Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 2024-10-22 00:00:00
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-705293)
29 300 souris vont être utilisées dans ce projet sur le métabolisme des sucres, 19 300 dans des procédures impliquant un niveau de souffrance léger et 10 000 un niveau modéré. Chacune subit une biopsie de la queue à six jours pour le génotypage, jusqu’à douze semaines de régime hyperlipidique, des injections pouvant être quotidiennes et des prises de sang hebdomadaires. Le porteur retient vingt animaux par groupe expérimental, dont dix ajoutés pour fournir assez de cellules de foie et de pancréas après la mise à mort. La plupart seront tuées pour récupérer leurs tissus, certaines gardées pour la reproduction, d’autres mises à mort simplement parce qu’elles n’ont pas le génotype recherché.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Le foie et le pancréas sont en étroite relation via un mécanisme complexe de signaux inter- organes. Des régulateurs clés travaillent de façon synergique dans le foie et pancréas de rongeurs. Cela est moins connu chez l’homme. Les îlots pancréatiques jouent un rôle central dans l’homéostasie du glucose et il est important de savoir comment ces facteurs régulent les secrétions hormonales. Les mutations de ces mêmes facteurs entrainent des diabètes. Ces facteurs régulent des protéines impliquées dans le transport du glucose . Ceux-ci sont également impliqués dans la secrétion d’insuline qui s’altère avec l’âge. Les mécanismes d’action semblent complexes et des études complémentaires sont nécessaires pour comprendre les rôles de ces facteurs dans le la production du glucose, sa réabsorption, son élimination. Notre hypothèse est que les cellules du pancréas possèdent un mécanisme intrinsèque de production d’hormone spécifiquement édié par ces facteurs clés. De fait, nous voudrions tester l’impact de leur expression ou leur délétion. Pour accomplir cela, nous utiliserons 2 approches. L’une utilisant du tissu humain primaire afin de caractériser leur fonction et l’autre nécessitera l’utilisation d’animaux afin d’identifier/caractériser leur physiologie et leur impact sur la pathologie.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Les bénéfices majeurs de ce projet seront la compréhension de l’implication de certains gènes importants dans la physiologie de la maladie métabolique (diabète). De plus, il pourra montré l’intérêt de molécules dites anti-diabètiques dans le cadre de diabètes caractérisés génétiquement.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Les animaux seront soumis à : 1/ une biopsie à l’age de 6 jours (à la queue) pour déterminer leur profil génétique, 2/ des régimes hyperlipidiques pendant 12 semaines, 3/ des injections quotidiennes au maximum (respectant les volumes maximum), 4/ ainsi qu’à des prélèvements sanguins hebdomadaires (respectant les volumes).
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Le projet incluant des animaux génétiquement modifiés pour certains gènes pouvant induire un diabète plus ou moins avancé, ou une prédisposition au diabète. Il est possible que ces animaux nécessitent plus de soins (exemple: change plus régulier en cas d’urine abondante, traitement du diabète par implantation sous cutané de patch d’insuline (fait par injection simple). Aussi, des nuisances légéres et brèves pourront accompagner les prélèvements sanguins et la biopsie à la queue (traitées aux antidouleurs). Enfin l’administration de composés n’engendrant que des douleurs dues à l’injection elle-même.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Les animaux seront mis à mort en fin de projet afin d’en recupérer les tissus et cellules et continuer les études ex-vivo. Certains animaux seront conservés pour la reproduction et maintien de lignée. D’autres seront mis à mort sont mis à mort car ils n’ont pas le génotype d’intérêt pour le porjet.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
En parallèle de l’étude sur les animaux, des études seront menées sur des cellules humaines en culture et sur sections histologiques de tissus humains et murins. Cependant, afin d’étudier l’impact sur la physiologie d’un organisme entier, le recours à l’animal s’avère nécessaire.
2. Réduction
Le nombre d’animaux par groupe a été réduit à son minimum pour obtenir des conclusions statisquement satisfaisantes. En nous fixant un niveau de confiance de 95%, une puissance statistique supérieure à 80% et « effect size » à 40, il faut au minimum 9 animaux par groupe pour mettre en évidence une différence statistique significative entre les groupes. Le choix est donc orienté sur 10 animaux par groupe, cependant, après mise à mort, nous devrons récupérer des cellules de foie et de pancréas nécessitant un nombre supplémentaire d’animaux. Nous nous orientons donc vers 20 animaux par groupe. Les tests statistiques adéquats seront utilisés pour obtenir les résultats les plus robustes possibles.
3. Raffinement
Les manipulations seront effectuées par du personnel formé. Si un mal-être est percu (plaies physiques), un traitement pour douleur locale sera pratiqué, ainsi que pour des douleurs plus globales avec un traitement morphinique. En cas de mauvaise prise alimentaire confirmée par perte de poids, une cupule de nourriture gélifiée pourra être ajoutée, et les risques de mal-occlusion seront vérifiés. Afin de nous aiguiller quant à nos actions en faveur du bien-être, un arbre décisionnel des points limites a été élaboré spécifiquement pour ce projet avec gradation des actions. Les conditions d’hébergement seront favorables à l’épanouissment des animaux avec la mise en place d’un enrichissement varié (tunnel, matériel de nidification et des batonnets à ronger).
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
La souris est le meilleur modèle proposé actuellement quant aux possiblités d’études et modifications génétiques. Il existe tous les outils (anticorps, kits de dosages, animalerie) pour mener une étude facilité sur cet animal. Les animaux seront étudiés à l’age adulte, pour qu’il n’y ait pas d’influence de la maturation sexuelle (puberté) et que les cycles hormonaux soient bien établis.