Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 2024-07-29 00:00:00
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-535184)
Les souris de cette lignée sont tuées dès que les points limites sont atteints, après une perte de poids vers 90 jours, une paralysie qui progresse à partir de 110 jours et une mort attendue vers 130 jours. 3 200 d’entre elles vont être élevées sur cinq ans, 2 400 dans des procédures impliquant un niveau de souffrance léger et 800 un niveau modéré. Le génotypage passe par une biopsie de la queue sur animal vigile, et les reproducteurs sont tués en fin de période reproductive, leur descendance alimentant les projets de thérapie génique en cours ou à venir. Le porteur décrit une lignée choisie pour la sévérité de ses symptômes, avec pour horizon de « possibles essais cliniques » chez l’humain.
Résumé produit par un modèle de langage à partir du seul texte du laboratoire, selon une méthode arrêtée par l’OXA. Publié sans relecture individuelle préalable, sous la responsabilité de l’association, et corrigé au fil des relectures.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
Décrire les objectifs du projet.
Note de l'OXA. Cette question est celle du formulaire européen de résumé non technique. Elle est posée au laboratoire qui demande l'autorisation, et sa réponse est écrite avant que la première procédure commence (arrêté du 1er février 2013, art. 5). Ces objectifs servent à justifier l'utilisation des animaux devant le comité d'éthique. Aucun document public ne dira ensuite s'ils ont été atteints : la directive permet aux États de faire mettre à jour le résumé avec les résultats de l'appréciation rétrospective (directive 2010/63/UE, art. 43), la base européenne prévoit de les recevoir, et aucune entrée française n'en porte (base ALURES).
Dans quel but fait-on ça ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
La Sclérose Latérale Amyotrophique est une maladie qui se traduit par la perte des motoneurones (cellules de la moelle épinière) et conduit à la paralysie puis au décès des patients dans un délai de 5 ans après le diagnostic. La maladie se présente sous forme sporadique ou héréditaire. Une certaine forme de la maladies est à l’origine d’une accumulation d’une protéine dans les cellules, entrainant toxicité et mort cellulaire. C’est sur cette forme de la pathologie que notre projet est focalisé. A l’heure actuelle il n’existe pas de traitements efficace chez l’Homme. L’étude sera réalisée sur une souche de souris transgéniques qui est le modèle le plus communément utilisé dans l’étude de cette maladie car les animaux développent les même symptômes que les patients. Ces animaux déclarent les premiers symptômes à 90 jours, puis leur état général se dégrade jusqu’à la mort à 130 jours environ. La stratégie thérapeutique consiste à modifier le matériel génétique en utilisant un vecteur dérivé des virus adéno-associés (AAV), dans le but de diminuer les quantités de protéines mutées toxique. L’objectif de ce projet est de déclarer l’élevage de ce modèle murin à phénotype dommageable avec nécessité de génotypage afin de répondre aux besoins pour les projets de recherche sur les cinq années à venir.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Note de l'OXA. Le formulaire européen demande les bénéfices « susceptibles de découler » du projet. Il appelle donc une projection, et il l'obtient : ce que le laboratoire écrit ici est ce qu'il espère, avant d'avoir commencé. Deux chercheuses ont repris six corpus d'études précliniques déjà menées et pesé les dommages réellement infligés aux animaux contre les bénéfices cliniques réellement obtenus : moins de 7 % de ces études ressortaient défendables (Pound et Nicol, 2018).
Est-ce « inutile » ou « nécessaire » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Ce projet permet d’élever la lignée murine modèle de la sclérose latérale amyotrophique, maladie se traduisant par la perte des motoneurones (cellules de la moelle épinière) et conduisant à la paralysie puis au décès des patients dans un délai de 5ans après le diagnostic. Les animaux permettront de mener à bien différents projets de recherche permettant de montrer l’efficacité de nos différents traitements sur la réduction des niveaux de protéines toxique et par conséquent sur la survie (avec attendu, une augmentation de la survie des souris injectées), l’amélioration des signes moteurs et le retard de l’apparition des symptômes, avec pour objectif à long terme, des possibles essais clinique pour une thérapie chez l’Homme.
Nuisances prévues, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Note de l'OXA. La formule « en règle générale » autorise une réponse générale, et c'est l'un des points sur lesquels les examens de qualité trouvent ces documents défaillants. Un examen publié en 2018 a établi que les résumés allemands et britanniques décrivaient mal ce qui est fait aux animaux et ce que ceux-ci pourraient éprouver (Taylor et al., 2018). L'adoption d'un modèle commun européen a nettement amélioré le premier point, à peine le second (Taylor et al., 2024).
Le droit d'accès aux documents · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les souris élevées pour ce projet sont susceptibles de développer un phénotype dommageable caractérisé par une perte de poids vers 90 jours puis une atteinte musculaire conduisant à la paralysie (vers 120 jours) puis la mort de l’animal. Une biopsie caudale sera réalisé sur ses souris vigiles afin de vérifier si elles sont ou non porteuses du gène qui nous intéresse. Ce geste ne nécessite que quelques secondes.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Note de l'OXA. C'est l'endroit du document où les animaux devraient apparaître, et c'est celui qui résiste. Un nouvel examen, publié en 2024, a mesuré que cinq des six éléments attendus sur les dommages prévus progressaient depuis l'adoption d'un modèle commun européen. Les effets indésirables sont le sixième : 41 % des résumés allemands et 48 % des britanniques les décrivent complètement. Les auteurs relèvent aussi des effets présentés comme minimes sur des projets classés modérés ou sévères (Taylor et al., 2024). Ces mesures portent sur l'Allemagne et le Royaume-Uni. L'examen de 2018 classait la France parmi les pays les moins bons pour l'identification, l'accessibilité et la qualité de ses résumés, sans les noter rubrique par rubrique (Taylor et al., 2018). Les résumés français suivent aujourd'hui le modèle européen commun.
Les animaux souffrent-ils ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
La Sclérose Latérale Amyotrophique est une maladie neurodégénérative des motoneurones de l’adulte qui se caractérise par une dégénérescence progressive des motoneurones. Elle provoque une paralysie progressive de l’ensemble des muscles. Selon le protocole dans lequel les souris seront inclues, et donc l’âge à l’euthanasie, elles pourront présenter des signes de dégénérescence comme la paralysie des pattes et/ou du bassin. Cela entrainera des difficultés pour se déplacer, s’hydrater et s’alimenter. La biopsie caudale entraînera une une faible douleur et un stress de courte durée.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Note de l'OXA. Le formulaire demande de justifier ce sort, non de le décrire. L'analyse dommage-avantage que la directive impose au comité d'éthique porte sur « la souffrance, la douleur et l'angoisse » infligées aux animaux (directive 2010/63/UE, art. 38). Quand ce sort est la mise à mort, celle-ci ne figure donc pas parmi les dommages que le comité met en balance avec les bénéfices annoncés. L'OXA écrit « mise à mort » plutôt que « sacrifice », qui emprunte au registre du don consenti, ou « euthanasie », qui désigne une mort décidée dans l'intérêt de celui qui meurt.
Peut-on parler d'éthique en expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les animaux reproducteurs seront euthanasiés en fin de période reproductive. Les animaux produits dans le cadre des accouplements serviront d’une part comme animaux reproducteurs (renouvellement des croisements), et d’autre part ils seront utilisés dans le cadre d’une utilisation continue au sein des projets de recherche préalablement autorisés en cours ou à venir.
Application de la règle des "3R", selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
1. Remplacement
Note de l'OXA. La directive demande au résumé « une démonstration de la conformité » aux exigences de remplacement, de réduction et de raffinement (directive 2010/63/UE, art. 43). C'est donc le demandeur qui démontre sa propre conformité, dans le document même qui sollicite l'autorisation. Cette démonstration peut prendre la forme d'une affirmation qu'aucune méthode de substitution n'existe, que le document n'a pas à sourcer. Ces trois exigences sont par ailleurs subordonnées à l'objectif du projet : elles cherchent à remplacer les animaux dans un projet donné, elles n'interrogent pas ce projet.
Comment avancer vers la fin de l'expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Actuellement, aucun modèle in vitro n’existe pour pouvoir mener une étude pré-clinique dans la Sclérose Latérale Amyotrophique. Le modèle animal est indispensable pour optimiser et développer notre approche de thérapie génique pour cette maladie. Ce modèle, particulièrement bien caractérisé, nous permettra de quantifier l’efficacité de notre traitement sur la réduction des niveaux de protéines toxique et par conséquent sur la survie, l’amélioration des signes moteurs et le retard de l’apparition des symptômes. Néanmoins, des expériences in vitro avec des lignées cellulaires ont été réalisées en amont afin de sélectionner des vecteurs d’intérêt et, par conséquent, limiter au maximum le recours à l’utilisation de souris.
2. Réduction
Note de l'OXA. La réduction dont il est question ici porte sur le nombre d'animaux par groupe expérimental, calculé pour que l'analyse statistique tienne. Le total annoncé dans la fiche est une estimation portant sur une autorisation de cinq ans au maximum (code rural, art. R214-123) : il ne dit pas combien d'animaux seront effectivement utilisés, et il ne se rapporte pas à une année.
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Afin de définir le nombre nécessaire d’animaux à élever, nous nous sommes basés sur les effectifs concrets des années précédentes, ce qui nous permet de pouvoir prévoir de façon plutôt précise le nombre dont nous auront besoin pour les cinq années à venir. Le nombre d’accouplement sera ajustés tout au long de ces cinq années afin de produire uniquement le nombre d’animaux nécessaire par projet spécifique. Aucune analyse statistique ne sera mise en œuvre dans le cadre de ce projet d’élevage. Nous nous basons également sur le document « Working with ALS mice » afin d’optimiser au mieux les accouplements. Les animaux ne répondant pas aux exigences pour l’étude (porteur ou non de la maladie) seront systématiquement proposés pour d’autres projets déjà validées. De même, les mâles utilisés pour l’amplification de la colonie pourront également être inclus dans des groupes expérimentaux contrôle. Ces utilisations sont dans le cadre d’une utilisation continue. Nous avons donc ici 3200 animaux prévus au total avec approximativement 1600 mâles et 1600 femelles et pour chaque sexe, 800 souris malade et 800 non malade.
3. Raffinement
Note de l'OXA. Le raffinement nomme une amélioration technique de la procédure, sans dire ce qu'elle change pour l'animal qui la subit. La réglementation impose d'atténuer la douleur, dans une limite qu'elle inscrit elle-même : « pour autant que cela soit compatible avec la finalité de la procédure expérimentale » (code rural, art. R214-109). Ce qui reste de souffrance après cette limite est autorisé. Le raffinement ne porte par ailleurs que sur la procédure : les souffrances de la captivité elle-même, confinement, bruit, lumière, manipulations d'entretien, ne relèvent d'aucun des trois R.
La réglementation est-elle « très stricte » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Dans la réalisation des futurs projets, l’ensemble des procédures sera mis au point afin de permettre une interprétation fiable dans le respect du bien-être animal, en limitant la douleur et le stress (anesthésie, analgésie, etc.). Les conditions d’hébergement sont conformes à la réglementation avec un cycle jour nuit automatique : les animaux sont hébergés avec leurs congénères en portoirs ventilés avec un système d’abreuvement automatique et un accès ad libitum à la nourriture et l’eau. Le milieu est enrichi avec des enrichissements. Les conditions de températures et d’hygrométrie sont contrôlées et monitorées. Nous nous efforçons à chaque instant de raffiner nos procédures afin de garantir le bien-être des animaux en cours de procédure grâce à une surveillance attentive (point limite) et des soins adaptés (anesthésie, analgésie, etc.). Enfin, chaque animal sera suivi quotidiennement, de sa naissance à sa mort et les points limites contrôlés régulièrement. Une fois ceux-ci atteints, cela entraînera automatiquement l’euthanasie de l’animal pour éviter toute souffrance. De plus, pour minimiser le stress des animaux, ceux-ci seront manipulés tout au long de l’expérimentation par la même personne afin de créer une habituation souris/manipulateur. La technique utilisée pour la réalisation des biopsies est la biopsie caudale, technique recommandée par les différents comités nationaux. Les biopsies sont réalisées avec du matériel propre et désinfecté, une compression avec de l’essui tout propre est effectué pour stopper le micro-saignement. Les souriceaux sont sur surveillance jusqu’à ce que leur mère les reprenne en charge dans le nid. Un soin particulier sera apporté aux animaux commençant à développer la maladie pour leur faciliter l’accès à la nourriture et à l’eau. Ainsi des croquettes ou de la bouillie pourront être placés directement dans la cage, ainsi que de l’hydrogel en cas de besoin.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Note de l'OXA. Le dossier d'autorisation demande de justifier l'origine des animaux, leur espèce, leur nombre estimé et leur stade de développement (arrêté du 1er février 2013, art. 5). La justification attendue est technique : elle porte sur l'adéquation de l'espèce à l'objectif poursuivi. Ce que l'appartenance à une espèce autorise à faire subir à un individu est une question morale, et le formulaire ne la pose pas. L'appartenance à une espèce, prise seule, ne fonde pourtant pas de différence de statut moral entre des individus également capables de souffrir.
Spécisme et expérimentation animale · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les modèles animaux les plus communément utilisés pour les projets de thérapie génique pour le traitement de la sclérose latérale amyotrophique sont des lignées murines commercialisées. Dans notre projet nous utiliserons un modèle qui reproduit les principaux symptômes de la Sclérose Latérale Amyotrophique et est par conséquent adapté pour évaluer l’efficacité de nos traitements sur la forme génétique de la maladie. Les animaux présentent des symptômes à partir de 90 jours (perte de poids) due à une accumulation d’une protéine entrainant une paralysie progressive à partir de 110 jours et la mort des animaux à 130 jours. Les animaux de ce projet d’élevage seront identifiés et génotypés entre le jour de la naissance et le 7ème jour de vie, puis ils entreront dans un projet d’expérimentation au 1er jour de vie ou au 50ème (selon le projet autorisé).