Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 30/07/2026
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-541939)
Chercher une cible médicamenteuse qui réduirait le risque de thrombose sans augmenter celui des saignements conduit ici à utiliser 2 778 souris, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance léger, ou menées sous anesthésie sans réveil. Les souris anesthésiées sont ouvertes pour dégager le cœur, et une aiguille est introduite dans le ventricule gauche afin de prélever le sang, en cinq minutes. Pour les expériences de thrombose, l’abdomen est ouvert pour dégager le mésentère, ou la carotide est isolée, et un papier buvard imprégné de chlorure de fer déclenche la formation d’un caillot, sous observation pendant trente minutes au maximum. Aucune des souris ne se réveille, et le porteur justifie ce recours par la conservation des plaquettes in vitro, de quelques heures seulement, et par une production in vitro qu’il décrit comme encore très limitée.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
De nombreuses pathologies (obésité, diabète, inflammation, …) s’accompagnent d’une augmentation du risque de thrombose. Pour prévenir ce rique, les patients sont aujourd’hui traités avec des anti-plaquettaires. Ces médicaments sont efficaces face aux risques de thrombose mais augmentent fortement les risques de saignements. Aujourd’hui, l’enjeu est de trouver un moyen de réduire le risque de thrombose sans augmenter celui du saignement. Notre objectif est d’identifier les composants moléculaires d’une voie de signalisation récemment décrite dans les plaquettes afin de développer des médicaments contre les risques de thrombose. Notre hypothèse est qu’une molécule « N » est le principal messager qui contrôle cette voie de signalisation et régule l’activation des plaquettes. Ainsi, l’identification des protéines responsables de la production de « N » pourrait représenter une avancée majeure dans le développement de nouvelles stratégies thérapeutiques pour la régulation de l’hémostase et la prévention des thromboses.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Les bénéfices attendus sont importants : d’un point de vue scientifique, l’implication des deux protéines ciblées dans cette étude a déjà été proposée dans d’autres types cellulaires, mais rien n’est connue pour les plaquettes. D’un point de vue thérapeutique, l’identification du mécanisme de production de la molécule « N » fournira une cible médicamenteuse potentielle pour réduire l’activation plaquettaire sans l’inhiber complètement. Cela permettrait de réduire le risque de thromboses sans augmenter celui du saignement.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Les animaux sous anesthésie seront soit utilisés pour des expériences de thrombose in vivo, (max de 40 min) soit pour des prélèvements sanguins (2 min). Pour les expérience de thrombose in vivo les animaux sont anesthésiés par une solution de kétamine/xélasine adaptée qui est suivie d’une analgésie forte par l’injection d’une solution buprénorphine à 0.1mg/Kg. Pour le prélèvement sanguin, les animaux anesthésiés sont ouvert de façon à dégager le coeur pour pouvoir introduire une aiguille dans le ventricule gauche pour prélever le sang dans de bonne conditions. Ce prélevement a une durée de 5 minutes. Pour la thrombose induites au niveau du mésenthère, les animaux sont ensuite ouverts pour dégager le mésenthère de façon à placer les vaisseaux sanguins au dessus de l’objectif du microscope. La thrombose est induite avec un morceau de papier buvard imprégné d’une solution de chlorure de fer. Cette expérience a une durée de 30 min maximum. Pour la thrombose carotidienne, l’acte de chirurgie à pour objectif de permettre l’isolement de la carotide pour y placer la sonde ultrason et pour induire la thrombose avec un morceau de papier buvard impregner d’une solution de chlorure de fer. Cette expérience a une durée de 30 min maximum.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Contention d’une ou 2 minutes pour l’injection d’anesthésie/analgésie. normalement deux injections sont suffisantes (anesthésie et analgésie). L’animal anesthésié ne se reveille pas.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Les souris sont euthanasiées à la fin des procédures car celles-ci imposent des gestes qui ne sont pas compatibles avec un retour en cage.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Les plaquettes sont des éléments cellulaires très fragiles dont la conservation in vitro est d’une durée très courte (quelques heures) et dont la production in vitro est encore très limitée. Pour caractériser le fonctionnement des plaquettes, il faut utiliser des plaquettes isolées à partir du sang, il n’est donc pas possible de recourir à des méthodes alternatives.
2. Réduction
Pour ce projet, nous avons calculé le nombre d’animaux minimal mais suffisant pour réaliser une étude fiable et obtenir des résultats reproductibles. Dans le cas où nous n’observons pas un effet lié au genre, le nombre d’animaux requis sera réduit. Par ailleurs, si au cours des premières expériences, nous n’observons pas d’effet, les suivantes ne seront pas réalisées.
3. Raffinement
Pendant leur hébergement dans l’animalerie, le bien-être de l’animal est contrôlé tous les jours. Les animaux sont gardés dans un environnement avec enrichissement, boissons et nourriture ad libitum. Pendant les procédures, l’animal est anesthésié et la profondeur de l’anesthésie est surveillée (respiration, réflexes). Un analgésique est aussi injecté aux animaux pour supprimer la douleur. A la fin de procédures, les animaux sont euthanasiés par une méthode légale.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
L’espèce animale choisie pour ce projet est la souris, car nous venons d’identifier cette nouvelle voie de signalisation dans les plaquettes commune à la souris et à l’homme. La disponibilité de lignées génétiquement modifiées est un atout essentiel pour démontrer un possible effet protecteur de protéines nouvellement identifiées dans l’hémostase et développer par la suite une approche thérapeutique pour réduire l’activation plaquettaire. Les souris adultes seront utilisées afin de récupérer un volume de sang suffisant pour isoler un grand nombre de plaquettes de bonne qualité. Les expériences de thrombose nécessitent des animaux âgés de 8 semaines pour limiter la quantité de tissu adipeux et garantir la qualité des images étudiées.