Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 12/03/2025
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-530044)
Jusqu’à huit séjours de six heures en cage métabolique individuelle pour recueillir les urines, une injection rétro-orbitaire par jour pendant trois jours et une injection intrapéritonéale par jour pendant dix jours : 1 000 souris vont être utilisées dans ce projet sur les maladies rénales chroniques. 672 d’entre elles subissent des procédures d’un niveau de souffrance modéré et 328 un niveau léger, toutes étant tuées pour le prélèvement des reins. Le porteur reconnaît que les signes de mal-être liés à l’insuffisance rénale provoquée par les traitements sont difficiles à détecter autrement que par une altération du comportement et la présence de sang dans les urines. L’effectif de 1 000 souris est présenté comme le produit d’un plan expérimental donnant la puissance statistique voulue, sans qu’aucun chiffre intermédiaire ne vienne l’étayer.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Les maladies rénales chroniques représentent un véritable enjeu de santé publique. Tout particulièrement, les glomérules ont une importance capitale car ils représentent le siège de la filtration du plasma sanguin. Les options thérapeutiques restent limitées, et aucune stratégie thérapeutique n’a été approuvée pour les principales causes de ces maladies. L’objectif principal de ce projet est donc d’identifier le rôle d’une protéine que nous avons récemment identifié dans le développement et progression de certaines formes sévères de maladie rénales chroniques.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
A terme, ces travaux permettront une meilleure compréhension du rôle de cette nouvelle protéine dans le contexte des maladies rénales. Il est essentiel de mieux comprendre le rôle physiopathologique de molécules d’intérêt pour proposer de nouvelles stratégies thérapeutiques adaptées pour les maladies rénales sévères.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Un prélèvement d’un morceau de queue
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Les effets indésirables liés à l’expérimentation : inconfort lié à la préhension, douleur de courte durée lors de la biopsie de queue pour le génotypage (< 2mm), douleur de courte durée au point d’injection et stress lié aux cages métaboliques. Les signes de mal-être résultant de l'insuffisance rénale provoquée par les traitements sont difficiles à détecter autrement que par l'altération du comportement et l'hématurie.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Tous les animaux du projet seront mis à mort afin de prélever les organes et analyser les reins.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Nous utilisons différentes approches pour identifier les mécanismes physiopathologiques des maladies rénales incluant les cultures cellulaires (in vitro). Cependant, les expériences in vitro ne peuvent pas reproduire la complexité des mécanismes mis en jeu dans le développement de l’insuffisance rénale chronique. La culture cellulaire ne peut pas reproduire la complexité des mécanismes mis en jeu au cours des maladies rénales glomérulaires comme les interactions entre les vaisseaux et le système immunitaire. Il n’existe pas de modèle de remplacement in vitro ou in silico à l’heure actuelle pour ces raisons. Nous travaillons néanmoins au développement de nouveaux modèles d’organe sur puce qui permettront à l’avenir de remplacer partiellement le recours aux animaux.
2. Réduction
Le nombre d’animaux est calculé sur la base d’un plan expérimental permettant d’obtenir la puissance statistique nécessaire à l’obtention de conclusions biologiquement pertinentes. Nous optimisons l’utilisation des organes pour les différentes analyses afin de réduire le nombre d’animaux utilisés. Les accouplements sont optimisés pour permettre d’obtenir les animaux d’intérêt avec le meilleur rendement possible. Les lignées sont cryoconservées lorsque le recours aux animaux n’est plus nécesssaire afin d’éviter les élevages inutiles.
3. Raffinement
Les animaux seront élevés en cages enrichies et surveillés au cours des procédures pour repérer l’éventuelle apparition de signes cliniques pouvant indiquer une souffrance ou un mal- être. Une grille de score de souffrance et des points limites spécifiques au projet ont été́ établis, permettant d’intervenir pour soulager les animaux en cas de souffrance. Les souris diabétiques urinent beaucoup. Pour cette raison, le nombre d’animaux par cage est limité à 3. Des litières doubles sont utilisées dans les cages contenant des animaux diabétiques pour limiter le nombre de changes. Des biberons de 300mL sont mis dans les cages d’animaux diabétiques pour s’assurer qu’ils ne manquent pas d’eau. En cas d’apparition de signes cliniques, ou à la fin de la procédure, les animaux sont mis à mort.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Le modèle animal permet de réaliser des expériences de physiopathologie rénale de mammifères en prenant en compte tous les paramètres physiologiques qui existent in vivo. Les analyses in vitro ou in silico ne sont pas suffisantes pour l’étude des lésions rénales car trop de paramètres physiopathologiques entrent en jeu. Les animaux sont utilisés de la naissance à l’âge adulte car nous avons un élevage mais seuls les adultes agés de plus de 8 semaines (arrivés à leur maturité sexuelle et donc fin de leur développement) sont utilisés pour les modèles expérimentaux de maladies rénales.