet vise à apporter et valider une solution innovante pour traiter de façon ciblée et efficace l’origine génétique de nombreuses pathologies, notamment neuromusculaires.
Nuisances prévues, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Note de l'OXA. La formule « en règle générale » autorise une réponse générale, et c'est l'un des points sur lesquels les examens de qualité trouvent ces documents défaillants. Un examen publié en 2018 a établi que les résumés allemands et britanniques décrivaient mal ce qui est fait aux animaux et ce que ceux-ci pourraient éprouver (Taylor et al., 2018). L'adoption d'un modèle commun européen a nettement amélioré le premier point, à peine le second (Taylor et al., 2024).
Le droit d'accès aux documents · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les 9 animaux seront soumis aux mêmes manipulations : – 2 Captures dans leur groupe sociale à l’aide des tunnels de capture et des techniques de renforcement positif. Durée totale de l’intervention 1h/animal/capture. Les perfusions et les biopsies se feront sous anesthésie générale. Après intubation orotrachéale, l’animal sera mis sous Sévoflurane. Durée totale de l’intervention 25’/animal. – Une perfusion pendant 30 minutes. Durée totale de l’intervention 1h/animal – 6 biopsies musculaires sur trois muscles différents (2 par muscle) sur le même membre pelvien : gastrocnémien, quadriceps et tibial antérieur. Durée totale de l’intervention 1h/animal/pour les 3 biopsies
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Note de l'OXA. C'est l'endroit du document où les animaux devraient apparaître, et c'est celui qui résiste. Un nouvel examen, publié en 2024, a mesuré que cinq des six éléments attendus sur les dommages prévus progressaient depuis l'adoption d'un modèle commun européen. Les effets indésirables sont le sixième : 41 % des résumés allemands et 48 % des britanniques les décrivent complètement. Les auteurs relèvent aussi des effets présentés comme minimes sur des projets classés modérés ou sévères (Taylor et al., 2024). Ces mesures portent sur l'Allemagne et le Royaume-Uni. L'examen de 2018 classait la France parmi les pays les moins bons pour l'identification, l'accessibilité et la qualité de ses résumés, sans les noter rubrique par rubrique (Taylor et al., 2018). Les résumés français suivent aujourd'hui le modèle européen commun.
Les animaux souffrent-ils ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
La perfusion et les biopsies se feront sous anesthésie générale. Des complications lors de l’anesthésie des animaux sont rares mais possibles (ex. : arrêt cardiaque ou respiratoire). Aucun effet délétère est attendu à l’issue de la perfusion intraveineuse des différents produits. Aucune toxicité d’origine pharmacologique (liée à l’inhibition de l’expression de SOD1) n’est à attendre d’une administration unique, compte tenue du mode d’action transitoire des molécules administrées et de leur élimination progressive. Le volume de perfusion (5mL/Kg) est en accord avec la littérature existante pour éviter tout risque d’hypervolémie. Les prélèvements de tissu musculaire se feront sous anesthésie générale. Le risque d’infection est réduit mais possible. Dans ce genre d’intervention le risque d’hémorragie est minime mais possible. Après la perfusion et les biopsies, les individus resteront pendant 24h et 48h sous surveillance en infirmerie avec un congénère de leur groupe social (e.g. la mère) pour réduire au maximum le stress potentielle liée à la séparation de son groupe d’origine.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Note de l'OXA. Le formulaire demande de justifier ce sort, non de le décrire. L'analyse dommage-avantage que la directive impose au comité d'éthique porte sur « la souffrance, la douleur et l'angoisse » infligées aux animaux (directive 2010/63/UE, art. 38). Quand ce sort est la mise à mort, celle-ci ne figure donc pas parmi les dommages que le comité met en balance avec les bénéfices annoncés. L'OXA écrit « mise à mort » plutôt que « sacrifice », qui emprunte au registre du don consenti, ou « euthanasie », qui désigne une mort décidée dans l'intérêt de celui qui meurt.
Peut-on parler d'éthique en expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Une fois la procédure finie, les animaux intégreront la colonie de babouins olive de notre établissement et seront inclus dans des programmes de reproduction ou expérimentaux selon la demande de la communauté scientifique.
Application de la règle des "3R", selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
1. Remplacement
Note de l'OXA. La directive demande au résumé « une démonstration de la conformité » aux exigences de remplacement, de réduction et de raffinement (directive 2010/63/UE, art. 43). C'est donc le demandeur qui démontre sa propre conformité, dans le document même qui sollicite l'autorisation. Cette démonstration peut prendre la forme d'une affirmation qu'aucune méthode de substitution n'existe, que le document n'a pas à sourcer. Ces trois exigences sont par ailleurs subordonnées à l'objectif du projet : elles cherchent à remplacer les animaux dans un projet donné, elles n'interrogent pas ce projet.
Comment avancer vers la fin de l'expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
L’évaluation de l’efficacité et de la sécurité des produits de santé destinés à l’Homme doit être réalisée chez une espèce rongeur et une espèce non rongeur avant de faire une demande d’investigation chez l’Homme en clinique. La capacité du conjugué vectorisé C5-siSOD1 à éteindre l’expression du gène SOD1 a déjà été démontrée sur différents modèles cellulaires in vitro puis confirmée in vivo chez le rongeur. Afin de pouvoir proposer à l’industrie pharmaceutique cette technologie de vectorisation d’ONs thérapeutique, le Sponsor doit maintenant établir la preuve de son efficacité et innocuité chez une espèce non rongeur proche de l’Homme. Ce projet s’inscrit donc dans une démarche de développement préclinique, en confirmant chez une espèce de primate la capacité du conjugué vectorisé C5-siSOD1h à éteindre l’expression du gène SOD1 après administration systémique.
2. Réduction
Note de l'OXA. La réduction dont il est question ici porte sur le nombre d'animaux par groupe expérimental, calculé pour que l'analyse statistique tienne. Le total annoncé dans la fiche est une estimation portant sur une autorisation de cinq ans au maximum (code rural, art. R214-123) : il ne dit pas combien d'animaux seront effectivement utilisés, et il ne se rapporte pas à une année.
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
La conception de ce projet a non seulement visé à réduire au maximum l’utilisation des primates, mais aussi de limiter les interventions à des manipulations transitoires, peu invasives et non terminales. L’expérience acquise chez la souris permet de réduire le nombre de primates dans chaque groupe à trois, car des grands effets du traitement sont attendus. Pour réduire le nombre d’individus seuls des mâles seront utilisés pour ce projet (pour éviter tout éffet potentiel du sexe sur la variable étudiée). Un nombre minimal de 3 groupes a été retenu, soit un total limité à 9 animaux: – 1er groupe recevant une perfusion d’un siARN non vectorisé, le N6-siSOD1h. – 2ème groupe recevant une perfusion d’un siARN vectorisé, le C5-siSOD1h. – 3ème groupe «contrôle» recevant une solution tampon phosphate (PBS).
3. Raffinement
Note de l'OXA. Le raffinement nomme une amélioration technique de la procédure, sans dire ce qu'elle change pour l'animal qui la subit. La réglementation impose d'atténuer la douleur, dans une limite qu'elle inscrit elle-même : « pour autant que cela soit compatible avec la finalité de la procédure expérimentale » (code rural, art. R214-109). Ce qui reste de souffrance après cette limite est autorisé. Le raffinement ne porte par ailleurs que sur la procédure : les souffrances de la captivité elle-même, confinement, bruit, lumière, manipulations d'entretien, ne relèvent d'aucun des trois R.
La réglementation est-elle « très stricte » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les animaux seront manipulés seulement à trois moments : lors de la perfusion et au moment des deux biopsies. Les trois manipulations se feront sous anesthésie générale et placés sur une surface chauffante. Après intubation orotrachéale, l’animal sera mis sous Sévoflurane. Toutes les interventions seront réalisées par l’équipe de vétérinaires de l’établissement utilisateur. Aucun effet négatif n’est attendu concernant les produits perfusés. Les zones d’incision seront tout d’abord tondues, nettoyées et désinfectées. Seulement 100 mg de muscle squelettique seront preleves a chaque biopsie après avoir réalisé une petite incision cutanée pour accéder au muscle. En début de chaque intervention, une analgésie sera assurée. Ce genre de biopsie n’est habituellement pas douloureux en post-opératoire et ne nécessite pas de traitement antalgique de manière systématique. L’animal sera gardé, toutefois, sous surveillance 48h en zone d’isolement avec un congénère, et évalué quotidiennement par l’équipe de zootechnie et l’équipe vétérinaire. En cas de signes de douleurs, un traitement antalgique pourra être initié. Au bout de 48h, si la récupération est validée par l’équipe vétérinaire, l’animal pourra être réintroduit dans son groupe. Pendant toute l’anesthésie les individus seront surveillés et monitorés par les vétérinaires. Concernant la perfusion, les individus resteront sous surveillance 24h avec un congénère (e.g. la mère) avant d’être réintégrés dans leur groupe d’origine. Ils seront réintroduits dans leurs groupes sociaux suivant la procédure validée par la Structure en charge du Bien-Être Animal de l’établissement utilisateur et sous surveillance accrue du vétérinaire. Les captures des individus dans leurs groupes sociaux se feront à l‘aide d’un système de tunnels et des techniques de renforcement positif. Les individus ciblés seront transférés à l’aide d’un nid de capture en infirmerie où ils seront induits dans des cages à fond amovible.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Note de l'OXA. Le dossier d'autorisation demande de justifier l'origine des animaux, leur espèce, leur nombre estimé et leur stade de développement (arrêté du 1er février 2013, art. 5). La justification attendue est technique : elle porte sur l'adéquation de l'espèce à l'objectif poursuivi. Ce que l'appartenance à une espèce autorise à faire subir à un individu est une question morale, et le formulaire ne la pose pas. L'appartenance à une espèce, prise seule, ne fonde pourtant pas de différence de statut moral entre des individus également capables de souffrir.
Spécisme et expérimentation animale · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Le babouin olive est un modèle bien connu dans la recherche biomédicale. Cette espèce de primate reste au jour d’aujourd’hui l’espèce la plus accessible dans notre établissement. Par sa grande taille elle permet facilement la réalisation de plusieurs biopsies des muscles squelettiques sur un même individu. Les animaux utilisés dans cette étude seront tous des individus juvéniles entre 3-4 kg. Les produits perfusés le sont à une concentration 5 mg/kg. Cette concentration a été calculée par rapport à des études précédentes chez la souris. Ces produits doivent être synthétisés au laboratoire, donc nous sommes limités par la quantité de produit. L’utilisation des jeunes babouins olive s’explique par le compromis entre poids de l’animal (capacité de synthétiser les molécules à perfuser) et leur volume musculaire (capacité de faire 3 biopsies sur le même membre pelvien).