Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 08/03/2024
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-668941)
Traitées 21 jours par deux médicaments anticancéreux, avec sept injections intrapéritonéales et une administration orale un jour sur deux, 96 souris mâles seront toutes tuées pour prélever leurs organes reproducteurs, dans des procédures d’un niveau de souffrance modéré. Le porteur indique que la toxicité peut provoquer une perte de poids et une inactivité, et que l’administration orale peut entraîner des fausses routes, les animaux perdant 15 % de leur poids étant retirés du projet et tués. Le projet vise à décrire l’effet de ces médicaments sur la production de spermatozoïdes, à partir d’une hypothèse sur l’augmentation des mutations. Sur le remplacement, le porteur se borne à affirmer que la spermatogenèse est trop complexe pour un système in vitro.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Dans ce projet, nous examinerons les effets de 2 médicaments anticancéreux sur la différenciation de cellules sexuelles mâles (spermatogenèse). Nous visons à révéler comment les médicaments anticancéreux affectent la division cellulaire et aussi comment ils affectent la réparation de l’ADN. Nous étudions les médicaments qui ont reçu beaucoup d’attention en raison de leur efficacité dans le traitement du cancer, mais les mécanismes de leur action sur la spermatogenèse normale ne sont pas bien compris. Nous émettons l’hypothèse que les perturbations des mécanismes épigénétiques (qui modifient l’expression des gènes sans altérer la séquence génétique) conduiront à une augmentation des mutations. L’objectif de ce projet est de révéler l’impact des médicaments épigénétiques sur la spermatogenèse normale.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Ce projet permettra de mieux comprendre le rôle des médicaments épigénétiques sur la spermatogenèse normale afin de développer de meilleures stratégies pour les thérapies anticancéreuses. Nous identifierons également les cibles potentielles affectées par ces médicaments.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Les animaux seront traités avec 2 médicaments , séparément, pendant 21 jours. L’administration de la première molécule se fait par injection intra-péritonéale (durée de l’injection : 30 secondes) à la fréquence d’un jour sur 3 (au total 7 injections). le traitement au second médicament se fera par administration orale (durée de l’administration: 30 secondes), à la fréquence d’un jour sur 2, pendant 21 jours.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
L’injection intrapéritonéale et la toxicité du médicament 1 pourrait avoir des effets indésirables, tels que la douleur et le stress. Nous avons réduit le nombre d’injections, de sorte que les souris ne recevront que 7 injections au total. L’administration orale du second médicament pourraient induire des effets négatifs tels que des fausses-routes. La toxicité de la deuxiéme molécule pourrait induire une perte de poids, une inactivité. Des points limites adaptés sont mis en place.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Tous les animaux sont euthanasiés à la fin du projet: les organes reproducteurs seront prélevés pour les analyses moléculaires.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Le modèle de la souris est couramment utilisé dans les études sur la méiose. Nous ne pouvons pas reproduire les effets sur le système reproducteur dans un système in vitro en raison de la complexité de la spermatogenèse et du développement embryonnaire, ce qui n’est possible qu’in vivo.
2. Réduction
Nous réduirons le nombre d’animaux en utilisant un nombre minimal de souris pour garantir des résultats statistiquement significatifs. La méthode d’injection du premier médicament chez l’animal nécessite 12 animaux par lot (traités et contrôles), en raison du risque d’effets indésirables, liés à sa toxicité. Pour l’exposition au second médicament, nous utiliserons deux groupes de 12 souris ( traités et contrôles), ce qui est suffisant pour les tests statistiques, car les souris consanguines donnent des résultats plus homogènes. Nous prévoyons de répéter une fois l’expérience.
3. Raffinement
Les composés seront administrés par des personnes formées et compétentes dans cette procédure technique. Les souris ne seront traitées qu’un jour sur deux, ou un jour sur trois ,pendant 21 jours, ce qui permettra de réduire le stress dû à l’administration. Application des points limites : perte de poids maximale de 15% (comparaison avec le groupe contrôle), les animaux seront pesés 3 fois par semaine. Pour minimiser les effets indésirables, les animaux seront hébergés par lots de 4. Si l’animal montre des signes de souffrance (selon notre grille de suivi des points limites) le traitement sera interrompu et l’animal sera euthanasié. Normalement, les doses de médicament sont faibles (15 fois inférieur à la dose maximale) et les souris la tolèrent bien. Si le traitement provoque des effets limités tels qu’une perte de poids corporel, une réduction des activités et que l’animal montre des signes de souffrance, le traitement sera interrompu.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Nous utiliserons une souche de souris pour laquelle de nombreuses données publiques sont disponibles. Nous utiliserons le mâle adulte parce que la méiose est bien établie chez le mâle adulte et que les souris sont sexuellement matures pour produire des gamètes. Le modèle souris est l’un des meilleurs pour étudier la méiose et la recombinaison homologue parce que le mécanisme est très conservé entre l’homme et la souris. Nous utiliserons des souris mâles adultes de 5 semaines car les jeunes animaux sont plus sensibles aux effets. Nous utiliserons des animaux adultes lorsque la première vague de spermatogenèse sera accomplie et que les animaux seront capables de produire des spermatozoïdes.