Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 24/12/2025
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-164613)
Pour caler la dose de nanoparticules d’or et la fréquence des tirs laser qui chauffent une tumeur jusqu’à la détruire, 25 souris immunodéprimées vont être utilisées dans des procédures impliquant un niveau de souffrance modéré. Chacune reçoit une greffe de mélanome humain, une injection de nanoparticules dans la tumeur, une irradiation infrarouge, jusqu’à deux prélèvements de sang et vingt-quatre heures seule en cage métabolique. Le porteur annonce comme suites une perte de poids, une déshydratation, une ulcération et une coloration de la peau, et écrit que chaque animal sera son propre témoin pour réduire les effectifs. Le suivi de la tumeur au pied à coulisse dure jusqu’à quatre mois, ou s’arrête quand le volume tumoral atteint la taille limite qui déclenche la mise à mort.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Les cancers de la peau de type mélanome concernent près de 80 000 patients par an en France. Le traitement chirurgical demeure le standard dans la majorité des situations mais il est associé à un impact physiologique et physique indéniable pour ces tumeurs situées principalement sur les zones exposées au soleil, tel que le visage. Les immunothérapies (activation du système immunitaire du patient) ont montré des résultats spectaculaires au cours de ces dix dernières années. En effet, les immunothérapies induisent des taux de réponse jusque-là inégalés chez les patients atteints de mélanome métastatique . Malheureusement, certains patients demeurent insensibles aux immunothérapies notamment par des mécanismes de résistances innées. De plus, d’autres patients, pourtant répondeurs au traitement en première intention, présentent des évolutions tumorales secondaires souvent liées à des mécanismes de résistance acquis.Dans ce contexte général, les principaux objectifs de ce projet sont d’étudier les effets de la photothérapie thermique plasmonique (PPTT, des molécules synthétiques qui absorbent l’énergie d’un laser proche infra rouge pour tuer les cellules tumorales en dégageant de la chaleur) sur le mélanome avancé métastatique utilisée seule ou en combinaison avec une immunothérapie .Ce projet cherche à déterminer l’impact in vivo de la combinaison de la PPTT des nanoparticules d’or injectées dans les tumeurs et une immunothérapie . Avant de commencer l’étude préclinique combinant traitement PPTT et immuno thérapie sur des souris humanisées ( souris qui ont la même réponse immunitaire qu’un humain) , nous devons en premier lieu réaliser une étude préliminaire sur des souris immunodéprimées ( le même fond génétique que les souris qui seront humanisées dans le projet final ) porteuses d’un mélanome humain ,afin de valider la concentration des volumes de nanoparticules d’or à injecter , la fréquence d’injection ainsi que les effets de l’hyperthermie sur ces tumeurs. L’objectif est d’évaluer l’impact direct de la PPTT dans un modèle murin porteur de mélanome humain.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
L’objectif est d’évaluer l’impact direct de la photothérapie par laser sur des souris porteuses de tumeurs cutanéees humaines. Après avoir gréffé sur la peau les cellules tumorales, les souris seront traitées ou non à l’aide dd’un composé de nanoparticules d’or à différentes concentrations et l’évolution de la croissance tumorale sera suivie au pied à coulisse digital afin d’avoir des des données préliminaires sur une étude à plus grande échelle combinant le traitement photothérapie et l’immunothérapie sur souris humanisées ce qui permettera de raffiner la procédure d’une part et d’optimiser le volume d’injection de nanoparticules et la fréquence optimum du traîtement laser
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
induction tumorale : 10mn Injection de nanoparticule : 10mn irradiation laser :10mn Prélèvement sanguin : 2 prélèvements de 5mn pour 20 souris , 1 prélèvements de 5mn pour 5 souris Mesure tumorale 10mn par animaux ,3 fois par semaine pendant 4mois ou jusqu’à que le volume total des tumeurs ai atteint la taille limite .hébergement individuel avec en cage métabolique 24h avec maintien de contact visuel et auditif entre individu.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
perte de poids, déshydratation, pousse tumorale et modifications cutanées apparaissant avec le traitement (ulcération, coloration de la peau, inflammation).nuisances liées à l’anesthésie gazeuse, hématome lié aux prélèvements sanguins , isolement de 24h en cage métabolique
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
L’ensemble des animaux de l’étude seront mis à mort afin de récupérer les tissus et les analyser par la suite
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Afin de pouvoir évaluer de nouvelles thérapies, les modèles animaux sont un passage obligatoire après l’évaluation in vitro. Le rongeur est le modèle le plus utlisé actuellement pour l’évaluation de nouvelles thérapies en l’occurence sur cette étude cela sera des souris.De plus pour des raisons se rapprochant du clinique et donc de l’humain nous devons uriliser des souris immunodéprimées car cela sera le modèle utilisé pour humanisation à la suiite de cette étude préliminaire , or il n’existe à ce jour aucun autre modèle de rongeur humanisé.
2. Réduction
Nous avons déterminé 5 souris par groupe car c’est le nombre minimum de souris nécessaire pour avoir des résultats significatifs. De plus nous avons fait le choix que chaque animal soit son propre contrôle afin de réduire le nombre de groupe et donc le nombre d’animaux.
3. Raffinement
Pour le suivi tumoral, des mesures au pied à coulisse seront réalisées tous les 2 jours avant traitement puis 3 fois par semaine. C’est une technique non invasive qui permet de suivre la croissance tumorale sans avoir à sacrifier les animaux. La procédure est indolore pour l’animal.En ce qui concerne l’injection de nanoparticules, elle se fera en intratumorale . Les deux doses testées ayant déjà été utilisées chez l’animal nous savons qu’elles sont bien tolérées. Enfin, en ce qui concerne l’irradiation infra-rouge, elle se fera sur animal anesthésié par voie gazeuse avec injection au préalable d’analgésique en sous-cutanée pour palier à la douleur que pourrait engendrer l’hypethermie.Les souris seront hébergées dans des cages adaptées à l’intérieur des salles d’hébergement de l’animalerie où l’ambiance est parfaitement contrôlée (hygrométrie, température, ventilation, bruit). De plus, les cages sont équipées d’enrichissement pour limiter le stress.Afin que l’immunité défaillante des animaux ne s’exprime pas, ils seront hébergés en portoir ventilé et le change est effectué sous hotte avec du matériel autoclavé.Lors de chaque étape du protocole pouvant engendrer un stress ou une douleur (double greffe , injection de nanoparticules et irradiation laser), les animaux seront anesthésiés sous anesthésies gazeuse et de l’anamlgésique sera injectée en sous-cutanée. Cette injection pourra être renouvelée 12 heures plus tard si nécessaire (signes de douleur chez l’animal).Enfin pour éviter des hématomes liés aux prélèvement sanguin , le site de prélèvement sera comprimé grace à une compresse stérile jusqu’à l’arrêt du saignement.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Afin de pouvoir évaluer de nouvelles thérapies, les modèles animaux sont un passage obligatoire après l’évaluation in vitro. Le rongeur est le modèle le plus utlisé actuellement pour l’évaluation de nouvelles thérapies en l’occurence sur cette étude cela sera des souris.De plus pour des raisons se rapprochant du clinique et donc de l’humain nous devons uriliser des souris immunodéprimées car cela sera le modèle utilisé pour humanisation à la suiite de cette étude préliminaire. Animaux jeunes adultes de 6 à 8 semaines. Les prises de greffe sont plus homogènes sur des individus jeunes.