Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 2022-05-31 00:00:00
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-957971)
654 souris vont être utilisées, toutes tuées à l’issue, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance léger à modéré. Elles reçoivent des injections tous les deux jours ou des gavages, et une partie subit une excision de la peau du dos sous anesthésie pour observer la cicatrisation, dans le but d’étudier des lymphocytes appelés cellules MAIT et leur lien avec le microbiote. Le porteur indique que toutes seront tuées dans un autre établissement pour prélever le thymus, les reins, le foie et la peau. Sur le remplacement, il affirme qu’aucun modèle de peau artificielle ni aucune modélisation ne reproduit ces paramètres et se dit « obligé d’utiliser des animaux ».
Résumé produit par un modèle de langage à partir du seul texte du laboratoire, selon une méthode arrêtée par l’OXA. Publié sans relecture individuelle préalable, sous la responsabilité de l’association, et corrigé au fil des relectures.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
Décrire les objectifs du projet.
Note de l'OXA. Cette question est celle du formulaire européen de résumé non technique. Elle est posée au laboratoire qui demande l'autorisation, et sa réponse est écrite avant que la première procédure commence (arrêté du 1er février 2013, art. 5). Ces objectifs servent à justifier l'utilisation des animaux devant le comité d'éthique. Aucun document public ne dira ensuite s'ils ont été atteints : la directive permet aux États de faire mettre à jour le résumé avec les résultats de l'appréciation rétrospective (directive 2010/63/UE, art. 43), la base européenne prévoit de les recevoir, et aucune entrée française n'en porte (base ALURES).
Dans quel but fait-on ça ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
La compréhension de la réparation de la peau est un enjeu de santé publique puisqu’elle pourrait permettre l’amélioration du traitement d’épisodes cliniques aigus (brûlure, choc mécanique…) et chroniques (eczéma, psoriasis…) qui touchent une grande partie de la population. Des données préliminaires chez l’homme et la souris suggèrent que certaines cellules de l’immunité, très fréquentes dans la peau, synthétisent des molécules favorisant la réparation de celle-ci. Cependant, leur rôle exact, ainsi que la possibilité de les stimuler cliniquement pour augmenter la réparation tissulaire, restent des pistes à explorer. Les cellules immunitaires en question sont des lymphocytes T invariants associés aux muqueuses (MAIT) qui sont les cellules d’intérêts dans notre projet et qui ont la capacité de reconnaitre et d’être stimulées par des molécules produites par des bactéries. Différentes données de la littérature suggèrent que les cellules MAIT pourraient avoir des propriétés de réparation tissulaire. L’objectif de ce projet est d’étudier le lien entre les bactéries du microbiote et les cellules MAIT en condition physiologique et lors du processus de cicatrisation.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Note de l'OXA. Le formulaire européen demande les bénéfices « susceptibles de découler » du projet. Il appelle donc une projection, et il l'obtient : ce que le laboratoire écrit ici est ce qu'il espère, avant d'avoir commencé. Deux chercheuses ont repris six corpus d'études précliniques déjà menées et pesé les dommages réellement infligés aux animaux contre les bénéfices cliniques réellement obtenus : moins de 7 % de ces études ressortaient défendables (Pound et Nicol, 2018).
Est-ce « inutile » ou « nécessaire » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
A court terme, ce projet nous permettra d’évaluer le rôle de molécules synthétisées par les bactéries du microbiome dans la biologie des cellules MAIT en dehors du thymus, c’est-à-dire en périphérie. Nous pourrons évaluer le rôle du microbiote commensal intestinal et cutané dans le maintien des cellules MAIT en périphérie. A long terme, la démonstration de l’implication des cellules MAIT dans la cicatrisation des plaies cutanées et l’analyse des mécanismes impliqués peuvent aboutir à des techniques permettant le déclenchement des propriétés des cellules MAIT à des fins thérapeutiques chez les humains.
Nuisances prévues, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Note de l'OXA. La formule « en règle générale » autorise une réponse générale, et c'est l'un des points sur lesquels les examens de qualité trouvent ces documents défaillants. Un examen publié en 2018 a établi que les résumés allemands et britanniques décrivaient mal ce qui est fait aux animaux et ce que ceux-ci pourraient éprouver (Taylor et al., 2018). L'adoption d'un modèle commun européen a nettement amélioré le premier point, à peine le second (Taylor et al., 2024).
Le droit d'accès aux documents · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Nous ferons des prélèvements de fèces au cours des différentes procédures à une fréquence d’une fois par semaine maximum. Pour une procédure, les animaux subiront des injections tous les deux jours (1 minute/injection, 1 à 5 injections au maximum). Pour les autres procédures comportant des injections ou des gavages, les animaux ne subiront ces gestes qu’une seule fois au cours de la procédure. Dans une autre procédure, les animaux subiront une chirurgie permettant de réaliser une excision cutanée (30 minutes) pour observer le processus de cicatrisation.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Note de l'OXA. C'est l'endroit du document où les animaux devraient apparaître, et c'est celui qui résiste. Un nouvel examen, publié en 2024, a mesuré que cinq des six éléments attendus sur les dommages prévus progressaient depuis l'adoption d'un modèle commun européen. Les effets indésirables sont le sixième : 41 % des résumés allemands et 48 % des britanniques les décrivent complètement. Les auteurs relèvent aussi des effets présentés comme minimes sur des projets classés modérés ou sévères (Taylor et al., 2024). Ces mesures portent sur l'Allemagne et le Royaume-Uni. L'examen de 2018 classait la France parmi les pays les moins bons pour l'identification, l'accessibilité et la qualité de ses résumés, sans les noter rubrique par rubrique (Taylor et al., 2018). Les résumés français suivent aujourd'hui le modèle européen commun.
Les animaux souffrent-ils ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Aucun effet indésirable n’est attendu pour tous les produits que nous injecterons au cours du projet. Les antibiotiques utilisés n’ont jamais montré d’effet indésirable lorsqu’ils sont utilisés pour éradiquer les bactéries. Les bactéries utilisées pour le projet sont Escherichia coli et Staphylococcus epidermidis qui sont toutes les deux commensales respectivement de l’intestin et de la peau. Lors de l’excision cutanée au niveau du dos, il y a très peu de risque de créeer une infection.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Note de l'OXA. Le formulaire demande de justifier ce sort, non de le décrire. L'analyse dommage-avantage que la directive impose au comité d'éthique porte sur « la souffrance, la douleur et l'angoisse » infligées aux animaux (directive 2010/63/UE, art. 38). Quand ce sort est la mise à mort, celle-ci ne figure donc pas parmi les dommages que le comité met en balance avec les bénéfices annoncés. L'OXA écrit « mise à mort » plutôt que « sacrifice », qui emprunte au registre du don consenti, ou « euthanasie », qui désigne une mort décidée dans l'intérêt de celui qui meurt.
Peut-on parler d'éthique en expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Tous les animaux seront mis à mort par du personnel expérimenté dans un autre établissement pour que les tissus prélevés soit immédiatement analysés sur des appareils spécifiques. Le thymus, les reins, le foie et la peau seront prélevés afin d’analyser l’abondance des cellules MAIT.
Application de la règle des "3R", selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
1. Remplacement
Note de l'OXA. La directive demande au résumé « une démonstration de la conformité » aux exigences de remplacement, de réduction et de raffinement (directive 2010/63/UE, art. 43). C'est donc le demandeur qui démontre sa propre conformité, dans le document même qui sollicite l'autorisation. Cette démonstration peut prendre la forme d'une affirmation qu'aucune méthode de substitution n'existe, que le document n'a pas à sourcer. Ces trois exigences sont par ailleurs subordonnées à l'objectif du projet : elles cherchent à remplacer les animaux dans un projet donné, elles n'interrogent pas ce projet.
Comment avancer vers la fin de l'expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Pour ce projet, nous ne pouvons pas utiliser un modèle de peau artificielle car les cellules MAIT font partie du système immunitaire qui est un système dynamique dont les acteurs évoluent entre différentes localisations au sein d’un organisme selon des flux très précis. De plus, nous savons déjà que les cellules MAIT se spécialisent particulièrement en fonction de leur localisation dans l’organisme (Par exemple, elles n’ont pas les mêmes priorités dans les poumons et dans le foie). Chaque organe (voire chaque partie du corps) présente un microenvironnement particulier lié à la fois aux cellules présentes, à la façon dont elles communiquent ensemble, ainsi qu’à tout ce qui s’est passé depuis la création de l’organe en question. Aucune modélisation mathématique ou modèles in vitro existants ne permettent de reproduire tous ces paramètres à la fois. C’est pourquoi nous sommes obligés d’utiliser des animaux pour étudier ces phénomènes.
2. Réduction
Note de l'OXA. La réduction dont il est question ici porte sur le nombre d'animaux par groupe expérimental, calculé pour que l'analyse statistique tienne. Le total annoncé dans la fiche est une estimation portant sur une autorisation de cinq ans au maximum (code rural, art. R214-123) : il ne dit pas combien d'animaux seront effectivement utilisés, et il ne se rapporte pas à une année.
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Le nombre d’animaux nécessaires a été déterminé par une formule dérivée du t-test de Sudent. Cette formule tient compte des variations attendues au sein des groupes et des différences attendues entre les groupes d’après la littérature et des études faites antérieurement. Pour tout le projet, nous avons des groupes de souris allant de 6 à 18 individus. Nous utiliserons un total de 654 animaux.
3. Raffinement
Note de l'OXA. Le raffinement nomme une amélioration technique de la procédure, sans dire ce qu'elle change pour l'animal qui la subit. La réglementation impose d'atténuer la douleur, dans une limite qu'elle inscrit elle-même : « pour autant que cela soit compatible avec la finalité de la procédure expérimentale » (code rural, art. R214-109). Ce qui reste de souffrance après cette limite est autorisé. Le raffinement ne porte par ailleurs que sur la procédure : les souffrances de la captivité elle-même, confinement, bruit, lumière, manipulations d'entretien, ne relèvent d'aucun des trois R.
La réglementation est-elle « très stricte » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Il y aura une observation quotidienne des animaux, une observation individuelle hebdomadaire à l’occasion des interventions d’entretien (changes de cages etc…) ou expérimentales (prélèvement de fèces), et une observation accrue après chaque gavage, ou injection, ou tous actes susceptibles d’entrainer de la douleur, de la souffrance ou du stress, plusieurs fois dans la journée pour s’assurer qu’il n’y a pas d’effet délétère. Les animaux seront manipulés sur plusieurs jours avant le début des procédures afin de les habituer aux manipulateurs. Les injections et les gavages seront fait par du personnel expérimenté. Pour une des procédures, nous réaliserons une excision cutanée. Des anesthésiques et des analgésiques seront utilisés. Une grille de score a été définie pour évaluer l’état des souris. Les animaux seront hébergés en isolateur dans des cages standards par groupes de sexe identique (3 par cage). Du papier absorbant à déchiqueter, des buchettes de bois à grignoter et des tunnels en plastique pour se cacher seront ajoutés dans les cages. La litière sera constituée de copeaux stérilisés par irradiation (). Les souris recevront un aliment standard stérilisé par irradiation à et de l’eau autoclavée.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Note de l'OXA. Le dossier d'autorisation demande de justifier l'origine des animaux, leur espèce, leur nombre estimé et leur stade de développement (arrêté du 1er février 2013, art. 5). La justification attendue est technique : elle porte sur l'adéquation de l'espèce à l'objectif poursuivi. Ce que l'appartenance à une espèce autorise à faire subir à un individu est une question morale, et le formulaire ne la pose pas. L'appartenance à une espèce, prise seule, ne fonde pourtant pas de différence de statut moral entre des individus également capables de souffrir.
Spécisme et expérimentation animale · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les cellules d’intérêt pour ce projet (cellules MAIT) sont retrouvées uniquement chez les mammifères chez qui elles sont fortement conservées. La souris est le modèle le plus adapté pour ce projet car elle possède un système immunitaire ayant de fortes similitudes avec celui de l’homme. Nous utilisons une lignée de souris possédant le gène Castaneus (Cast) qui permet d’avoir le nombre de cellules MAIT se rapprochant de celui observé chez l’homme. Ceci permet une lisibilité accrue de leurs fonctions, localisations et rôles potentiels dans la réparation tissulaire. De plus le modèle d’excision cutanée que nous utiliserons mime le processus de réparation cutanée humain, ce qui pourrait déboucher sur des données applicables cliniquement. Les souris seront utilisées à l’âge adulte (entre 6 et 8 semaines). Nous n’attendons pas d’effet lié à l’âge des souris, cependant nous éviterons d’utiliser les animaux plus âgés car leur peau est plus épaisse. Cela entraine des problèmes sur le traitement des échantillons (cellules plus compliquées à extraire), des problèmes pour l’excision cutanée (plus compliqué de faire l’incision) et des problèmes au niveau de la qualité de la peau qui est réduite avec l’âge (les souris peuvent se battre par exemple).