Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 19/09/2023
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-237447)
360 rongeurs, souris et rats, vont être utilisés, tous tués à l’issue, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance sévère pour 160 d’entre eux. Une partie subit la ligature d’une artère du cœur, une autre l’ablation d’un rein, avant des examens d’IRM, pour tester si l’inhibition d’une enzyme protège des maladies cardiovasculaires. Le porteur indique que les animaux hypertendus risquent l’accident vasculaire cérébral et l’insuffisance cardiaque ou rénale. Il présente le projet comme validé par l’Inserm et financé par l’ANR, les animaux étant tués pour analyser leurs artères et prélever leurs organes.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Il s’agit d’un projet s’inscrivant dans le domaine de la recherche publique préclinique. L’objectif central du projet de recherche expérimentale est de répondre pour la fois à la question : l’inhibition de la sEH phosphatase peut-elle constituer une nouvelle approche thérapeutique pour la prévention et/ou le traitement des maladies cardiovasculaires ? Ce programme de recherche a été validé scientifiquement par l’Inserm (CSS4), ainsi que par des experts internationaux sollicités. Il sera financé par l’ANR.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Le but ultime de cette recherche est de pouvoir démontrer pour la première fois que la sEH phosphatase constitue une cible thérapeutique d’intérêt pour prévenir et/ou traiter les maladies cardiovasculaires et nous espérons que cette recherche permettra la mise en place d’une nouvelle classe de traitements.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
le but de cette étude est un modèle d’hypertension artérielle et d’insuffisance rénale. La procédure N°1 chirurgicale , concernant le modèle de ligature coronaire comprends un nombre de 66 souris et 84 rats La procédure N°2 chirurgicale , concernant le modèle de Néphrectomie comprends également un nombre de 66 souris et 84 rats. Les animaux restant ne subissent aucune chirurgie mais un traitement, concernant le diabete. Tous l’ensemble des animaux, c’est à dire 192 souris et 168 rats auront un IRM standart.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Concernant le groupe de la procédure N°1 sur l’Hypertension Artérielle, ces animaux seront hypertendus; il y a donc des riques d’AVC et les animaux vont développer une insufisance cardiaque, d’ou une surveillance et un contrôle particulier quotidien, cela n’engendre pas de réponse d’un point de vue comportemenatale. Les animaux de la procédure N°2, sur le modèle d’insufisance rénale, auront egalement un facteur risque d’AVC , ils peuvent aussi développer une insufisance cardiaque. cette pathologie n’engendre pas de signe comportementaux, la surveilance quotidienne est absolument indisprensable.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Tous les animaux seront mis à mort pour l’étude de la fonction vasculaire del’artère mésentérique par artériographie et les prélèvements sanguins, ainsi que les différents organes qui serviront aux analyses anatomiques et moléculaires, seront prélevés.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Les expériences in vivo ne peuvent pas être remplacées pour la bonne réussite de ce projet. En effet, ce projet se propose d’étudier les effets cardiovasculaires de l’inhibition d’une enzyme dans des conditions de physiopathologie intégrées, autrement dit, chez des rats et des souris avec une hypertension artérielle, une insuffisance rénale ou un diabète induits expérimentalement. L’utilisation de cellules ou de modèles expérimentaux ex vivo est par conséquent inadéquate pour répondre de façon pertinente aux questions posées dans le cadre de ce travail. Ainsi, les procédures expérimentales ont un caractère de stricte nécessité et ne peuvent pas être remplacées par d’autres méthodes expérimentales n’impliquant pas l’utilisation d’animaux vivants et susceptibles d’apporter le même niveau d’information.
2. Réduction
réduire le nombre d’animaux par l’utilisation de méthodes non invasives (IRM, échocardiographie) permettant de répéter les analyses sur le même animal au cours de la maladie. De plus, nous avons réalisé des tests statistiques appropriés pour calculer le nombre de souris et de rats nécessaire afin de détecter une différence de 15% (one way ANOVA et test de Tukey).
3. Raffinement
raffiner les modèles afin de réduire la variabilité entres animaux permettant de limiter le nombre d’animaux par groupe : utilisation de régimes alimentaires pour potentialiser le développement de l’atteinte rénale ou des complications cardiovasculaires. De plus, les animaux seront hébergés aux normes requises et un enrichissement (plaques de cellulose vierge et des maisons en carton) est mis en place. Enfin, une anesthésie et une analgésie adéquates seront mises en place pour chaque animal en fonction de chaque type de procédure. Si les animaux arrivent aux points limites, les animaux recevront une injection d’un euthanasiant.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Le choix du rat et de la souris se justifie par l’expérience du laboratoire et sur la possibilité de recourir aux animaux transgéniques (rat KI pour la sEH phosphatase) pour approfondir les résultats de la recherche. Les opérations chirurgicales et les mises sous régime seront effectuées sur les souris entre 6 et 8 semaines de vie et sur les rats entre 10 à 12 semaines de vie. Les animaux seront immédiatement traités avec l’agent thérapeutique inhibiteur de la sEH phosphatase (SWE101 administré dans l’eau de boisson : 40 mg/L pour les modèles d’hypertension artérielle et de diabète ou anticorps administré par voie intrapéritonéale pour le modèle d’insuffisance rénale, la dose d’anticorps sera ajustée en fonction des données d’inhibition obtenues in vitro sur la sEH recombinante murine) . Concernant le modèle d’hypertension artérielle et le modèle d’insuffisance rénale, le recueil des urines puis les mesures invasives de la pression artérielle seront réalisées 10 semaines après l’opération, l’imagerie fonctionnelle in vivo 10 à 12 semaines après l’opération et la mise à mort 12 semaines après l’opération. Concernant le modèle de diabète, le recueil des urines puis les mesures invasives de la pression artérielle seront réalisées 14 semaines après le début du régime riche en graisses saturées, l’imagerie fonctionnelle in vivo 14 à 16 semaines après le début du régime et la mise à mort 16 semaines après le début du régime.