Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 2023-09-19 00:00:00
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-129308)
152 souris vont être utilisées dans des procédures impliquant un niveau de souffrance léger à modéré. Une partie subit une chirurgie d’implantation d’électrodes cérébrales pouvant durer près de cinq heures, puis des privations de sommeil de six heures et un isolement d’environ quarante jours, avant d’être mises à mort. Le porteur indique que la privation recourt au « gentle handling », méthode qu’il présente comme peu stressante, et que la chirurgie peut induire une douleur encadrée par des points limites. Il affirme que « l’utilisation de l’animal entier » est nécessaire pour relier signal lumineux, systèmes neuronaux et comportement.
Résumé produit par un modèle de langage à partir du seul texte du laboratoire, selon une méthode arrêtée par l’OXA. Publié sans relecture individuelle préalable, sous la responsabilité de l’association, et corrigé au fil des relectures.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
Décrire les objectifs du projet.
Note de l'OXA. Cette question est celle du formulaire européen de résumé non technique. Elle est posée au laboratoire qui demande l'autorisation, et sa réponse est écrite avant que la première procédure commence (arrêté du 1er février 2013, art. 5). Ces objectifs servent à justifier l'utilisation des animaux devant le comité d'éthique. Aucun document public ne dira ensuite s'ils ont été atteints : la directive permet aux États de faire mettre à jour le résumé avec les résultats de l'appréciation rétrospective (directive 2010/63/UE, art. 43), la base européenne prévoit de les recevoir, et aucune entrée française n'en porte (base ALURES).
Dans quel but fait-on ça ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
La pression du sommeil se caractérise par une propension à l’endormissement progressivement croissante avec le temps passé éveillé et est classiquement étudié par mesure de l’activité cérébrale pendant le sommeil qui suit une privation de sommeil. Les données récentes de la littérature suggèrent que la lumière aurait une influence importante sur le sommeil. En effet, il existe une corrélation positive entre l’intensité de lumière à laquelle les souris sont exposées pendant la privation de sommeil et l’activité cérébrale observée durant le sommeil subséquent. De plus, la nature des cellules de la rétine mises en jeu, qui permettent la conversion de l’information lumineuse en message nerveux, pourrait dépendre de l’intensité de lumière. Alors que les cellules à mélanopsine et les cônes sont particulièrement impliqués dans la transmission du signal de forte intensité, les bâtonnets transmettent l’information lumineuse à très faible intensité. La plupart des études utilise simplement une mesure de l’activité cérébrale dans les basses fréquences afin d’évaluer la pression de sommeil. Pourtant, une nouvelle distinction est faite entre deux types d’onde permettant de montrer que seules les ondes delta reflètent la pression de sommeil. Notre étude présente donc pour objectif de caractériser l’influence de la lumière sur le sommeil en utilisant cette nouvelle approche chez la souris sauvage, rongeur nocturne, et chez différents modèles de souris transgéniques présentant une invalidation de l’un des systèmes d’intégration de l’information lumineuse. Des analyses moléculaires permettront de mettre en évidence les substrasts neurobiologiques impliqués dans ces effets.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Note de l'OXA. Le formulaire européen demande les bénéfices « susceptibles de découler » du projet. Il appelle donc une projection, et il l'obtient : ce que le laboratoire écrit ici est ce qu'il espère, avant d'avoir commencé. Deux chercheuses ont repris six corpus d'études précliniques déjà menées et pesé les dommages réellement infligés aux animaux contre les bénéfices cliniques réellement obtenus : moins de 7 % de ces études ressortaient défendables (Pound et Nicol, 2018).
Est-ce « inutile » ou « nécessaire » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Cette étude permettra d’établir et de caractériser avec précision les effets de la lumière sur l’homéostat de sommeil en fonction de l’intensité lumineuse et d’identifier les mécanismes et systèmes de phototransduction impliqués. Ce projet constitue une étape importante dans la compréhension de la régulation du sommeil par la lumière. Il incitera à réaliser de nombreux travaux complémentaires dans une perspective translationnelle.
Nuisances prévues, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Note de l'OXA. La formule « en règle générale » autorise une réponse générale, et c'est l'un des points sur lesquels les examens de qualité trouvent ces documents défaillants. Un examen publié en 2018 a établi que les résumés allemands et britanniques décrivaient mal ce qui est fait aux animaux et ce que ceux-ci pourraient éprouver (Taylor et al., 2018). L'adoption d'un modèle commun européen a nettement amélioré le premier point, à peine le second (Taylor et al., 2024).
Le droit d'accès aux documents · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Une partie des animaux sera soumise à une chirurgie d’implantation d’électrodes au niveau cérébral. La chirurgie aura lieu une fois et durera moins de 5h. Tous les animaux seront soumis à une ou des privations de sommeil de 6h. Un animal pourra être soumis au maximum à 3 privations, étant chacune séparée d’au minimum 10 jours de récupération. Les animaux de la procédure 1 seront isolés de la chirurgie jusqu’à leur mise à mort, soit environ 40 jours.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Note de l'OXA. C'est l'endroit du document où les animaux devraient apparaître, et c'est celui qui résiste. Un nouvel examen, publié en 2024, a mesuré que cinq des six éléments attendus sur les dommages prévus progressaient depuis l'adoption d'un modèle commun européen. Les effets indésirables sont le sixième : 41 % des résumés allemands et 48 % des britanniques les décrivent complètement. Les auteurs relèvent aussi des effets présentés comme minimes sur des projets classés modérés ou sévères (Taylor et al., 2024). Ces mesures portent sur l'Allemagne et le Royaume-Uni. L'examen de 2018 classait la France parmi les pays les moins bons pour l'identification, l'accessibilité et la qualité de ses résumés, sans les noter rubrique par rubrique (Taylor et al., 2018). Les résumés français suivent aujourd'hui le modèle européen commun.
Les animaux souffrent-ils ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
La privation de sommeil peut engendrer du stress chez l’animal. Cependant, la méthode utilisée dite de « gentle handling » est l’une des moins stressante. De plus, les animaux auront une période de récupération d’au moins 10 jours entre deux privations. La chirurgie d’implantation des électrodes peut quant à elle induire de la douleur chez la souris. Les animaux seront suivis quotidiennement après la chirurgie, un anti-inflammatoire sera administré durant les 2 jours suivant la chirugie et les points limites sont clairement établis afin de réduire la douleur au maximum et vérifier la bonne récupération des animaux. La liaison de l’animal au système d’enregistrement par un câble peut créer une gêne. Les animaux sont ainsi habitués pendant au minimum 7 jours au dispositif d’enregistrement avant le début des expériences. Leur habituation est évaluée par la posture de l’animal ainsi que par son activité locomotrice circadienne (actimétrie) ainsi que par la qualité des signaux obtenus en électroencéphalographie. Les lignées Gnat1 et Gnat2 présentent des dificits visuels (déficit de vision en condition de faire intensité lumineuse et déficit de vision des couleurs respectivement) qui cependant n’entraînent pas d’altération du comportement des animaux au sein de leur cage, leur capacité à se déplacer dans un environnement clos reposant essentiellement sur l’olfaction et le toucher par l’utilisation des vibrisses. Aucun signe de mal-être n’a jusque là été observé chez ces deux lignées présentes au laboratoire depuis plus d’un an.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Note de l'OXA. Le formulaire demande de justifier ce sort, non de le décrire. L'analyse dommage-avantage que la directive impose au comité d'éthique porte sur « la souffrance, la douleur et l'angoisse » infligées aux animaux (directive 2010/63/UE, art. 38). Quand ce sort est la mise à mort, celle-ci ne figure donc pas parmi les dommages que le comité met en balance avec les bénéfices annoncés. L'OXA écrit « mise à mort » plutôt que « sacrifice », qui emprunte au registre du don consenti, ou « euthanasie », qui désigne une mort décidée dans l'intérêt de celui qui meurt.
Peut-on parler d'éthique en expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Tous les animaux de la procédure 2 sont soumis à la procédure 1 ou 3, hormis les 8 animaux géniteurs. Tous les animaux des procédures 1 et 3 sont mis à mort en fin de procédure
Application de la règle des "3R", selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
1. Remplacement
Note de l'OXA. La directive demande au résumé « une démonstration de la conformité » aux exigences de remplacement, de réduction et de raffinement (directive 2010/63/UE, art. 43). C'est donc le demandeur qui démontre sa propre conformité, dans le document même qui sollicite l'autorisation. Cette démonstration peut prendre la forme d'une affirmation qu'aucune méthode de substitution n'existe, que le document n'a pas à sourcer. Ces trois exigences sont par ailleurs subordonnées à l'objectif du projet : elles cherchent à remplacer les animaux dans un projet donné, elles n'interrogent pas ce projet.
Comment avancer vers la fin de l'expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
L’utilisation de l’animal entier est nécessaire au vu de la question posée impliquant des systèmes biologiques divers et complexes allant de la rétine, avec l’intégration du signal lumineux, au comportement de l’animal en passant par des systèmes neuronaux complexes.
2. Réduction
Note de l'OXA. La réduction dont il est question ici porte sur le nombre d'animaux par groupe expérimental, calculé pour que l'analyse statistique tienne. Le total annoncé dans la fiche est une estimation portant sur une autorisation de cinq ans au maximum (code rural, art. R214-123) : il ne dit pas combien d'animaux seront effectivement utilisés, et il ne se rapporte pas à une année.
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Le nombre d’animaux à inclure est calculé pour un risque de première espèce de 5 % avec des effectifs identiques dans les différents groupes, compte tenu des moyennes et déviations standards obtenus dans nos travaux antérieurs. Afin d’optimiser le nombre d’animaux, les enregistrements seront effectués chez des souris exposées aux 3 intensités de lumière de façon consécutive en respectant un temps minimal entre chaque privation afin d’obtenir une récupération complète de l’architecture naturelle du sommeil. Nous évaluons à 10 le nombre d’animaux nécessaires pour l’analyse des signaux (ANOVA à mesures répétées avec pour facteur indépendant les différentes lignées et pour facteur répété l’intensité de lumière). Nous prévoyons donc un effectif de n=15 / génotype, certains signaux ne pouvant être utilisés en raison d’un positionnement inexact des électrodes (le ratio d’1/3 nous a été communiqué par l’équipe de Paris qui utilise cette technique en routine). Concernant les analyses moléculaires, un n=7 / génotype est approprié afin de pouvoir comparer les effets des différentes intensités de lumière en fonction des génotypes (ANOVA à 2 facteurs).
3. Raffinement
Note de l'OXA. Le raffinement nomme une amélioration technique de la procédure, sans dire ce qu'elle change pour l'animal qui la subit. La réglementation impose d'atténuer la douleur, dans une limite qu'elle inscrit elle-même : « pour autant que cela soit compatible avec la finalité de la procédure expérimentale » (code rural, art. R214-109). Ce qui reste de souffrance après cette limite est autorisé. Le raffinement ne porte par ailleurs que sur la procédure : les souffrances de la captivité elle-même, confinement, bruit, lumière, manipulations d'entretien, ne relèvent d'aucun des trois R.
La réglementation est-elle « très stricte » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Dans le cadre du raffinement des conditions d’hébergement, les animaux sont maintenus en groupe sociaux jusqu’à l’expérience (chirurgie pour le groupe 1, privation pour les groupes 2 et 3), un enrichissement est réalisé par l’ajout de nids. D’autres enrichissements tels que tubes, maisons ou balancettes ne peuvent être utilisés car empêcheraient l’exposition des animaux à la lumière et donc fausseraient les résultats du projet. La chirurgie est effectuée sours anesthésie générale (Zoletil 50 (40 mg/kg) / Paxman (10 mg/kg)). Un traitement sous-cutané de Metacam® (2 mg/kg; 5ml/kg) est effectué avant, puis durant les 3 jours suivant la chirurgie. Une grille de suivi des animaux est remplie, évaluant l’état général (apparences générale, comportement spontané et provoqué, poids) des animaux ainsi que l’apparence de la plaie à raison de 4 évaluations minimum sur une période de 7 jours suivant la chirurgie (annexe 1 – score entre 0 et 17). L’état général est ensuite surveillé au minimum une fois par semaine en suivant les mêmes critères. Points limites : – Score entre 5 et 9 « légère détresse » : surveillance attentive (1x/j), mise en place éventuelle d’analgésiques sous avis vétérinaire – Score entre 10 et 13 « détresse » : mise en place d’analgésie pour soulagement immédiat, surveillance 2x/j durant 24h. Points d’arrêt : 1. Si le poids est inférieur à 80% du poids de départ (avant chirurgie) pendant 48 heures 2. Si, après l’anesthésie, il n’y a pas de fèces et des signes d’abdomen gonflé pendant 48 heures; 3. Si l’animal présente une vocalisation spontanée ou une automutilation; 4. Si un score de 10-13 persiste pendant 24 heures sans amélioration; 5. Si un score de 14-17 est calculé. 6. En cas de détachement du « chapeau » (=puce électronique + ciment dentaire) de la boîte crânienne (jamais observé durant ces dernières années).
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Note de l'OXA. Le dossier d'autorisation demande de justifier l'origine des animaux, leur espèce, leur nombre estimé et leur stade de développement (arrêté du 1er février 2013, art. 5). La justification attendue est technique : elle porte sur l'adéquation de l'espèce à l'objectif poursuivi. Ce que l'appartenance à une espèce autorise à faire subir à un individu est une question morale, et le formulaire ne la pose pas. L'appartenance à une espèce, prise seule, ne fonde pourtant pas de différence de statut moral entre des individus également capables de souffrir.
Spécisme et expérimentation animale · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Grâce à différents modèles de souris transgéniques avec inactivation des différentes voies de phototransduction et de photointégration, nous pouvons évaluer l’effet spécifique de chacun de ces voies sur le comportement. Notre étude sera effectuée chez l’adulte jeune. L’étude repose sur l’exploration des comportements et nécessite que les systèmes neurobiologiques soient totalement mâtures (développement total des systèmes visuels et non visuels, des systèmes circadiens et homéostasiques et des structures cérébrales cibles).