Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 30/04/2025
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-480801)
Trois candidats médicaments contre l’athérosclérose, développés par un client du laboratoire, sont testés sur des souris privées du gène de l’apolipoprotéine E, donc portées à former spontanément des plaques d’athérome. 60 souris vont être utilisées dans des procédures impliquant un niveau de souffrance modéré, toutes tuées à l’issue. Nourries pendant douze semaines avec une alimentation dont 40 % de l’énergie vient des graisses, elles reçoivent vingt-six injections dans l’abdomen, subissent quatorze pesées et trois prélèvements de sang à la queue, puis une anesthésie terminale avant le prélèvement de l’aorte et du cœur. Le porteur justifie le recours aux souris par l’absence de toute méthode de substitution permettant d’étudier la formation des plaques, et situe le bénéfice attendu dans l’aboutissement possible du développement engagé par son client, jusqu’à une mise sur le marché.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
L’athérosclérose est un phénomène caractérisé par la formation de plaques d’athérome, constituées de lipides, sur la paroi des artères, induisant un durcissement et une perte d’élasticité de ces dernières. L’athérosclérose constitue un facteur de risque cardiovasculaire majeur. En effet, la rupture des plaques d’athérome peut conduire à une mauvaise oxygénation des organes, notamment le cerveau et le coeur et favoriser la survenue de complications graves telles que l’infarctus du myocarde ou des accidents vasculaires cérébraux. Ainsi, du fait de ces complications, et malgré l’existence de traitements ralentissant son évolution, l’athérosclérose demeure l’une des principales causes de mortalité dans le monde. Le développement de médicaments permettant un meilleur contrôle du développement de l’athérosclérose fait ainsi l’objet d’intenses recherches par les laboratoires pharmaceutiques. Le présent projet vise à tester l’efficacité d’une série de 3 candidats médicaments sur le développement des plaques d’athérome chez un modèle de souris développant spontanément de l’athérosclérose, notamment lorsque ce dernier est soumis à une alimentation enrichie en graisses (40% de l’énergie apportée par les graisses). Les candidats médicaments seront administrés 2 fois par semaine par voie intrapéritonéale pendant 12 semaines. L’effet de ces traitements sera observé au niveau de l’aorte à l’issue de l’étude.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Ce projet s’inscrit dans le cadre du développement de composés visant à prévenir et traiter l’athérosclérose. Cette pathologie reste l’une des causes prinicipales de mortalité dans le monde, il existe un besoin important sur le plan thérapeutique. Si l’issue du projet s’avère favorable, le développemlent dans lequel s’engage notre client pourrait aboutir, à terme, à la mise sur le marché d’un nouveau médicament.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Les animaux seront soumis aux interventions suivantes: 1) Manipulations par les expérimentateurs pour des mesures de poids corporel (14 mesures au cours de l’étude; durée de la mesure : 1 minute); 2) Administration de placébo ou du candidat médicament par voie intrapéritonéale 2 fois par semaine (26 administrations; durée de l’administration : 1 minute); 3) à trois prélèvements sanguins pratiqués à la veine de la queue (durée: 5 minute/prélèvement); 4) à une anesthésie pour administration IV d’une sonde fluorescente (durée : 10 minute) – 5) à une anesthésies terminale avant euthanasie (durée : 10 minute).
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
En termes de nuisances, les animaux seront soumis à du stress du fait des manipulation lors des pesées régulières de poids corporel ou des injections intrapéritonéales ou intraveineuses. Par ailleurs les animaux seront soumis à des douleurs aiguës lors des administration intrapéritonéales, et des prélèvements sanguins.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
L’ensemble des animaux seront euthanasiés à l’issue de l’étude. Des prélèvements d’organes (tronc aortique, coeur) sont prévus après euthanasie afin d’observer la progression des plaques d’athérome chez les différents groupes traités, et de réaliser des dosages biochimiques.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
L’utilisation d’animaux à des fins scientifiques se justifie ici car il n’existe aucune méthode de substitution n’utilisant pas l’animal de laboratoire et permettant l’étude de l’impact d’un composé sur la formation et le développement des plaques d’athérome.
2. Réduction
Le nombre d’animaux utilisés a été calculé et rationalisé à partir de l’expérience acquise par notre laboratoire sur l’analyse des paramètres d’intérêt mesurés sur le modèle de souris utilisé, soumis à une alimentation enrichie en graisses. Ainsi, le nombre d’animaux par groupe a été adapté en fonction des paramètres d’intérêt de façon à être en mesure de mettre en évidence une différence statistiquement significative sur les paramètres étudiés. Les données seront analysées par des tests statistiques appropriés.
3. Raffinement
Le protocole a été planifié de façon à limiter au maximum tout stress et tout inconfort pour les animaux. Les traitements par voie intrapéritonéale seront administrés par des expérimentateurs formés et expérimentés pour ce type de pratique. Les animaux seront hébergés en cages collectives (3 animaux par cage) afin de satisfaire leurs besoins sociaux. Un enrichissement des cages sera assuré par l’ajout d’igloos, de matériels de nidification et de briquettes en bois spécialement conçues pour le rongeur. Les prélèvements sanguins prévus seront limités au volume minimum nécessaire aux dosages ultérieurs et une crème analgésiante sera appliquée sur la queue 30 minutes avant les prélèvements. L’administration intraveineuse de la sonde fluorescente sera pratiquée en rétro-orbital sur animal anesthésié. Enfin, un suivi journalier des animaux à l’aide d’une grille de score permettra une action rapide en cas d’atteinte des points limites établis. Ces actions incluent notamment une surveillance renforcée et l’emploi d’analgésiques.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
La souris ApoE est un modèle génétique présentant une mutation qui rend silencieux le gène codant pour l’apolipoprotéine E, une protéine constitutive des lipoprotéines, structures chargées du transport des triglycérides et du cholestérol dans le sang. Cette mutation induit chez ces souris une propension à développer spontanément des plaques d’athérome, en faisant un modèle de choix pour les études précliniques. Les animaux seront utilisés au stade adulte. Le choix de ce stade de développement est guidé par la population humaine ciblée par les composés testés, à savoir une population adulte.