Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 2023-09-06 00:00:00
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-240579)
303 souris vont être utilisées, toutes tuées à l’issue, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance déclaré léger à modéré. Chacune subit six interventions, dont des injections, un prélèvement dans l’orbite de l’œil et une blessure hémorragique de trente minutes sous anesthésie, par coupure de la queue ou section d’une veine caudale. Le porteur détaille des effets possibles allant de l’anémie et la perte de poids jusqu’à l’automutilation et une réaction hyperalgésique, et prévoit une mise à mort sans réveil. Ce modèle de souris à déficit induit en facteur X, présenté comme « unique au monde », sert à mesurer la dose corrigeant un trouble hémorragique rare.
Résumé produit par un modèle de langage à partir du seul texte du laboratoire, selon une méthode arrêtée par l’OXA. Publié sans relecture individuelle préalable, sous la responsabilité de l’association, et corrigé au fil des relectures.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
Décrire les objectifs du projet.
Note de l'OXA. Cette question est celle du formulaire européen de résumé non technique. Elle est posée au laboratoire qui demande l'autorisation, et sa réponse est écrite avant que la première procédure commence (arrêté du 1er février 2013, art. 5). Ces objectifs servent à justifier l'utilisation des animaux devant le comité d'éthique. Aucun document public ne dira ensuite s'ils ont été atteints : la directive permet aux États de faire mettre à jour le résumé avec les résultats de l'appréciation rétrospective (directive 2010/63/UE, art. 43), la base européenne prévoit de les recevoir, et aucune entrée française n'en porte (base ALURES).
Dans quel but fait-on ça ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Le déficit en facteur X (FX) de la coagulation sanguine est un désordre hémorragique héréditaire rare avec une incidence estimée à 1-2 par million, bien qu’une fréquence plus élevée ait été observée dans des populations où le mariage consanguin est un événement courant. Le FX joue un rôle crucial au sein de la cascade de la coagulation sanguine. Le déficit en FX est associé à une tendance aux saignements et des symptômes sévères de la maladie sont principalement observés chez des patients ayant moins de 10% d’activité coagulante en FX. Au-delà de son rôle crucial au sein de la coagulation sanguine, plusieurs travaux ont montré que la protéine pouvait également moduler la progression d’autres pathologies comme les maladies fibro-prolifératives ou certains cancers. Le FX a également été montré comme jouant un rôle au cours de l’inflammation ou d’infections virales. La marque la plus évidente que le FX est impliqué dans des processus non hémostatiques est la létalité embryonnaire partielle de 50% in utero observée chez des souris avec une anomalie sévère pour le FX. Les souris déficientes survivantes meurent dans les 30 jours après leur naissance. La construction d’un modèle de souris avec un déficit total en FX mais viable à l’âge adulte nous est apparue comme une stratégie puissante et originale pour aborder in vivo les fonctions biologiques diverses de la protéine. Nous avons obtenu une souche de souris unique au monde avec un déficit inductible du FX quand la souris est adulte. L’objectif du projet est de caractériser ce modèle unique en déterminant la dose de FX nécessaire dans la circulation sanguine pour rétablir une hémostase normale dans les souris pour lesquelles on a induit un déficit en FX. Pour cela nous allons utiliser différents modèles de saignements mis au point dans notre laboratoire et publiés pour d’autres modèles hémorragiques. L’ensemble de ces modèles miment soit des saignements de la vie courante, ou des saignement plus accidentels, ou des saignements sévères comme lors d’actes chirurgicaux.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Note de l'OXA. Le formulaire européen demande les bénéfices « susceptibles de découler » du projet. Il appelle donc une projection, et il l'obtient : ce que le laboratoire écrit ici est ce qu'il espère, avant d'avoir commencé. Deux chercheuses ont repris six corpus d'études précliniques déjà menées et pesé les dommages réellement infligés aux animaux contre les bénéfices cliniques réellement obtenus : moins de 7 % de ces études ressortaient défendables (Pound et Nicol, 2018).
Est-ce « inutile » ou « nécessaire » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Ce projet s’inscrit dans un objectif de tester et développer de nouvelles molécules thérapeutiques dans le domaine des maladies hémorragiques mais aussi d’autres pathologies comme les maladies fibro-prolifératives ou certains cancers, l’inflammation ou certaines infections virales dans lesquelles il a été montré que le FX pouvait jouer un rôle. En effet, la compréhension et la caractérisation du modèle de déficit acquis en FX est une option incontournable à cet objectif. Pour cela, il s’agit dans ce projet d’évaluer l’efficacité hémostatique du FX et par conséquent son importance physiologique dans des modèles hémorragiques différents en termes de sévérité et de lits vasculaires visés. Le résultat attendu sera donc la caractérisation in vivo du rôle du FX dans l’hémostase.
Nuisances prévues, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Note de l'OXA. La formule « en règle générale » autorise une réponse générale, et c'est l'un des points sur lesquels les examens de qualité trouvent ces documents défaillants. Un examen publié en 2018 a établi que les résumés allemands et britanniques décrivaient mal ce qui est fait aux animaux et ce que ceux-ci pourraient éprouver (Taylor et al., 2018). L'adoption d'un modèle commun européen a nettement amélioré le premier point, à peine le second (Taylor et al., 2024).
Le droit d'accès aux documents · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les souris seront soumises à 6 interventions chacune : – 3 injections intrapéritonéales espacées d’au moins 2 jours. Chaque injection va durer 5 secondes, au total 15 secondes – 1 prélèvement sanguin rétro-orbital. Ce prélèvement va durer 10 secondes -1 injection rétro-orbitale qui va durer 5 secondes – 1 blessure induisant un saignement qui va durer 30 minutes (coupure extrémité de la queue ou transsection d’une veine ou d’une artère caudale, ou incision de la veine Saphène)
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Note de l'OXA. C'est l'endroit du document où les animaux devraient apparaître, et c'est celui qui résiste. Un nouvel examen, publié en 2024, a mesuré que cinq des six éléments attendus sur les dommages prévus progressaient depuis l'adoption d'un modèle commun européen. Les effets indésirables sont le sixième : 41 % des résumés allemands et 48 % des britanniques les décrivent complètement. Les auteurs relèvent aussi des effets présentés comme minimes sur des projets classés modérés ou sévères (Taylor et al., 2024). Ces mesures portent sur l'Allemagne et le Royaume-Uni. L'examen de 2018 classait la France parmi les pays les moins bons pour l'identification, l'accessibilité et la qualité de ses résumés, sans les noter rubrique par rubrique (Taylor et al., 2018). Les résumés français suivent aujourd'hui le modèle européen commun.
Les animaux souffrent-ils ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les 3 injections répétées espacées de 2 jours en intrapéritonéal d’ARN double brin peuvent entrainer par ordre croissant de sévérité les apparences ou signaux suivants chez les souris manque toilettage, moins mobile, isolé mais attentif, anémie (apparence blanchâtre aux extrémités), perte de poids
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Note de l'OXA. Le formulaire demande de justifier ce sort, non de le décrire. L'analyse dommage-avantage que la directive impose au comité d'éthique porte sur « la souffrance, la douleur et l'angoisse » infligées aux animaux (directive 2010/63/UE, art. 38). Quand ce sort est la mise à mort, celle-ci ne figure donc pas parmi les dommages que le comité met en balance avec les bénéfices annoncés. L'OXA écrit « mise à mort » plutôt que « sacrifice », qui emprunte au registre du don consenti, ou « euthanasie », qui désigne une mort décidée dans l'intérêt de celui qui meurt.
Peut-on parler d'éthique en expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Tous les animaux sont encore sous anesthésie à la fin de chacune des procédures où ils subissent un test de saignement qui dure 30 minutes. Les animaux en fin des procédures exploratoires seront mis à mort avant leur réveil pour prélever les tissus qui seront analysés par la suite. Les animaux qui ne répondent pas aux critères hémostatiques nécessaires notamment avec une formulation sanguine non rétablie ou qui ont des taux de facteur X qui ne sont pas inférieurs à 1% seront mis à mort sous anesthésie pour prélever les tissus qui seront analysés par la suite.
Application de la règle des "3R", selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
1. Remplacement
Note de l'OXA. La directive demande au résumé « une démonstration de la conformité » aux exigences de remplacement, de réduction et de raffinement (directive 2010/63/UE, art. 43). C'est donc le demandeur qui démontre sa propre conformité, dans le document même qui sollicite l'autorisation. Cette démonstration peut prendre la forme d'une affirmation qu'aucune méthode de substitution n'existe, que le document n'a pas à sourcer. Ces trois exigences sont par ailleurs subordonnées à l'objectif du projet : elles cherchent à remplacer les animaux dans un projet donné, elles n'interrogent pas ce projet.
Comment avancer vers la fin de l'expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Le système de la coagulation est complexe, faisant intervenir de nombreux acteurs, autant des molécules procoagulantes que leurs inhibiteurs mais aussi des phospholipides membranaires. Actuellement les tests disponibles in vitro, même s’ils se sont beaucoup améliorés depuis quelques années, ne permettent pas de reproduire l’intégralité de ce processus.
2. Réduction
Note de l'OXA. La réduction dont il est question ici porte sur le nombre d'animaux par groupe expérimental, calculé pour que l'analyse statistique tienne. Le total annoncé dans la fiche est une estimation portant sur une autorisation de cinq ans au maximum (code rural, art. R214-123) : il ne dit pas combien d'animaux seront effectivement utilisés, et il ne se rapporte pas à une année.
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Afin de déterminer le nombre d’animaux approprié pour le projet, nous avons réalisé une analyse statistique optimale après un calcul de puissance. Nous avons estimé le nombre d’animaux nécessaire de 303 au maximum.
3. Raffinement
Note de l'OXA. Le raffinement nomme une amélioration technique de la procédure, sans dire ce qu'elle change pour l'animal qui la subit. La réglementation impose d'atténuer la douleur, dans une limite qu'elle inscrit elle-même : « pour autant que cela soit compatible avec la finalité de la procédure expérimentale » (code rural, art. R214-109). Ce qui reste de souffrance après cette limite est autorisé. Le raffinement ne porte par ailleurs que sur la procédure : les souffrances de la captivité elle-même, confinement, bruit, lumière, manipulations d'entretien, ne relèvent d'aucun des trois R.
La réglementation est-elle « très stricte » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Nous avons aussi attaché une grande importance au raffinement : les procédures utilisées se feront dans le cadre adapté d’un hébergement agréé, respectant au maximum le bienêtre des animaux avec un enrichissement du milieu. Toutes les interventions sur les animaux sont faîtes en limitant la souffrance par le respect des méthodes anesthésiques. La durée des interventions est réduite au strict nécessaire. La surveillance sera rapprochée et des points limites spécifiques sont prévus. La principale intervention sur les souris aura lieue sous anesthésie générale et sans réveil. Au cours de ce projet, les opportunités de raffinement seront régulièrement réévaluées pour nous assurer de la mise en place rapide de tout nouveau développement technique qui interviendrait pendant la période du projet.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Note de l'OXA. Le dossier d'autorisation demande de justifier l'origine des animaux, leur espèce, leur nombre estimé et leur stade de développement (arrêté du 1er février 2013, art. 5). La justification attendue est technique : elle porte sur l'adéquation de l'espèce à l'objectif poursuivi. Ce que l'appartenance à une espèce autorise à faire subir à un individu est une question morale, et le formulaire ne la pose pas. L'appartenance à une espèce, prise seule, ne fonde pourtant pas de différence de statut moral entre des individus également capables de souffrir.
Spécisme et expérimentation animale · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Ce projet fait appel à un modèle murin unique qui reproduit une pathologie hémorragique rare, le déficit en FX. C’est un nouveau modèle qui a déjà montré sa pertinence en tant que modèle d’une pathologie humaine car il produit des souris viables qui atteignent l’âge adulte et dont le déficit est induit par une approche déjà validée dans la littérature et qui peut ainsi servir comme un modèle préclinique valide pour des tests de nouvelles thérapies anti-hémorragiques chez les patients avec un déficit en FX qui ne bénéficient pas à l’heure actuelle de produits spécifiques dédiés à leur pathologie. Les souris adultes seront utilisées à partir de 8-10 semaines d’âge lorsqu’elles auront atteint un poids de 18-25 gr. La durée de suivi des procédures (3-4 semaines) est alors compatible avec une fin de procédure à un âge compris entre 12 et 14 semaines. A ce stade, leur poids est tout à fait compatible avec la réalisation des expériences de saignement pour tester l’efficacité de la thérapie notamment dans la procédure de saignement de la veine saphène qui est alors clairement visible.