Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 2023-03-30 00:00:00
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-371391)
1 330 souris vont être utilisées, toutes tuées à l’issue, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance sévère. Porteuses d’une drépanocytose, elles subissent des crises vaso-occlusives déclenchées par une exposition à un air appauvri en oxygène pendant trois heures ou à une température de 10 °C pendant une heure, puis des tests de douleur tactile, thermique et de force musculaire, pour évaluer des candidats médicaments antalgiques. Le porteur indique que ces souris développent des douleurs qui augmentent avec l’âge, ce qui justifie leur mise à mort en fin de projet. Il affirme que ces conditions ne peuvent pas être reproduites in vitro et conclut à l’impossibilité de remplacer le modèle animal.
Résumé produit par un modèle de langage à partir du seul texte du laboratoire, selon une méthode arrêtée par l’OXA. Publié sans relecture individuelle préalable, sous la responsabilité de l’association, et corrigé au fil des relectures.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
Décrire les objectifs du projet.
Note de l'OXA. Cette question est celle du formulaire européen de résumé non technique. Elle est posée au laboratoire qui demande l'autorisation, et sa réponse est écrite avant que la première procédure commence (arrêté du 1er février 2013, art. 5). Ces objectifs servent à justifier l'utilisation des animaux devant le comité d'éthique. Aucun document public ne dira ensuite s'ils ont été atteints : la directive permet aux États de faire mettre à jour le résumé avec les résultats de l'appréciation rétrospective (directive 2010/63/UE, art. 43), la base européenne prévoit de les recevoir, et aucune entrée française n'en porte (base ALURES).
Dans quel but fait-on ça ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
La drépanocytose est une pathologie génétique due à une mutation de l’un des gènes codant l’hémoglobine. Elle est caractérisée par la présence conjointe de globules rouges en forme de faucille et d’une anémie chronique hémolytique. Les cellules falciformes étant moins souples que les hématies normales, elles peuvent obstruer la circulation sanguine au niveau des capillaires, entraînant une réduction de l’alimentation en oxygène vers les tissus concernés. Cette obstruction peut provoquer des douleurs voire causer des lésions à différents organes (rate, reins, cerveau, os…). De plus, chez les patients atteints de drépanocytose, toute situation provoquant une augmentation de la consommation d’oxygène (e.g. exercice physique intense, localisation en altitude…) peut déclencher une crise dite vaso-occlusive (=crise drépanocytaire). Une crise vaso-occlusive est un épisode d’aggravation des symptômes qui peut se caractériser par l’aggravation soudaine de l’anémie, mais aussi par l’apparition ou l’augmentation des douleurs. L’objectif du projet consiste à évaluer des symptômes associés à la douleur, et tester des candidats médicaments pour réverser ces symptômes (allodynie / hyperalgésie tactile et thermale, hyperalgésie musculo-squelettique) dans un modèle de souris de drépanocytose (communément appelées souris SCD, pour sickle cell disease). Les douleurs et les traitements seront évalués en condition standard, et suite à un protocole de crise vaso-occlusive.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Note de l'OXA. Le formulaire européen demande les bénéfices « susceptibles de découler » du projet. Il appelle donc une projection, et il l'obtient : ce que le laboratoire écrit ici est ce qu'il espère, avant d'avoir commencé. Deux chercheuses ont repris six corpus d'études précliniques déjà menées et pesé les dommages réellement infligés aux animaux contre les bénéfices cliniques réellement obtenus : moins de 7 % de ces études ressortaient défendables (Pound et Nicol, 2018).
Est-ce « inutile » ou « nécessaire » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
La drépanocytose, touchant tous les organes, peut causer de nombreuses complications. Les crises vaso-occlusives (CVO), se traduisant par des épisodes de douleurs souvent très intenses, constituent le symptôme majeur de cette maladie. Le traitement repose sur la prise de médicaments antalgiques en cas de douleurs intenses, mais peut nécessiter une hospitalisation lors des crises (notamment chez les enfants). Il n’existe à ce jour pas de traitement de fond satisfaisant de cette pathologie ; en cas de CVO très fréquentes, un traitement de fond reposant sur des transfusions ou la prise d’un traitement médicamenteux peut être proposé, mais ce traitement est accompagné d’importants effets secondaires parfois graves (aussi est-il proposé uniquement dans les formes les plus graves de la pathologie). Il apparait donc nécessaire de développer de nouveaux traitements qui permettraient de soulager les douleurs ressenties par les patients atteints de drépanocytose, voire de diminuer la fréquence de leurs crises, et ainsi d’améliorer leur qualité de vie. Ce projet permettra d’évaluer l’efficacité antalgique de candidats médicaments dans un modèle murin de drépanocytose.
Nuisances prévues, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Note de l'OXA. La formule « en règle générale » autorise une réponse générale, et c'est l'un des points sur lesquels les examens de qualité trouvent ces documents défaillants. Un examen publié en 2018 a établi que les résumés allemands et britanniques décrivaient mal ce qui est fait aux animaux et ce que ceux-ci pourraient éprouver (Taylor et al., 2018). L'adoption d'un modèle commun européen a nettement amélioré le premier point, à peine le second (Taylor et al., 2024).
Le droit d'accès aux documents · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Une phase d’administration (durée de l’ordre de la minute) sera réalisée (principalement 1 fois (2 fois max) par jour; pendant 1 à 6 semaines en fonction de la spécificité du traitement). Les animaux seront soumis à des tests comportementaux permettant d’évaluer leur comportement général ainsi que leur seuil de réponse à des stimulations tactiles ou thermiques, et leur force musculaire. Ces tests dureront de 15 secondes à 5 minutes environ. Ils seront répétés maximum 8 fois en 2 semaines. Dans le cas des CVO, le déclencheur sera une exposition à un air moins concentré en oxygène pendant 3 h ou une exposition à une température ambiante de 10°C pendant 1 h. Les tests comportementaux seront réalisés 1 fois avant le déclenchement puis 3 fois en 24 h. Il n’est pas prévu de prélèvement sanguin en cours d’étude dans ce projet ; cependant, si cela devait s’avérer nécessaire, 1 seul microprélèvement veineux sera réalisé (durée de l’ordre de la minute).
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Note de l'OXA. C'est l'endroit du document où les animaux devraient apparaître, et c'est celui qui résiste. Un nouvel examen, publié en 2024, a mesuré que cinq des six éléments attendus sur les dommages prévus progressaient depuis l'adoption d'un modèle commun européen. Les effets indésirables sont le sixième : 41 % des résumés allemands et 48 % des britanniques les décrivent complètement. Les auteurs relèvent aussi des effets présentés comme minimes sur des projets classés modérés ou sévères (Taylor et al., 2024). Ces mesures portent sur l'Allemagne et le Royaume-Uni. L'examen de 2018 classait la France parmi les pays les moins bons pour l'identification, l'accessibilité et la qualité de ses résumés, sans les noter rubrique par rubrique (Taylor et al., 2018). Les résumés français suivent aujourd'hui le modèle européen commun.
Les animaux souffrent-ils ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les souris Townes et Berkeley développent une maladie de type drépanocytose. Celle-ci se traduit par une modification des paramètres sanguins (augmentation des leucocytes, diminution de l’hématocrite, de l’hémoglobine…) et l’expression d’hématies de type drépanocytaire. Ces souris sont viables et fertiles mais il est attendu (et sera évalué dans ce projet) qu’elles présentent des douleurs, notamment en réponse à une stimulation (tactile ou thermique) ou suite à l’induction d’une crise vaso-occlusive. Les tests comportementaux, et plus particulièrement l’exposition à des conditions d’hypoxie ou à une température de 10°C, peuvent entraîner un stress le temps du test. Ce stress sera diminué au maximum grâce à des périodes d’habituation aux différents dispositifs.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Note de l'OXA. Le formulaire demande de justifier ce sort, non de le décrire. L'analyse dommage-avantage que la directive impose au comité d'éthique porte sur « la souffrance, la douleur et l'angoisse » infligées aux animaux (directive 2010/63/UE, art. 38). Quand ce sort est la mise à mort, celle-ci ne figure donc pas parmi les dommages que le comité met en balance avec les bénéfices annoncés. L'OXA écrit « mise à mort » plutôt que « sacrifice », qui emprunte au registre du don consenti, ou « euthanasie », qui désigne une mort décidée dans l'intérêt de celui qui meurt.
Peut-on parler d'éthique en expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
A l’issue des procédures de ce projet, tous les animaux sont euthanasiés car ils présentent une pathologie chronique et non curable pouvant leur causer des douleurs (qui selon la littérature peuvent augmenter avec l’âge).
Application de la règle des "3R", selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
1. Remplacement
Note de l'OXA. La directive demande au résumé « une démonstration de la conformité » aux exigences de remplacement, de réduction et de raffinement (directive 2010/63/UE, art. 43). C'est donc le demandeur qui démontre sa propre conformité, dans le document même qui sollicite l'autorisation. Cette démonstration peut prendre la forme d'une affirmation qu'aucune méthode de substitution n'existe, que le document n'a pas à sourcer. Ces trois exigences sont par ailleurs subordonnées à l'objectif du projet : elles cherchent à remplacer les animaux dans un projet donné, elles n'interrogent pas ce projet.
Comment avancer vers la fin de l'expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Ce modèle ne peut pas être remplacé par des méthodes alternatives car les conséquences de la drépanocytose sont directement liées à l’impact de la présence d’hématies anormales sur la fonction de divers organes, et l’apparition des douleurs est fortement dépendante de certaines conditions (stimuli tactiles, thermiques, crises vaso-occlusives). Ces conditions spécifiques ne peuvent actuellement pas être reproduites in vitro, et l’étude de l’efficacité des traitements anti-douleur ou de la thérapie cellulaire nécessite l’utilisation d’animaux présentant cette pathologie. Cependant, dans la majorité des cas les traitements médicamenteux étudiés dans le cadre de ce projet ont été sélectionnés au cours d’études in vitro et/ou in silico avant leur évaluation chez l’animal.
2. Réduction
Note de l'OXA. La réduction dont il est question ici porte sur le nombre d'animaux par groupe expérimental, calculé pour que l'analyse statistique tienne. Le total annoncé dans la fiche est une estimation portant sur une autorisation de cinq ans au maximum (code rural, art. R214-123) : il ne dit pas combien d'animaux seront effectivement utilisés, et il ne se rapporte pas à une année.
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Le nombre d’animaux utilisés pour chaque test sera optimisé de façon à intégrer dans une même expérience la relation dose/effet ou la comparaison par rapport à une substance de référence. Quand pertinent, un groupe contrôle négatif (souris HbAA, exprimant des gènes normaux) pourra être ajouté. Un effectif acceptable sera défini afin d’obtenir une puissance statistique suffisante pour interpréter les résultats de façon correcte, évitant ainsi une répétition des tests. En fonction des paramètres étudiés (dans le cadre des différentes évaluations de douleurs), les tests paramétriques ou non paramétriques pertinents seront appliqués. Aussi, autant que cela sera possible sans affecter le bien-être des animaux, des prélèvements sanguins en cours d’étude seront envisagés, permettant ainsi de collecter des données biochimiques sur la molécule testée sans utiliser un plus grand nombre d’animaux.
3. Raffinement
Note de l'OXA. Le raffinement nomme une amélioration technique de la procédure, sans dire ce qu'elle change pour l'animal qui la subit. La réglementation impose d'atténuer la douleur, dans une limite qu'elle inscrit elle-même : « pour autant que cela soit compatible avec la finalité de la procédure expérimentale » (code rural, art. R214-109). Ce qui reste de souffrance après cette limite est autorisé. Le raffinement ne porte par ailleurs que sur la procédure : les souffrances de la captivité elle-même, confinement, bruit, lumière, manipulations d'entretien, ne relèvent d'aucun des trois R.
La réglementation est-elle « très stricte » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Le raffinement des méthodes expérimentales pour réduire au maximum la souffrance animale est mis en oeuvre grâce à l’utilisation de points limites clairement établis, permettant d’euthanasier tout animal présentant des signes de souffrance ou d’angoisse dépassant le cadre de l’étude. En cas de doute sur l’état général de l’animal, une évaluation approfondie sera réalisée quotidiennement jusqu’au retour aux paramètres physiologiques normaux (ou attendus) ou jusqu’à atteinte des points limites. Un formulaire interne spécifique à l’espèce sera alors complété. Il intègre l’aspect général, l’aspect du pelage, des yeux, la posture, les réactions de l’animal quand il est approché ou stimulé, la respiration, l’appétit, le poids, l’état d’hydratation, les tremblements ou les convulsions, la présence de plaie, de tumeurs ou autres évènements imprévisibles. Ce formulaire de suivi des points limites permet de prendre les bonnes décisions en évitant toute souffrance animale. Il est aussi mis en place un enrichissement complet dans l’hébergement des animaux (e.g. sous la forme de jouets, litière, objets de nidification, objets à ronger ou mastiquer, présence de congénères…). Ce projet est en développement dans notre établissement utilisateur, et une évaluation interne impliquant la cellule de bien-être animal sera demandée afin de permettre de réévaluer et d’adapter a posteriori la catégorie éthique et les méthodes de raffinement, si pertinent.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Note de l'OXA. Le dossier d'autorisation demande de justifier l'origine des animaux, leur espèce, leur nombre estimé et leur stade de développement (arrêté du 1er février 2013, art. 5). La justification attendue est technique : elle porte sur l'adéquation de l'espèce à l'objectif poursuivi. Ce que l'appartenance à une espèce autorise à faire subir à un individu est une question morale, et le formulaire ne la pose pas. L'appartenance à une espèce, prise seule, ne fonde pourtant pas de différence de statut moral entre des individus également capables de souffrir.
Spécisme et expérimentation animale · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les modèles étudiés dans le cadre de ce projet ont été choisis car sont des modèles transgéniques permettant de reproduire la drépanocytose chez la souris. Ces 2 modèles sont bien caractérisés dans la littérature. Ces animaux seront utilisés à l’âge adulte (il est notamment prévu de commencer les études autour de l’âge de 4 mois) car les douleurs sont décrites comme de plus en plus importantes avec l’âge.