Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 18/03/2025
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-022541)
Douze mesures de température par sonde rectale et dix injections intrapéritonéales dans une procédure, vingt-deux injections et vingt-deux pesées dans l’autre. 90 souris vont être utilisées, toutes tuées à l’issue, dont 40 dans des procédures impliquant un niveau de souffrance sévère. Rendues obèses par onze semaines d’un régime dont 60 % des calories viennent des graisses, elles sont hébergées seules et passent deux sessions de 48 heures en mesure de dépenses énergétiques. Le porteur relève que leur obésité réduit leur capacité de mouvement et que le jeûne de quatre heures imposé avant les prises de sang provoque une sensation de faim. L’étude teste la toxicité et l’efficacité d’un candidat médicament pour le compte d’un client, et se limite aux mâles pour ne pas doubler les effectifs.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
L’obésité dans le monde a presque triplé depuis 1975, pour atteindre plus de 650 millions de personnes obèses en 2016, selon l’OMS. L’obésité est alors considérée comme un fardeau de santé publique, pour lequel une variété de thérapeutiques, de procédures chirurgicales et de dispositifs médicaux sont actuellement à l’étude. Le présent projet est relatif à une étude menée à un stade précoce du développement d’un candidat médicament de notre client et vise à tester sa potentielle toxicité et son efficacité anti-obésité chez la souris rendue obèse par une alimentation enrichie en graisses. Le projet devra permettre de montrer l’innocuité et l’impact d’un traitement chronique du candidat médicament sur l’appétit, les dépenses énergétiques et, en conséquence, sur le poids corporel du modèle d’obésité.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Ce projet s’inscrit dans le cadre du développement d’un composé anti-obésité visant l’humain. Alors que plusieurs molécules anti-obésité ont été autorisées ces vingt dernières années, un grand nombre d’entre elles se sont vues retirées du marché en raison d’effets secondaires graves. Seules 3 spécialités sont actuellement approuvées en Europe pour des traitements de longue durée du surpoids et de l’obésité, mais leur efficacité s’avère néanmoins très limitée. L’obésité est donc une pathologie présentant un besoin médical important sur le plan thérapeutique. Si l’issue du projet s’avère favorable, le développement dans lequel s’engage notre client pourrait aboutir à la mise sur le marché d’une nouvelle molécule anti-obésité.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Procédure 1 : Les animaux seront soumis aux interventions suivantes: 1) Manipulations par les expérimentateurs pour des mesures de poids corporel (8 mesures au cours de la procédure 1; durée de la mesure : 1 minute); 2) Administration de placébo, du composé X ou du composé de référence par voie intrapéritonéale (10 administrations; durée de l’administration : 1 minute); 3) Analyse non invasive de composition corporelle (1 mesure; durée de la mesure: 2 minutes); 4) Mesures de température corporelle par sonde rectale (12 mesures; durée de la mesure : 1 minute); 5) Anesthésie générale avant euthanasie et prélèvement de sang et d’organes (durée: 10 minutes). Procédure 2 : Les animaux seront soumis aux interventions suivantes: 1) Manipulations par les expérimentateurs pour des mesures de poids corporel (22 mesures au cours de la procédure 1; durée de la mesure : 1 minute); 2) Administration de véhicule, du composé X ou du composé de référence par voie intrapéritonéale (22 administrations; durée de l’administration : 1 minute); 3) Analyse non invasive de composition corporelle (2 mesures; durée de la mesure: 2 minutes); 4) Mesures de dépenses énergétiques (2 sessions de mesures de 48h); 5) Anesthésie générale avant euthanasie (durée: 10 minutes).
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Les mesures de poids corporel et autres manipulations ainsi que les mesures de composition corporelle et le placement en boite de contention lors des prélèvements sanguins pourront être source de stress du fait d’une entrave aux mouvements de courte durée. Les traitements intrapéritonéaux et sous-cutanés, ainsi que les prélèvements sanguins seront source de douleurs légères et de stress. La mise à jeun de 4h préalable aux prélèvements sanguins, bien que réalisée en phase diurne, pourra induire une sensation de faim. Enfin, le caractère obèse des souris sera source d’inconfort en réduisant légèrement leur capacité de mouvement.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
L’ensemble des animaux seront euthanasiés à l’issue de l’étude. Des prélèvements d’organes sont prévus après euthanasie pour analyses ultèrieures.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
L’utilisation d’animaux à des fins scientifiques se justifie ici car il n’existe aucune méthode de substitution n’utilisant pas l’animal de laboratoire et permettant l’étude de l’impact d’un composé sur le poids corporel, la composition corporelle, la prise alimentaire et les autres paramètres altérés dans le cadre des troubles métaboliques. Par ailleurs, bien que le composé testé ait fait l’objet de plusieurs études réalisées in vitro dans les premières phases de son développement, l’étude in vivo reste une étape règlementaire incontournable pour la constitution d’un dossier de demande de premières études sur l’homme (passage aux études cliniques).
2. Réduction
Les nombres de 8 animaux par groupe pour la procédure 1 et de 10 animaux par groupe pour la procédure 2 ont été rationalisés à partir de l’expérience acquise par notre laboratoire sur le modèle de souris obèse et l’analyse des paramètres d’intérêt de l’étude. Ainsi, le nombre d’animaux par groupe a été rationalisé de façon à être en mesure de mettre en évidence une différence statistiquement significative sur les paramètres étudiés. Par ailleurs, compte tenu du fait que l’étude se positionne à un stade précoce du développement du candidat médicament, cette dernière sera limitée au genre mâle. La grande hétérogénéité du paramètre étudiés (notamment le poids corporel, la prise alimentaire et les dépenses énergétiques) entre mâle et femelle imposerait en effet de doubler les effectifs de chaque groupe pour étudier l’impact du composé sur les deux genres. Dans la suite du développement du candidat médicament, et uniquement dans le cas où une efficacité aura été observée chez le mâle, une seconde étude sera menée chez la souris femelle afin de s’assurer de son efficacité sur les deux genres.
3. Raffinement
Le protocole a été planifié de façon à limiter au maximum le stress et l’inconfort des animaux sans compromettre les objectifs de l’étude. Les traitements par voie orale seront administrés par des expérimentateurs rodés à ce type de pratique. Les animaux seront hébergés en cages individuelles mais un contact visuel et olfactif entre congénères sera maintenu. Par ailleurs, une attention particulière sera maintenue sur l’enrichissement des cages qui sera assuré par l’ajout d’igloos, de matériels de nidification et de briquettes en bois spécialement conçues pour le rongeur, avec une rotation de leur présence dans la cage (a minima 2 matériels d’enrichissement présents dans la cage) afin de conserver un effet de nouveauté. Enfin, un suivi journalier des animaux à l’aide d’une grille de score permettra une action rapide en cas d’atteinte des points limites établis. Ces actions incluent, entre autres, une surveillance renforcée (2 visites par jour) et l’emploi d’analgésiques en cas de douleur avérée.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Le modèle de souris nourries avec une alimentation enrichie en graisses (avec 60% de l’apport calorique provenant des graisses) est un des modèles de souris les plus classiquement utilisés et les mieux documenté dans le cadre d’études précliniques menées dans le contexte des troubles métaboliques. Les animaux seront utilisés au stade adulte de 17 semaines (20 à 22 semaines à l’issue de l’étude). Le choix de ce stade de développement est guidé par la population humaine ciblée par les composés testés, à savoir une population adulte et tient compte d’une période de 11 semaines de régime enrichi en graisse chez le fournisseur.