Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 22/09/2023
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-876590)
500 souris vont être utilisées, toutes tuées à l’issue, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance léger. Elles reçoivent des gavages oraux répétés, d’abord des antibiotiques pendant quinze jours puis une transplantation de microbiote issu d’animaux âgés, et subissent des contentions pour la pesée et la collecte de selles, avec une perte de poids et des diarrhées attendues. Les souris perdant plus de 20 % de leur poids sont mises à mort, les autres tuées à la fin pour prélever des échantillons. Le porteur indique que le remplacement n’est pas applicable, la culture in vitro ne reproduisant pas l’écosystème du microbiote, et renvoie les retombées à de futures approches contre la fragilité liée à l’âge.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
L’ objectif de ce programme de recherche est le suivant : évaluer si le vieillissement du microbiote est associé à l’émergence de phénotype pathogène et s’il peut directement initier un syndrome de fragilité chez son hôte.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Cela permettra la découverte éventuelle de déterminants bactériens responsables de l’apparition du syndrome de fragilité lié à l’âge, et d’une meilleure compréhension de la réponse de l’hôte à ce vieillissement du microbiote, afin d’envisager de nouvelles approches gérobiotiques.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Il y aura des contentions sur animal vigile pour peser les animaux et collecter des selles fraiches (max. 5 min par animal, 2 fois maximum par semaine). Nous ferons du gavage oral, avec du matériel/volume adapté au modèle souris, et le geste sera réalisé par du personnel expérimenté. Les gavages pourront être quotidiens pendant 15jours pour délivrer des antibiotiques, et une seule fois pour transférer du microbiote.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Perte de poids, diarrhée
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Mise à mort pour collection d’échantillons nécessaire aux analyses ultérieures (par exemple moléculaire).
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Le recours à l’expérimentation animale dans le cadre de cette étude se fait après de nombreuses études in vitro dans des modèles cellulaires montrant l’importance de la relation entre le microbiote intestinal et l’hôte au cours du vieillissement. Le principe de remplacement n’est pas applicable à ce projet, car les études in vitro ne reproduisent pas l’écosystème complexe dans lequel se trouve le microbiote et par conséquent ne permettent pas l’obtention de résultats scientifiques exploitables et pertinents dans le contexte du vieillissement chez l’Homme. L’utilisation d’animaux pour réaliser des expérimentations de transplantation est donc cruciale pour élucider le rôle causatif des modifications du microbiote dans la physiopathologie du syndrome de fragilité lié à l’âge.
2. Réduction
Les expériences sont organisées de manière à réduire au maximum le nombre d’animaux. De plus, nous avons déjà validé certaines de nos approches expérimentales in vitro permettant d’optimiser l’utilisation des animaux. Les rongeurs utilisés sont consanguins et de même âge réduisant la variabilité entre les animaux et donc le nombre nécessaire pour obtenir des résultats fiables. Nos résultats sur des projets antérieurs ont permis de valider que des lots de 10 souris permettent d’acquérir des données fiables.
3. Raffinement
Le bien-être de l’animal sera pris en compte grâce à l’enrichissement de leur environnement (coton + nid dans la cage) et sans isolement . Les expérimentateurs ont reçu une formation garantissant également les bons gestes lors de la manipulation des animaux (livret de compétences). De façon strict et spécifique au projet, Les animaux seront pesés afin de vérifier qu’il n’y ait pas de perte de poids supérieure à 20% qui correspond au point limite nécessitant l’euthanasie. La souffrance éventuelle des animaux sera minimisée autant que possible et nous interviendrons immédiatement et de manière appropriée dès le moindre signe de souffrance. Tout animal présentant un aspect inhabituel; prostration, pelage terne et hirsute, traces de blessures infligées par les autres animaux; sera isolé. Il fera l’objet d’une attention accrue et bénéficiera de soins appropriés (désinfection des plaies par exemple ou accès facilité à la nourriture). Si aucune amélioration de son état n’est constatée au bout de 24h, ou s’il atteint la perte de poids limite de 20%, il sera mis à mort pour éviter toute souffrance inutile.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
La souris est un modèle de choix dans l’utilisation de modèles qui reproduisent la complexité des maladies digestives chez l’Homme. Des études récentes ont bien démontré que le transfert d’un microbiote d’un donneur malade à un receveur sain pouvait modifier le métabolisme de l’hôte du receveur. C’est pourquoi nous avons choisi ce modèle, car il s’agit de répondre à notre objectif principal de recherche, à savoir la contribution du microbiote âgé sur le développement du syndrome de fragilité. Les animaux seront utilisés principalement à l’âge adulte pour permettre la bonne maturation des fonctions de barrières de la muqueuse intestinale (production de mucus, production de peptides antimicrobiens, mise en place efficace des jonctions serrées).