Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 2022-10-31 00:00:00
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-932955)
853 souris vont être utilisées, toutes tuées à l’issue, une partie dans des procédures terminales sous anesthésie, les autres à un niveau de souffrance modéré. La plupart subissent une chirurgie du cerveau de quarante minutes pour injecter des nanoparticules ou des virus, avec selon les cas l’implantation de canules, de fibres optiques ou d’électrodes, et des enregistrements de cinq heures. Le projet vise à piloter par lumière infrarouge les récepteurs de la dopamine et de l’acétylcholine pour étudier les interactions sociales entre souris. Le porteur signale des douleurs crâniennes, des saignements, des pertes de poids et des bagarres entre animaux, et affirme que cette recherche n’est réalisable que sur l’animal.
Résumé produit par un modèle de langage à partir du seul texte du laboratoire, selon une méthode arrêtée par l’OXA. Publié sans relecture individuelle préalable, sous la responsabilité de l’association, et corrigé au fil des relectures.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
Décrire les objectifs du projet.
Note de l'OXA. Cette question est celle du formulaire européen de résumé non technique. Elle est posée au laboratoire qui demande l'autorisation, et sa réponse est écrite avant que la première procédure commence (arrêté du 1er février 2013, art. 5). Ces objectifs servent à justifier l'utilisation des animaux devant le comité d'éthique. Aucun document public ne dira ensuite s'ils ont été atteints : la directive permet aux États de faire mettre à jour le résumé avec les résultats de l'appréciation rétrospective (directive 2010/63/UE, art. 43), la base européenne prévoit de les recevoir, et aucune entrée française n'en porte (base ALURES).
Dans quel but fait-on ça ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
L’objectif de ce projet est de développer des technologies permettant de contrôler par la lumière infra-rouge proche les récepteurs des neurotransmetteurs chez la souris, pour des études de circuits neuronaux et des comportements. Pour cela, nous utiliserons des outils photochimiques synthétiques nouvellement développés, qui permettent la libération rapide de drogues et d’autres neurotransmetteurs par la lumière, ou bien qui modulent de manière bidirectionnelle l’activité d’un récepteur neuronal avec de la lumière. Leur utilisation chez la souris en comportement est très restreinte, notamment parce que ces sondes sont normalement stimulées par la lumière UV ou visible, qui pénètre très mal dans les tissus, et donc nécessitent d’un apport local de lumière qui est invasif. Pour surmonter ce problème, nous proposons d’utiliser des nanoparticules de conversion ascendante, des chromophores (dans notre cas, substance qui possède des électrons capables d’absorber l’énergie et d’être excités, à des longueurs d’onde spécifiques, et qui va en retour en transmettre d’autres) inorganiques qui ont la propriété physique de convertir la lumière infrarouge proche (qui peut pénétrer assez profondément au sein des tissus biologiques) en lumière visible. Ces particules sont déjà utilisées dans des études en cancérologie ou en neuroscience, mais leur utilisation avec des drogues dans le cerveau n’est pas encore démontrée. Ces nanoparticules seront couplées à l’utilisation de drogues photosensible, permettant un contrôle non invasif des récepteurs endogènes du cerveau chez les souris en comportement. Les stratégies développées ici seront applicables à la plupart des récepteurs, circuits neuronaux et modèles animaux, ainsi notre projet a un potentiel pour changer le paysage de notre compréhension de la neuromodulation, à la fois dans le domaine de la santé et de la maladie.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Note de l'OXA. Le formulaire européen demande les bénéfices « susceptibles de découler » du projet. Il appelle donc une projection, et il l'obtient : ce que le laboratoire écrit ici est ce qu'il espère, avant d'avoir commencé. Deux chercheuses ont repris six corpus d'études précliniques déjà menées et pesé les dommages réellement infligés aux animaux contre les bénéfices cliniques réellement obtenus : moins de 7 % de ces études ressortaient défendables (Pound et Nicol, 2018).
Est-ce « inutile » ou « nécessaire » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Cette étude et les technologies développées ici présentent un fort potentiel non seulement à des fins de recherche sur des modèles animaux, mais aussi pour des applications thérapeutiques chez l’homme. Le ciblage des médicaments sur des populations neuronales particulières pourrait améliorer l’efficacité thérapeutique, tout en diminuant les effets secondaires associés à une sélectivité insuffisante dans les approches conventionnelles. Les stratégies développées ici devraient être applicables à la plupart des récepteurs, cellules, circuits et modèles animaux. Nous nous concentrerons principalement sur les interactions sociales entre des souris vivant en groupe, en manipulant de manière non invasive les voies dopaminergiques et cholinergiques sur des souris vigiles, à l’aide de molécules pharmacologiques spécifiques au type cellulaire et contrôlable par la lumière infrarouge proche. Cela permettra de déterminer comment les récepteurs de la dopamine et de l’acétylcholine contribuent à conduire ou à inhiber les interactions sociales. La réalisation du projet pourrait aider à améliorer notre compréhension de la physiologie normale et à mieux comprendre l’étiologie et le traitement des maladies neuropsychiatriques, en offrant une occasion unique de tester les avantages des médicaments ciblant les cellules pour les troubles neurologiques et neuropsychiatriques.
Nuisances prévues, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Note de l'OXA. La formule « en règle générale » autorise une réponse générale, et c'est l'un des points sur lesquels les examens de qualité trouvent ces documents défaillants. Un examen publié en 2018 a établi que les résumés allemands et britanniques décrivaient mal ce qui est fait aux animaux et ce que ceux-ci pourraient éprouver (Taylor et al., 2018). L'adoption d'un modèle commun européen a nettement amélioré le premier point, à peine le second (Taylor et al., 2024).
Le droit d'accès aux documents · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Injections de nanoparticules ou de particules virales dans le cerveau : procédure chirurgicale réalisée sous anesthésie générale (durée 40 min), une fois par animal, sur l’ensemble des animaux, soit 800 animaux. 2) Prélèvement du cerveau: procédure terminale, réalisée sous anesthésie profonde, sur 100 souris. 3) Enregistrements électrophysiologiques in vivo (durée 5h) : procédure terminale, procédure chirurgicale réalisée sous anesthésie profonde, sur 352 souris. 4) Implantation de canule : procédure chirurgicale réalisée sous anesthésie générale (durée 40 min), une fois par animal, sur 77 animaux. 5) Implantation de fibres optiques ou de diodes électroluminescentes: procédure réalisée sous anesthésie générale (durée 40 min), une fois par animal, sur 231 animaux. 6) Implantation de puces pour radio-identification: procédure réalisée sous anesthésie générale (durée 5 min), une fois par animal, sur 154 animaux. 7) Prélèvement de liquide cérébro-spinal : procédure terminale, réalisée sous anesthésie générale (durée 20 min), sur 53 animaux.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Note de l'OXA. C'est l'endroit du document où les animaux devraient apparaître, et c'est celui qui résiste. Un nouvel examen, publié en 2024, a mesuré que cinq des six éléments attendus sur les dommages prévus progressaient depuis l'adoption d'un modèle commun européen. Les effets indésirables sont le sixième : 41 % des résumés allemands et 48 % des britanniques les décrivent complètement. Les auteurs relèvent aussi des effets présentés comme minimes sur des projets classés modérés ou sévères (Taylor et al., 2024). Ces mesures portent sur l'Allemagne et le Royaume-Uni. L'examen de 2018 classait la France parmi les pays les moins bons pour l'identification, l'accessibilité et la qualité de ses résumés, sans les noter rubrique par rubrique (Taylor et al., 2018). Les résumés français suivent aujourd'hui le modèle européen commun.
Les animaux souffrent-ils ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les chirurgies au niveau du crane peuvent engendrer d’éventuelles douleurs au niveau des canaux auditifs, ou bien au niveau du crane. L’ouverture de la peau au niveau du crane, ainsi que les craniotomies, peuvent produire des saignements locaux. L’anesthésie peut faire baisser la température de l’animal, ainsi que sa respiration. Après une chirurgie, on peut s’attendre à une perte de poids drastique et continue, une perte/instabilité des implants, des signes d’infection grave autour de la zone de l’implant, une perte d’appétit et/ou une consommation atténuée de liquides, des anomalies comportementales et/ou morphologiques incurables. Les bagarres entre animaux dans une même cage peuvent aussi arriver, blessant superficiellement ou gravement certaines souris. Finalement, certains effets indésirables liés à la stimulation optique peuvent survenir et troubler l’activité locomotrice.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Note de l'OXA. Le formulaire demande de justifier ce sort, non de le décrire. L'analyse dommage-avantage que la directive impose au comité d'éthique porte sur « la souffrance, la douleur et l'angoisse » infligées aux animaux (directive 2010/63/UE, art. 38). Quand ce sort est la mise à mort, celle-ci ne figure donc pas parmi les dommages que le comité met en balance avec les bénéfices annoncés. L'OXA écrit « mise à mort » plutôt que « sacrifice », qui emprunte au registre du don consenti, ou « euthanasie », qui désigne une mort décidée dans l'intérêt de celui qui meurt.
Peut-on parler d'éthique en expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
A l’issue des procédures, tous les animaux seront euthanasiés, afin de récupérer les cerveaux pour analyses histologiques et moléculaires, ou bien pour vérifier le site d’enregistrement electrophysiologique.
Application de la règle des "3R", selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
1. Remplacement
Note de l'OXA. La directive demande au résumé « une démonstration de la conformité » aux exigences de remplacement, de réduction et de raffinement (directive 2010/63/UE, art. 43). C'est donc le demandeur qui démontre sa propre conformité, dans le document même qui sollicite l'autorisation. Cette démonstration peut prendre la forme d'une affirmation qu'aucune méthode de substitution n'existe, que le document n'a pas à sourcer. Ces trois exigences sont par ailleurs subordonnées à l'objectif du projet : elles cherchent à remplacer les animaux dans un projet donné, elles n'interrogent pas ce projet.
Comment avancer vers la fin de l'expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Notre objectif est de tester de nouvelles technologies optiques et chimiques (nanoparticules, composés cagés…) pour manipuler les récepteurs des neurotransmetteurs situés dans les régions profondes du cerveau, de manière non invasive, et d’étudier l’impact de cette manipulation sur l’activité cérébrale et sur les comportements, notamment sociaux. Cette étude n’est donc réalisable que sur des animaux. Il y a plusieurs avantages à utiliser la souris comme modèle pour notre recherche : Un nombre croissant de recherches a révélé des homologies génétiques, anatomiques et fonctionnelles chez les rongeurs et les primates, notamment au niveau neuronal et au niveau des récepteurs. Par exemple, les fonctions dopaminergiques, cholinergiques et glutamatergiques sont similaires chez les rongeurs et les primates. En outre, plusieurs comportements cognitifs ont été conceptualisés sur la base des découvertes chez les primates et répliqués avec succès chez les rongeurs. De plus, l’existence de nombreuses souris génétiquement modifiées permet l’utilisation de techniques permettant une visualisation, une manipulation et un enregistrement restreints dans l’espace et dans le temps de l’activité cérébrale spécifique à un type de cellule. Par exemple, afin de réaliser des expériences d’optopharmacologie, nous utiliserons des lignées de souris transgéniques dans lesquelles des récepteurs manipulables pourront être ciblés sélectivement sur une population neuronale spécifique. En manipulant ces récepteurs neuronaux avec des drogues sélectives et photosensibles, nous pourrons, espérons-le, révéler des cibles sélectives pour de nouveaux traitements plus ciblés.
2. Réduction
Note de l'OXA. La réduction dont il est question ici porte sur le nombre d'animaux par groupe expérimental, calculé pour que l'analyse statistique tienne. Le total annoncé dans la fiche est une estimation portant sur une autorisation de cinq ans au maximum (code rural, art. R214-123) : il ne dit pas combien d'animaux seront effectivement utilisés, et il ne se rapporte pas à une année.
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Le nombre d’animaux, pour ce projet, est déterminé sur la base d’une littérature vaste et robuste dans des domaines similaires (etudes employant de l’optogénétique par exemple) mais aussi sur notre expertise personnelle en photopharmacologie. Afin de réduire l’utilisation de souris au minimum, nous nous imposerons un cahier des charges strict. Pour ce faire, les procédures ont été pensées pour qu’une même souris puisse passer dans un nombre maximum d’expériences afin de réduire l’utilisation de nouveaux animaux pour chaque expérimentation. Nous utiliserons dans la mesure du possible tant les souris mâles que femelles, afin d’utiliser toutes les souris issues d’une même portée.
3. Raffinement
Note de l'OXA. Le raffinement nomme une amélioration technique de la procédure, sans dire ce qu'elle change pour l'animal qui la subit. La réglementation impose d'atténuer la douleur, dans une limite qu'elle inscrit elle-même : « pour autant que cela soit compatible avec la finalité de la procédure expérimentale » (code rural, art. R214-109). Ce qui reste de souffrance après cette limite est autorisé. Le raffinement ne porte par ailleurs que sur la procédure : les souffrances de la captivité elle-même, confinement, bruit, lumière, manipulations d'entretien, ne relèvent d'aucun des trois R.
La réglementation est-elle « très stricte » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les animaux seront placés dans une animalerie aux conditions d’hébergement standard (température de 22°C et avec une photopériode de 12h jour et 12h nuit). Du nid végétal sera déposé dans les cages de manière à enrichir l’environnement des animaux et leur permettre de fabriquer un nid. Lors des etudes en environnements sociaux, l’espace alloué pour chaque souris ainsi que l’enrichissement sont supérieurs aux cages conventionnelles de stabulation. Les souris sont pesées tous les jours et suivies en temps réel via des caméras infra-rouge nous permettant de mesurer à distance le comportement des souris. Il nous est donc possible d’intervenir rapidement en cas de quelconque soucis. De plus, le bien-être des souris est conditionné par la mise en place de protocoles visant à réduire les éventuelles souffrances animales (administration d’analgésique lors de chirurgies ou après agression entre congénères).
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Note de l'OXA. Le dossier d'autorisation demande de justifier l'origine des animaux, leur espèce, leur nombre estimé et leur stade de développement (arrêté du 1er février 2013, art. 5). La justification attendue est technique : elle porte sur l'adéquation de l'espèce à l'objectif poursuivi. Ce que l'appartenance à une espèce autorise à faire subir à un individu est une question morale, et le formulaire ne la pose pas. L'appartenance à une espèce, prise seule, ne fonde pourtant pas de différence de statut moral entre des individus également capables de souffrir.
Spécisme et expérimentation animale · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Nous avons choisi le modèle de la souris car d’un point de vue anatomique et fonctionnel, les systèmes dopaminergiques méso-cortico-limbiques sont bien conservés, chez l’ensemble des mammifères et en particulier chez les rongeurs. Plus particulièrement, la distribution des récepteurs nicotiniques et les afférences cholinergiques sont organisées de manières similaires que chez l’homme. Ce n’est pas le cas chez les invertébrés, les poissons ou les oiseaux. De plus, la génétique de la souris offre des outils de modulation des réseaux neuronaux, difficilement accessibles chez d’autres modèles animaux. Si les modèles d’invertébrés et poisson peuvent être utilisés pour étudier certains mécanismes dopaminergiques, l’organisation anatomique est trop différente pour qu’ils puissent être utilisés pour comprendre la modulation nicotinique du système dopaminergique. Finalement la souris étant un mammifère social qui vit en groupe, c’est un modèle pratique pour pouvoir étudier le comportement social en groupe chez les animaux sociaux. Des modèles d’autres mammifères sociaux (rat, singe) ne se justifient pas car les outils génétiques nécessaires pour disséquer les mécanismes sous-jacents sont peu nombreux chez ces espèces. Les animaux seront utilisés à l’âge adulte (> 8 semaines). Pour les études nécessitant une transduction virale, nous utiliserons des souris adultes, âgées de 7-8 semaines le jour de l’injection virale, afin d’observer un temps de transduction nécessaire par le virus concerné (entre 2 et 4 semaines). Les expériences d’électrophysiologie ou de comportement seront réalisées à partir de 4 semaines après l’injection virale, temps nécessaire à l’expression du transgène. L’implantation des fibres optiques ou des électrodes d’enregistrement se fera à partir de 8 semaines d’âge.