Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 23/11/2023
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-036875)
112 souris vont être utilisées, toutes tuées à l’issue, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance sévère. On leur provoque un infarctus du myocarde par deux techniques présentées comme moins invasives, puis on suit leur cœur par échographie, pour réduire la variabilité des modèles chirurgicaux existants. Le porteur indique que la douleur liée à l’infarctus est maximale pendant vingt-quatre heures et qu’un analgésique est alors administré. Les bénéfices annoncés, des thérapies plus efficaces contre l’infarctus chez l’humain, restent à démontrer.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Malgré les progrès des traitements interventionnels et pharmacologiques des infarctus du myocarde (lorsqu’une artère coronaire irriguant la paroi cardiaque se bouche), les cardiopathies qui en résultent restent la principale cause de décès dans le monde. Il y a donc nécessité à continuer la recherche dans ce domaine pour optimiser les traitements et sauver des vies. Étant donné la complexité du cœur qui assure une fonction de pompe pour le système circulatoire qui s’adapte à la demande de l’organismes et la pression artérielle et dont la régulation du rythme est contrôlée par un système neuro-hormonal complexe, les modèles animaux sont indispensables pour cette recherche, aucun système in vitro ne pouvant reproduire cette complexité. Le modèle rongeur est le plus utilisé. Le modèle actuel est basé sur la technique chirurgicale sous anesthésie qui induit un infarctus du myocarde. De multiples variables affaiblissent le pouvoir translationnel de la méthode. Bien que de nombreuses tentatives aient été faites pour améliorer cette technique en réduisant au minimum la taille de l’incision, la variabilité dans un même groupe d’animaux et entre différents groupes est restée significativement élevée. Cette incohérence est probablement attribuée aux détails techniques de la procédure chirurgicale, ce qui entraîne une diminution de l’efficacité et un manque de reproductibilité des résultats. L’étude présente vise à produire deux modèles non invasifs. Ces deux méthodes utiliseront des souris de type sauvage.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
L’objectif principal de ce projet est de développer des techniques innovantes et transposables à l’homme pour étudier le remodelage indésirable du tissu du cœur après infarctus. Ce projet améliorera les méthodes conventionnelles en améliorant la qualité de la chirurgie effectuée pour induire un infarctus en limitant l’intubation, les saignements, la taille de la plaie, l’inflammation et d’autres facteurs. Les techniques proposées réduiront considérablement la variabilité dans un seul groupe d’animaux et favoriseront des résultats plus applicable à la situation clinique chez l’homme ou la femme. Ces techniques moins invasives aideront les scientifiques à développer des thérapies efficaces pour l’infarctus du myocarde.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
L’électraucotérisation : 22 souris SHAM et 22 opérées; durée de l’opération 10 minutes. La magnétisation de nanoparticules: 34 SHAM et 34 opéréés; durée de l’opération 30 minutes. Procédure d’échocardiographie: pour tous les animaux; analyses réalisées en 30 minutes en moyenne.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
L’infarctus du myocarde peut entrainer plusieurs effets indésirables chez la souris. La douleur attribuable à l’infarctus du myocarde est maximale jusqu’à 24 h chez la souris. De plus du fait de l’opération les souris peuvent avoir une difficulté à l’accès à la nourriture ce qui pourrait entrainer une perte de poids. Au moment de l’échographie les yeux des souris peuvent subir une légère déshydratation.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Tous les animaux sont euthanasiés en fin de procédure afin récupérer les différents tissus pour des analyses de biologie moléculaire et biochimiques ultérieures.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Le recours à des animaux se justifie par la nécessité d’étudier la fonction cardiaque dans un contexte physiopathologique complexe et multifactoriel impliquant une circulation sanguine. L’utilisation d’animaux se justifie également par l’incapacité d’obtenir une lignée cellulaire stable de cardiomyocytes.
2. Réduction
Afin de limiter au maximum le nombre d’animaux par groupe une analyse statistique poussée a été réalisée. Le calcul du nombre d’animaux nécessaires pour pouvoir conclure définitivement sur les résultats, est très important car il serait aussi grave de limiter de façon excessive le nombre d’animaux à inclure que d’en inclure un trop grand nombre. Utiliser des animaux pour une expérience qui ne sera pas conclusive par manque d’animaux et donc par manque de puissance statistique est aussi grave qu’en utiliser trop. Pour rentabiliser l’utilisation des animaux à des fins expérimentales, les organes sont prélevés, partagés et congelés pour des expériences de biochimie et de biologie moléculaire ultérieures.
3. Raffinement
L’opération chirurgicale est induite en respectant au maximum les procédures du bien-être animal et en limitant la souffrance par le respect des méthodes anesthésiques et analgésiques. Après l’échographie l’animal est placé dans une cage propre sous lampe chauffante. Après son réveil complet (environ 10 minutes), il est remis dans sa cage. La douleur propre à l’infarctus étant observé 24 h après opération les souris seront traitées avec un analgésique au cours de cette période. Les yeux sont protégés du dessèchement par un onguent ophtalmique et de la lumière par une compresse humidifiée. Pour faciliter l’accès à la nourriture des boites de gels ou une litière surélevée seront mises en place afin que les souris ne perdent pas trop de poids.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Le protocole d’éléctrocoagulation de l’artère coronaire a été publié originalement sur la souris et requiert en effet une sonde ultrasonore de haute fréquence pour la visualisation qui est adaptée à la souris plutôt qu’au rat. Les souris seront opérées à l’âge de 1 ou 2 mois pour avoir la taille minimum pour procéder à la ligature de la coronaire.