Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 2023-01-09 00:00:00
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-955168)
480 souris vont être utilisées, toutes tuées à l’issue, une partie dans des procédures impliquant un niveau de souffrance sévère, une autre opérée sous anesthésie et tuée avant tout réveil pour prélever un greffon d’aorte. Les souris opérées subissent une chirurgie de remplacement de la trachée par une matrice aortique de 45 minutes, avec des injections de tamoxifène cinq jours de suite pour les lignées transgéniques, et sont euthanasiées entre 7 et 90 jours après. Le porteur indique des douleurs post-opératoires, un risque d’infection et une perte de poids temporaire possibles. Il affirme qu’aucune méthode alternative ne modélise ce remplacement et retient la souris pour ses lignées génétiquement modifiées, l’ancien modèle étant la brebis.
Résumé produit par un modèle de langage à partir du seul texte du laboratoire, selon une méthode arrêtée par l’OXA. Publié sans relecture individuelle préalable, sous la responsabilité de l’association, et corrigé au fil des relectures.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
Décrire les objectifs du projet.
Note de l'OXA. Cette question est celle du formulaire européen de résumé non technique. Elle est posée au laboratoire qui demande l'autorisation, et sa réponse est écrite avant que la première procédure commence (arrêté du 1er février 2013, art. 5). Ces objectifs servent à justifier l'utilisation des animaux devant le comité d'éthique. Aucun document public ne dira ensuite s'ils ont été atteints : la directive permet aux États de faire mettre à jour le résumé avec les résultats de l'appréciation rétrospective (directive 2010/63/UE, art. 43), la base européenne prévoit de les recevoir, et aucune entrée française n'en porte (base ALURES).
Dans quel but fait-on ça ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
La greffe trachéo-bronchique est un véritable défi chirurgical et biologique. Des échecs successifs ont été observés avec les prothèses synthétiques, les bioprothèses, les allogreffes trachéales, et les autogreffes d’organes et tissus divers. Le remplacement trachéo-bronchique par une allogreffe artérielle cryopréservée soutenue par une endoprothèse a été réalisé récemment chez l’Homme. Cette technique est la seule à avoir prouvé son efficacité et durabilité. Des études expérimentales chez la brebis et des applications chez l’homme ont toutes montré la formation d’un nouveau conduit respiratoire avec de l’épithélium respiratoire et du cartilage « de novo ». Le greffon aortique cryopréservé joue un rôle très important dans cette régénération car il contient des cellules viables et libère des facteurs de croissance et des cytokines diverses . Le corps humain de l’hôte est un bioréacteur qui induit, en présence de la matrice aortique, des facteurs favorisant la migration et l’activation des cellules inflammatoires et des cellules progénitrices dans le greffon. Afin d’étudier les mécanismes cellulaires et moléculaires mis en jeu lors du remplacement trachéal par la matrice aortique, nous souhaitons développer un modèle murin de remplacement trachéal par l’aorte qui nous permettra d’étudier les étapes-clés du processus de régénération plus facilement que chez la brebis. Afin de déterminer l’origine cellulaire des nouveaux anneaux cartilagineux présents dans la matrice aortique, des souris double transgéniques seront utilisées pour faire du traçage de la lignée chondrocytaire. OBJECTIFS i. Mettre au point le modèle de remplacement trachéal par l’aorte ascendante chez la souris. ii. Identifier les programmes cellulaires et moléculaires intervenant dans la néochondrogenèse au sein de la matrice aortique.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Note de l'OXA. Le formulaire européen demande les bénéfices « susceptibles de découler » du projet. Il appelle donc une projection, et il l'obtient : ce que le laboratoire écrit ici est ce qu'il espère, avant d'avoir commencé. Deux chercheuses ont repris six corpus d'études précliniques déjà menées et pesé les dommages réellement infligés aux animaux contre les bénéfices cliniques réellement obtenus : moins de 7 % de ces études ressortaient défendables (Pound et Nicol, 2018).
Est-ce « inutile » ou « nécessaire » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Ce projet représente la suite des travaux de recherche concernant le remplacement trachéo-bronchique par une allogreffe artérielle, réalisée chez la brebis, permettant l’utilisation de la technique chez l’homme, avec la formation de nouvelles voies respiratoires. Ce nouveau projet représente une étape d’un travail de recherche essentiel qui vise à identifier les mécanismes cellulaires qui favorise la régénération et la réparation tissulaire mis en jeu lors du remplacement trachéal. La mise en évidence de ces mécanismes permettra de proposer des solutions thérapeutiques afin d’améliorer et accélérer l’apparition de nouvelles voies respiratoires après le remplacement par allogreffe artérielle.
Nuisances prévues, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Note de l'OXA. La formule « en règle générale » autorise une réponse générale, et c'est l'un des points sur lesquels les examens de qualité trouvent ces documents défaillants. Un examen publié en 2018 a établi que les résumés allemands et britanniques décrivaient mal ce qui est fait aux animaux et ce que ceux-ci pourraient éprouver (Taylor et al., 2018). L'adoption d'un modèle commun européen a nettement amélioré le premier point, à peine le second (Taylor et al., 2024).
Le droit d'accès aux documents · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
– prélèvement post mortem d’un greffon aortique (1 intervention, durée de l’intervention: 15 minutes, acte réalisé après euthanasie), – injection de tamoxifène pour les animaux transgéniques uniquement (1 injection/jour pendant 5 jours continus, durée de l’intervention: 20 secondes, acte réalisé après traitement analgésique) – procédure chirurgicale (1 intervention, durée de l’intervention: 45 minutes, acte réalisé après traitement analgésique et anesthésique; prise en charge analgésique au cours de la période post-opératoire, l’euthanasie des animaux opérés aura lieu de 7 à 90 jours après la procédure chirurgicale).
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Note de l'OXA. C'est l'endroit du document où les animaux devraient apparaître, et c'est celui qui résiste. Un nouvel examen, publié en 2024, a mesuré que cinq des six éléments attendus sur les dommages prévus progressaient depuis l'adoption d'un modèle commun européen. Les effets indésirables sont le sixième : 41 % des résumés allemands et 48 % des britanniques les décrivent complètement. Les auteurs relèvent aussi des effets présentés comme minimes sur des projets classés modérés ou sévères (Taylor et al., 2024). Ces mesures portent sur l'Allemagne et le Royaume-Uni. L'examen de 2018 classait la France parmi les pays les moins bons pour l'identification, l'accessibilité et la qualité de ses résumés, sans les noter rubrique par rubrique (Taylor et al., 2018). Les résumés français suivent aujourd'hui le modèle européen commun.
Les animaux souffrent-ils ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les effets indésirables attendus sont le risque anesthésique, la douleur post-opératoire, une infection post-opératoire, une perte de poids temporaire au cours de la période post-chirurgicale, le stress associé à des administrations intrapéritonéales répétées de tamoxifène.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Note de l'OXA. Le formulaire demande de justifier ce sort, non de le décrire. L'analyse dommage-avantage que la directive impose au comité d'éthique porte sur « la souffrance, la douleur et l'angoisse » infligées aux animaux (directive 2010/63/UE, art. 38). Quand ce sort est la mise à mort, celle-ci ne figure donc pas parmi les dommages que le comité met en balance avec les bénéfices annoncés. L'OXA écrit « mise à mort » plutôt que « sacrifice », qui emprunte au registre du don consenti, ou « euthanasie », qui désigne une mort décidée dans l'intérêt de celui qui meurt.
Peut-on parler d'éthique en expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
A la fin des procédures , les 480 animaux sont euthanasiés afin de réaliser des prélèvements post-mortem.
Application de la règle des "3R", selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
1. Remplacement
Note de l'OXA. La directive demande au résumé « une démonstration de la conformité » aux exigences de remplacement, de réduction et de raffinement (directive 2010/63/UE, art. 43). C'est donc le demandeur qui démontre sa propre conformité, dans le document même qui sollicite l'autorisation. Cette démonstration peut prendre la forme d'une affirmation qu'aucune méthode de substitution n'existe, que le document n'a pas à sourcer. Ces trois exigences sont par ailleurs subordonnées à l'objectif du projet : elles cherchent à remplacer les animaux dans un projet donné, elles n'interrogent pas ce projet.
Comment avancer vers la fin de l'expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
A ce jour, il n’existe pas de méthodes alternatives pour modéliser le remplacement trachéo-bronchique par une allogreffe artérielle. Cette affirmation se base sur : – des discussions avec des confrères; – des conférences en pneumologie ; – une recherche bibliographique approfondie effectuée sur la période 2010-2021 dans les bases de données en utilisant es mots-clés suivants: replacement, trachea, aorta, alternatives.
2. Réduction
Note de l'OXA. La réduction dont il est question ici porte sur le nombre d'animaux par groupe expérimental, calculé pour que l'analyse statistique tienne. Le total annoncé dans la fiche est une estimation portant sur une autorisation de cinq ans au maximum (code rural, art. R214-123) : il ne dit pas combien d'animaux seront effectivement utilisés, et il ne se rapporte pas à une année.
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Afin de réduire le nombre d’animaux utilisés, les mises au point de la technique chirurgicale seront réalisées sur des souris euthanasiées, issues de surplus de colonie. Le calcul de la taille d’échantillon a été déterminé par un calcul de puissance à partir de données de la littérature. Un modèle murin de remplacement trachéal a été publié récemment en utilisant soit des trachées de souris syngéniques, soit des structures synthétiques. Cet article, unique référence existante sur ce type de modèle expérimental murin, déclare observer un taux de survie post-opératoire de 80% à 60 jours pour les greffons syngéniques. A partir de ces résultats, nous avons réalisé un calcul de puissance pour déterminer la taille des effectifs. Le nombre total d’animaux pour le projet est de 480 souris. Il sera nécessaire de procéder à des tests statistiques pour une interprétation fiable des résultats.
3. Raffinement
Note de l'OXA. Le raffinement nomme une amélioration technique de la procédure, sans dire ce qu'elle change pour l'animal qui la subit. La réglementation impose d'atténuer la douleur, dans une limite qu'elle inscrit elle-même : « pour autant que cela soit compatible avec la finalité de la procédure expérimentale » (code rural, art. R214-109). Ce qui reste de souffrance après cette limite est autorisé. Le raffinement ne porte par ailleurs que sur la procédure : les souffrances de la captivité elle-même, confinement, bruit, lumière, manipulations d'entretien, ne relèvent d'aucun des trois R.
La réglementation est-elle « très stricte » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Avant la réalisation d’une procédure expérimentale, les souris seront maintenues en cage de 370 cm2. Les animaux seront logés en groupes sociaux stables formés de 4 individus compatibles. Il n’y aura pas de limitations en apports alimentaires et hydriques. L’enrichissement du milieu sera composé de matériel de nidification et d’abri en cellulose. Afin de vérifier la profondeur de la dose d’anesthésie, les signes suivants seront vérifiés: le relachement des muscles, la perte du réflexe de retrait sur les deux pattes et la queue, la perte du réflexe palpébral, une respiration calme. Si l’un de ces signes est toujours présent 10 minutes après l’injection ou apparait avant la fin de l’intervention chirurgicale, une deuxiéme injection de produits anesthésiques sera réalisée. La douleur post-opératoire sera prise en charge par l’application locale d’analgésique au niveau de la zone opérée et par une injection sous-cutanée d’analgésique. Si besoin, celle-ci sera répétée les jours suivants la chirurgie. Les interventions chirurgicales auront lieu le matin, permettant ainsi une vérification de l’état général des animaux en post-chirurgie, en particulier en s’assurant que les animaux sont complètement sortis de l’anesthésie en fin de journée (retour de la mobilité, prise hydrique et alimentaire). Une observation journalière des animaux est réalisée (apparence physique externe, changement de comportement, réponse aux stimuli externes, courbe de poids). Les animaux seront pesés quotidiennement lors des 5 jours suivant l’acte chirurgical. Par la suite, le poids sera enregistré 3 fois par semaine. Une perte de plus de 20% du poids initial ou la perte totale de mobilité seront considérés comme des points-limites, justifiant la fin du protocole expérimental. La cicatrisation sera observée en même temps que le suivi de poids. Des signes d’inflammation seront scrutés (rougeur, gonflement). La perte des fils de suture indiquera une bonne cicatrisation.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Note de l'OXA. Le dossier d'autorisation demande de justifier l'origine des animaux, leur espèce, leur nombre estimé et leur stade de développement (arrêté du 1er février 2013, art. 5). La justification attendue est technique : elle porte sur l'adéquation de l'espèce à l'objectif poursuivi. Ce que l'appartenance à une espèce autorise à faire subir à un individu est une question morale, et le formulaire ne la pose pas. L'appartenance à une espèce, prise seule, ne fonde pourtant pas de différence de statut moral entre des individus également capables de souffrir.
Spécisme et expérimentation animale · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Le modèle de remplacement trachéal chez la souris offre la possibilité de travailler sur des organismes génétiquement modifiés (contrairement au modèle ovin précédemment utilisé) pour pouvoir cibler le rôle de certaines populations cellulaires et des molécules impliquées dans le processus ide néochondrogenèse et ainsi, identifier des mécanismes responsables de la régénération trachéale. Pour le modèle de remplacement trachéal, des souris adultes (8-12 semaines) seront utilisées. En pathologie humaine, la technique de remplacement trachéal s’adresse surtout aux adultes (sténoses acquises bénignes et pathologie maligne de l’arbre respiratoire).