Carnivores

Constituer le dossier d'autorisation de mise sur le marché de produits vétérinaires impose des données recueillies sur l'espèce visée, en l'occurrence le chat. 60 chats vont être utilisés dans des procédures impliquant un niveau de souffrance léger, 48 réutilisés ensuite pour d'autres études et 12 orientés vers l'adoption. Ils sont pucés sous anesthésie, reçoivent une ou deux injections sous-cutanées du produit testé, passent au scanner jusqu'à une fois par semaine sous anesthésie, subissent une biopsie du site d'injection en fin d'étude et des prises de sang jusqu'à un jour sur deux, avec une mise à jeun de six à seize heures avant chaque anesthésie. Le porteur présente l'imagerie comme un moyen de limiter le nombre d'animaux, alors qu'elle ajoute à chaque individu une anesthésie hebdomadaire et une exposition répétée aux rayons X.

Objectifs

Ce projet a pour objectif d’évaluer l’inflammation sous cutanée de nouveaux produits vétérinaires chez le chat, destinés aux traitements préventifs ou curatifs de diverses pathologies de l’espèce. Ces études sur l’espèce cible ont pour but d’étudier les signes cliniques d’intolérance suite à une administration unique d’un produit donné. Ce modèle d’innocuité in vivo est représentatif des modalités d’administration du futur produit chez l’animal traité. L’évaluation de la réaction inflammatoire au site d’injection sera suivie par imagerie médicale (scanner rayon X), ce qui permettra de collecter des données morphologiques précises comme la volumétrie de l’inflammation des tissus du site d’administration. Un suivi clinique général sera mis en place quotidiennement, et un suivi clinique plus spécifique avec pesée sera mis en place régulièrement. De plus, un suivi spécifique au site d’injection sera mis en place quotidiennement après injection, avec une grille de scoring et une palpation, ainsi qu’avec une prise de température. De plus, des prélèvements sanguins pourront être réalisés en cours de phase ou des prélèvements histologiques en fin de phase expérimentale. Les animaux seront hébergés en groupes sociaux, dans des salles avec à disposition des perchoirs et divers jouets. Un programme d’habituation des animaux sera mis en place à leur arrivée afin d’acclimater les animaux à leur nouvel environnement, aux conditions d’hébergement et aux procédures expérimentales. Des points limites seront mis en place de telle sorte qu’en cas d’apparition de signes cliniques ayant des répercussions significatives sur l’animal, des mesures soient rapidement prises pour limiter leur souffrance.

Bénéfices attendus

Ce projet permettra d’évaluer l’inflammation de futurs produits vétérinaires chez le chat, destinés aux traitements vaccinaux préventifs ou curatifs de diverses pathologies de l’espèce. Cela permettra d’évaluer la tolérance locale et le suivi de l’inflammation post-vaccination par imagerie scanner, limitant ainsi le nombre d’animaux utilisé (plusieurs sessions d’imagerie par animal, suivi dans le temps pour un même animal) tout en ayant une approche plus pertinente du suivi (l’imagerie permet d’analyser l’inflammation de manière plus fine qu’une simple palpation).

Procédures

Puçage des animaux (sous-cutanée) sous anesthésie fixe ou volatile – 1 à 2 minutes. Tonte du site d’administration si nécessaire. Administration unique sous-cutanée du produit à tester et/ou du produit contrôle (1 à 2 injections par animal) – 1 à 2 minutes. Prise de température quotidienne par télémétrie, suivi quotidien de l’état de santé général (morbidité, mortalité), suivi pondéral hebdomadaire au minimum, quotidien si l’état de santé le nécessite, suivi quotidien du site d’injection avec palpation et grille de scoring. Acquisitions scanner CT hebdomadaire au maximum, sous anesthésie (volatile ou fixe) – Quelques minutes. Biopsie du site d’injection, à la fin de l’étude, sur animaux anesthésiés (volatile ou fixe) – Quelques minutes. Un traitement analgésique et antibiotique se fera avant biopsie afin d’éviter tout risque d’infection/douleur. Le site sera aseptisé et du matériel stérile sera utilisé afin de limiter le risque d’infection. Prélèvements de sang si nécessaire, au maximum 1 fois tous les 2 jours, en respectant les volumes de prélèvements éthiques recommandés – quelques minutes. Pour limiter le risque de vomissements, les animaux seront mis à jeun entre 6 et 16h avant chaque anesthésie.

Impact sur les animaux

Les effets indésirables sont liés aux anesthésies (hypothermie, bradycardie, arythmie, arrêt cardio-respiratoire, vomissements), à l’exposition répété aux rayons X (au moins une fois par semaine), à la mise à jeun (entre 6h et 16h), aux prélèvements sanguins (hémorragie, hématome) et aux injections sous-cutanées (hématome, inflammation locale). Des mesures préventives seront mises en place afin de limiter ces effets indésirables (mise en place de tapis chauffant / lampe chauffantes, surveillance du rythme cardiaque et respiratoire pendant l’anesthésie ; utilisation d’aiguilles stériles et adaptées pour les prélèvements et administrations). Un stress inhérent à toute manipulation des animaux est également attendu mais sera limité grâce à une phase d’habituation/acclimatation, un hébergement collectif et l’ajout d’enrichissement adapté à l’espèce (paniers, plateformes, paniers, jouets, …).

Devenir

Une partie des animaux sera réutilisée pour de futures études dont l’objectif est différent des études de ce projet afin de ne pas créer d’interférence. L’autre partie des animaux rentrera dans un processus d’adoption. Le futur de chaque animal sera évalué au cas par cas et approuvée par la structure chargée du bien-être animal ou par le vétérinaire en fonction de leur état clinique.

Remplacement

A ce jour, aucune alternative in-vitro à l’expérimentation animale ne permet de mimer les mécanismes physiologiques à l’échelle d’un organisme entier. Ce projet a pour objectif d’évaluer l’inflammation sous-cutanée de nouveaux produits vétérinaires chez le chat. Les mécanismes physiologiques inflammatoires sont complexes et nécessites d’être évaluer sur l’espèce cible avant la mise sur le marché des produits testés.

Réduction

Le nombre d’animaux inclus dans chaque étude et par groupe a été évalué en fonction de l’objectif du projet. De façon à réduire au maximum le nombre d’animaux et éviter l’utilisation de groupe contrôle non injecté, chaque animal sera son propre témoin, à partir de données récoltées avant administration des produits (acquisition scanner CT, prises de sang, poids, température). La première étude prévoit un seul groupe de 12 animaux afin de tester un seul produit et le comparer à une étude précédemment réalisée dans les mêmes conditions. Cela permet de ne pas avoir à utiliser des animaux dont les données ont déjà été récoltés précédemment (utilisation d’un seul produit de référence pour toutes les études réalisées de la même manière). Les 2 études suivantes pourront avoir 1 ou 2 groupes : au minimum un groupe injecté avec le produit à tester comparé avec un groupe référence d'une précédente étude ou un groupe injecté avec le produit à tester comparé avec un groupe injecté avec un contrôle différent des précédents (produit déjà sur le marché, adjuvant, …). Ainsi, soit 12 animaux par étude seront prévus (1 groupe) soit 24 animaux (2 groupes de 12 animaux).

Raffinement

Les chats seront hébergés en groupe, répartis selon leur sexe (une salle dédiée aux mâles et une salle dédiée aux femelles). Une période d’acclimatation minimale de 14 jours sera respectée. Pendant cette période, une période d’habituation sera mise en place : les animaux bénéficieront quotidiennement de moments de jeu et de contacts sociaux avec le personnel afin de limiter le stress des animaux en manipulation. Cette phase d’habituation consiste également à caresser, porter, déplacer les animaux (vers la salle de manipulation pour les habituer à la caisse de transport, à la salle, aux actes techniques) et réaliser la contention. Cependant, pendant les premiers jours, les animaux ne seront pas trop stimulés afin de s’habituer aux locaux et au personnel. Un enrichissement adapté à l’espèce sera également mis en place (paniers, plateformes, paniers, jouets, …). Lors des anesthésies, du gel oculaire sera appliqué et les animaux seront maintenus dès que possible sur un tapis chauffant / sous lampe chauffante jusqu’au réveil complet. Un suivi clinique général sera mis en place quotidiennement afin de détecter tout signe clinique anormal. Des pesées hebdomadaires seront réalisées afin de suivre l’évolution pondérale des animaux. Si besoin, un suivi clinique renforcé sera mis en place (tous les 2/3 jours voire quotidiennement en fonction de l’état de santé des animaux). Enfin, un suivi quotidien des sites d’injections sera mis en place jusqu’à 21 jours post administration avec palpation et grille de scoring, ainsi qu’une prise de température (via une puce thermique). Tous les actes réalisés seront faits par du personnel habilité et formé.

Choix des espèces

Le chat a été choisi dans ce projet car il s’agit de l’espèce cible des produits testés. Il est nécessaire de réaliser des études chez l’espèce cible pour les produits vétérinaires avant leur mise sur le marché afin d’observer les interactions entre les organes impliqués et les effets physiologiques du futur produit vétérinaire chez l’animal. Des données concernant l’espèce cible doivent être fournies au dossier d’autorisation de mise sur le marché. L’âge dépend des besoins pour les études qui sont à effectuer. Ces besoins dépendent de l’objectif de l’étude et du produit final et répondent aux exigences expérimentales d’utilisation du produit mis sur le marché. Les animaux ont minimum 6 mois. Cet âge est représentatif d’un état physiologique stable et qui s’apparente à celui de l’adulte chez l’espèce cible.

Destinés à être réutilisés dans un autre projet à l'issue, 6 chiens vont être utilisés dans des procédures que le porteur classe en souffrance légère, aucun n'étant tué. Chacun avale par gavage un comprimé contenant du sulfate de baryum, puis passe deux anesthésies générales dans la même journée pour deux scanners de dix minutes, l'opération étant répétée huit jours plus tard. Le jeûne imposé la veille au soir et maintenu entre les deux scanners porte à vingt heures la privation de nourriture, et le porteur signale une possible constipation ou de faibles douleurs abdominales. Des tests in vitro et ex vivo ont déjà établi que ces comprimés adhèrent aux zones visées, le chien étant retenu pour son anatomie digestive proche de celle de l'être humain, sa "facilité de travail" et sa "résistance au jeun importante".

Objectifs

L’objectif de ce projet est de prouver la capacité de ciblage des comprimés développés. Ces comprimés présentent à la fois la capacité d'être adhérent à la paroi de l'intestion mais ils sont également sensible au pH, leur permettant ainsi de venir adhérer sur la paroi d’une zone précise et prédéfinie du système digestif. Les applications de ces comprimés sont nombreuses. Ils sont notamment pertinents pour venir cibler les maladies du tube digestif, en proposant une action locale ; mais ils peuvent également présenter un intérêt pour améliorer l’absorption de principes actifs à fenêtre d’absorption étroite. Différents tests in vitro et ex vivo ont déjà été réalisés permettant de prouver les capacités de ces comprimés à adhérer aux zones d’intérêt. Afin de démontrer leur efficacité, nous souhaitons maintenant tester leur précision de ciblage in vivo.

Bénéfices attendus

Ce projet permettra d’attester de la fiabilité des comprimés mucoadhésifs développés, c’est-à-dire de leur capacité à adhérer à des zones précises du système digestif. Les applications de ce type de formes pharmaceutiques sont multiples. En effet, l'adhésion aux parois intestinales peut permettre (1) le ciblage de sites spécifiques, (2) l’augmentation du temps de résidence sur un site de libération défini, (3) ou l’augmentation des interactions entre la forme pharmaceutique et les différentes muqueuses permettant l’augmentation du temps de délivrance du produit. Afin de cibler le système digestif, l’administration des médicaments doit se faire par voie orale. La voie orale est la voie généralement privilégiée pour l’administration de médicaments car elle présente de nombreux avantages. Elle permet une administration du médicament simple, sûre, efficace et garantit un meilleur respect des thérapies par les patients. De plus, elle bénéficie d’une documentation riche et a fait l’objet du développement d’outils de préformulation largement approuvés. Cependant, de nombreux facteurs limitent l’efficacité des traitements oraux, notamment le faible transfert de l'intestin au sang de certaines substances actives qui ne possèdent pas des propriétés de solubilité ou perméabilité suffisantes, le temps de vidange gastrique très court limitant l’absorption ou l’action locale de certaines substances actives au niveau gde l'estomac, ou encore la faible absorption de certaines substances actives présentant des fenêtres d’absorption intestinale étroites en raison d’un trop faible temps de résidence lié au transit gastro-intestinal. Dans ce contexte, les formes pharmaceutiques mucoadhésives peuvent être une solution pour améliorer le ciblage et le temps de résidence dans le tube digestif.

Procédures

Après administration du produit testé, les chiens seront anesthésiés pour de leur passage au scanner. L'induction consiste en une injection d'anesthésiant dans le muscle, puis l'animal est intubé dès qu'il perd conscience. L'injection ne dure que quelques secondes. Il est prévu de réaliser 2 scanners de 10 minutes dans la journée donc deux anesthésies. Les animaux seront mis à jeûn (solide) la veille au soir de chaque anesthésie-administration.

Impact sur les animaux

L'administration orale du comprimé provoque une désagrément de très courte durée. Les animaux seront mise à jeun (solide) la veille au soir de chaque anesthésie-administration. Une mise à jeun de 8H minimum est nécessaire pour éviter tout risque de fausse déglutition lors des anesthésies. De plus, l'estomac des animaux doit être vide afin d'éviter toute intéraction avec le bol alimentaire qui pourrait géner l'adhésion du comprimé, cela nécessite une mise à jeun de 4H, soit le temps de la vidange gastrique chez le chien. La mise à jeun sera maintenu entre les deux scanners puisque que ceux-ci ne sont espacés que de 4H. La durée totale entre le début de la mise à jeun et la reprise de l’alimentation sera de 20H. Les autres nuisances dûes au projet seront, l'administration du comprimé par gavage (très rapide), à l'induction de l'anesthésie (très rapide) avant chaque scanner. Ces nuisances seront subies à deux reprises pour chaque essai à 8 jours d'intervalles. . Le sulfate de baryum, ajouté à la formulation en tant qu’agent radio-opaque, est également une substance considérée comme sûre et les risques d’effets indésirables sont limités. Certains troubles gastro-intestinaux peuvent cependant parfois être observés comme une légère constipation ou de faibles douleurs abdominales si le chien rencontre des difficultés à éliminer la substance.

Devenir

Le projet étant peu invasif et ne nécéssitant pas d'euthanasie, les chiens pouront être réutilisés pour un autre projet

Remplacement

Différents tests in vitro et ex vivo ont déjà été réalisés permettant de prouver les capacités mucoadhésives de ces comprimés sur les zones d’intérêt. Afin de démontrer leur efficacité, nous souhaitons maintenant tester leur précision de ciblage in vivo. De ce fait, les formulations développées doivent être administrées selon la voie d’administration chez l’Homme, et ce sur des modèles animaux présentant des caractéristiques physiologiques au plus proches del'homme, tel que le Chien.

Réduction

Nous utiliserons au maximum 6 chiens pour ce projet. Ce nombre est jugé suffisant pour obtenir des données exploitable. Un essai correspond à l'administration des deux formulations à 8 jours d'intervalle sur 3 chiens. Il n'est pas obligatoire que les mêmes chiens soient réutilisés d'un essai à l'autre.

Raffinement

Les animaux seront observés quotidiennement après la mise à jeun et l'administration du comprimé. Une surveillance accrue sera mise en place de la première aneshésie jusqu'à la fin de la procédure de mise à jeun. En cas de besoin un vétérinaire sera joignable. Une pesée et un examen clinique seront réalisés chaque jour lorsqu'il y a des anesthésies puis une fois semaine pour s'assurer de la bonne clinique des animaux. Les animaux feront l'objet d'un conditionnement positif, basé sur des intéractions amicales avec les personnels en charge des soins, et l'administration de récompenses lors de différents exercices (monter sur la balance, s'immobiliser, se coucher, etc.), ceci afin de permettre des manipulations sans stress et avec un minimum de contraintes. Afin d’éviter tout stress des animaux durant l’administration des éléments d’essai, les animaux seront habitués à être manipulés sur une table d’auscultation et ils seront conditionnés à rester calmes quand le technicien doit réaliser les administrations. Tout au long (scanner) de l’intervention sous anesthésie générale, les paramètres physiologiques (fréquence cardiaque, bonne oxygenation) des animaux seront suivis.

Choix des espèces

Ce modèle présente des caractéristiques anatomiques, fonctionelles et de pH proche de l'homme. S'ajoute a ces arguments la facilité de travail avec le chien ainsi que sa résistance au jeun importante, ce qui permet de limiter les risques d’hypoglycémie. Les animaux seront des adultes ayant fini leur croissance afin d'avoir un système digestif et enzymatique mature.

28 chiens beagles adultes et en bonne santé vont être utilisés dans des procédures impliquant un niveau de souffrance léger, puis gardés au chenil expérimental. Chacun subit deux prises de sang et deux prélèvements d'urine, maintenu sur le dos dans une gouttière de contention pendant environ cinq minutes, et reçoit pendant une semaine de l'huile essentielle d'origan diluée ou un placebo. Aucun de ces chiens n'a d'infection urinaire, le projet mesurant l'activité du produit dans leurs urines et sa tolérance, non la guérison d'une maladie. Le porteur indique que les propriétés de l'origan ont déjà été évaluées in vitro et chez la souris, et qu'il est "nécessaire" de confirmer son effet dans l'espèce cible.

Objectifs

Contribuer à évaluer l'inocuité et l'efficacité de l'administration orale d'huile essentielle d'origan pour le traitement des infections urinaires, chez le chien

Bénéfices attendus

Si cette huile essentielle confirme son activité bactéricide ou bactériostatique dans urines de chiens traités, ce traitement pourrait permettre de disposer d'une alternative aux traitement antimicrobiens.

Procédures

Prélévements sanguins sur chiens vigiles (2 fois/animal à J0 et J7), temps de réalisation avec la compression environ 2 min. Prélèvements d’urine sur chiens vigiles placés dans un coussin mou de contention en forme de gouttière permettant de maintenir l'animal sur le dos (2 fois/animal à J0 et J7), temps avec le positionnement du chien allongé environ 5 min.

Impact sur les animaux

Les éventuelles nuisances attendues pourront être liées aux prélèvement de sang (formation d'un hématome en cas de prélèvements répétés) et d'urines (rougeur au point de ponction) à J0 et à J7. La nuisance attendue ici est donc considérée comme légère. L'huile essentielle d'origan sera administrée sur une période très courte, d'une semaine. Afin d'éviter tout effet irritatif sur la muqueuse buccale, la dose administrée sera diluée dans de l'huile de tournesol. Les nuisances éventuelles (quoique peu attendues) peuvent être l'apparition de diarrhées, de douleurs abdominales, de prostration ou de troubles généraux.

Devenir

Les chiens seront conservés et resteront dans leur milieu de vie habituel, c'est à dire en chenil expérimental

Remplacement

Les propriétés bactéricides de l’huile essentielle d’origan ont fait l’objet de nombreuses publications et sont dues à deux de ses composés, le carvacrol et le thymol. A ce stade, les propriétés de l’huile essentielle d’origan ont été évaluées in vitro et in vivo sur des modèles expérimentaux (souris) mais n’ont jamais été évaluées, chez le chien. Il est nécessaire de confirmer l'effet de l'origan dans l'espèce cible.

Réduction

Le projet implique 28 chiens adultes et sains de race Beagle (poids moyen 13 kg), répartis en deux groupes : traitement (6 femelles et 6 mâles, +1 animal en réserve de chaque sexe) et placebo (6 femelles et 6 mâles, +1 animal en réserve de chaque sexe). Il s'agit d'une expérimentation exploratoire et la variabilité du facteur étudié n'est pas connu. Ce nombre 6 a été déterminé pour permettre de mesurer la réponse attendue, et correspond au minimum recommandé d'après les guidelines de l'Agence Européenne du Médicament (EMEA) (Guideline on Good clinical practices VICH GL9 (GCP) (CVMP/VICH/595/98- Final), June 2000; Guideline on statistical principles for clinical trials for veterinary medicinal products (pharmaceuticals) – Rev.1 (EMA/CVMP/EWP/81976/2010 Rev.1).

Raffinement

Les chiens seront soumis à deux examens cliniques approfondis (à J0 et à J7). Les prélèvements urinaires et sanguins ont été réduits au minimum et seront réalisés par des vétérinaires habitués à ces gestes. Les chiens sont surveillés chaque jour. L’objectif est de réduire au minimum le stress généré par la sortie du lieu d’hébergement, vers le lieu où sera réalisée la procédure. Ainsi, des actions de renforcement positif seront mises en place en amenant régulièrement chaque animal dans la salle où sont réalisés les différents actes (examens cliniques, prises de sang et prélèvements urinaires), en le laissant au minimum 5 minutes sur la table d’examen, au cours desquels il sera caressé par le manipulateur qui lui parlera, puis avant de quitter la salle, quelques croquettes lui seront proposées. Par ailleurs, cette salle est connue des chiens de l’EU, car ils y sont régulièrement manipulés pour des actes non invasifs : peignage, coupe de griffes … Il ne s’agit donc pas d’un lieu nouveau. Les chiens seront amenés dans la salle d'examen et contenus par une des personnes en charge de leurs soins quotidiens, et donc connue de ces derniers.

Choix des espèces

Le chien est l'espèce cible. 28 chiens adultes avec 14 femelles et 14 males seront utilisés pour être certain d'obtenir in fine un minimum de 6 chiens de chaque sexe par groupe.

Destinés à être réutilisés dans d'autres études puis, pour une partie, proposés à l'adoption après évaluation comportementale, 100 chiens vont être rendus obèses et maintenus dans cet état pendant deux à trois ans. Les procédures sont déclarées en niveau de souffrance léger, alors que le porteur liste parmi les effets attendus l'apparition de troubles métaboliques, de douleurs articulaires, de pancréatite, de diabète et de troubles comportementaux. Chaque chien subit une prise de sang mensuelle sur animal vigile, deux pesées par mois, un examen physique mensuel et des périodes d'alimentation individuelle d'une heure trente à deux heures. Constituer ce groupe de chiens obèses sert à tester des médicaments vétérinaires anti-obésité et à monter les dossiers d'autorisation de mise sur le marché des laboratoires concernés.

Objectifs

L'obésité chez le chien est un problème de santé majeur, sachant que plus d'1 chien sur 3 est en surcharge pondérale et que l'obésité est associée par exemple à des désordres métaboliques comme le diabète de type 2 ou des troubles articulaires. L'objectif de ce projet est la mise en place d’un modèle de chien obèses afin d’évaluer des produits vétérinaires destinés à lutter contre l’obésité chez le chien (les procédures expérimentales s’y rattachant seront traitées dans une autre autorisation de projet). Les chiens sélectionnés devront atteindre un score corporel minimal de 7/9 (côtes palpables avec difficulté, dépôt de graisse visible au niveau de la zone lombaire et la base de la queue, taille absente ou peu visible. Ils seront maintenus à long terme avec ce score corporel égal ou supérieur à 7 avec une surveillance accrue de leur état de santé permettant le respect et le maintien du bien-être animal. Pour démontrer l’intérêt de traitements contre l’obésité, il est nécessaire de définir les caractéristiques de pharmacocinétique, pharmacodynamique, d’innocuité et d’efficacité du traitement, y compris sur chiens obèses ; ce qui nécessite la mise en place et l’entretien d’un groupe de chiens obèses.

Bénéfices attendus

La mise en place d’un modèle de chiens obèses permettra de générer des données dans des conditions physiologiques telles qu’elles se développeraient chez le chien de manière naturelle, et d’être au plus proche des conditions réelles. Les études menées permettront de définir l’innocuité et l’efficacité des produits vétérinaires testés et d’expliquer la relation entre la dose et la réponse, c'est-à-dire, l'effet du produit chez l’espèce cible . De plus, le fait de disposer d’un modèle laboratoire sur l’espèce cible permet la définition de paramètres difficiles à définir sur le terrain (par exemple les données de pharmacocinétiques et phamacodynamiques). Ce sont des informations nécessaires au choix de la posologie et de la voie d’administration du produit, préalable à la réalisation des études réglementaires d’efficacité et d’innocuité. Ces informations sont nécessaires à l’obtention de l’Autorisation de Mise sur le Marché de nouveaux produits. Le développement du modèle de chiens obèses est donc nécessaire à l’obtention de l’AMM de nouveaux produits.

Procédures

Les prélèvements sanguins s'effectuent sur animal vigile, une fois par mois et durent environ 3 minutes. Si besoin de prélèvements d’urines, ils s'effectuent sur animal vigile ou anesthésié 1 à plusieurs fois, et durent environ 5 minutes. Une pesée de tous les animaux est prévue deux fois par mois en vigile et dure environ 1 minute. Enfin, un examen physique complet (incluant temperature corporelle et évaluation du body condition score) de tous les animaux en vigile est prévu 1 fois par mois ou plus si jugé nécessaire et dure environ 5 minutes.

Impact sur les animaux

Les nuisances attendues sur les animaux sont : stress dû à la contention lors de prélèvement sanguins ou urinaires ; douleur / inconfort suite aux prélèvements ; stress / baisse de la prise alimentaire pendant les périodes de prise alimentaire individuelle (une habituation à l’alimentation individuelle est prévue pour les chiens sélectionnés dans le pool afin de limiter le stress de la prise alimentaire individuelle); signes cliniques secondaires à l’obésité (apparition potentielle de troubles métaboliques, de douleurs articulaires,...).

Devenir

L’objectif du modèle est la réutilisation des chiens dans des études pour tester les molécules contre l’obésité. Puis après évaluation comportementale par le vétérinaire désigné, ils auront la possibilité d’être adoptés.

Remplacement

Il n’existe pas à ce jour de méthode alternative au recours à l’animal permettant d’évaluer la pharmacocinétique, la pharmacodynamie des produits pharmaceutiques vétérinaires. Les modèles in silico et/ou in vitro/ex vivo permettent de sélectionner des molécules potentiellement efficaces. Après cette première étape, les études de pharmacocinétique, de pharmacodynamie, d’innocuité et d’efficacité nécessitent de travailler sur un organisme entier, mettant en jeu des interactions entre différents tissus/organes impliqués dans le métabolisme et le/les effets physiologiques et thérapeutiques d’un futur candidat médicament.

Réduction

L'objectif est de constituer un groupe stable d'une quarantaine d'individus. L’effectif de 40 chiens nous permettra d’effectuer un roulement entre les différentes études dans lesquelles ils seront inclus et nous permettra donc de répondre au besoin potentiel de plusieurs études en même temps. Sachant que : -certains chiens devront être sortis du pool pour potentiellement atteinte de point d'arrêt, -certains seront sortis plus tôt pour favoriser la réadoption, -certains auront atteints le nombre limite d'utilisation possible, -certains n'arriveront pas s'adapter au modèle obésité (alimentation individuelle infructueuse, pas de prise de poids, etc). Lorsque le statut des animaux le permet, les animaux utilisés peuvent être issus de procédures (légère ou modérée) antérieures et peuvent ensuite être réutilisés dans une future procédure. La réutilisation permet de réduire le nombre d’animaux utilisés. Seuls les animaux ayant retrouvé un état de santé et bien-être complet, attesté par le vétérinaire désigné, sont réutilisables.

Raffinement

Les chiens ont à disposition des méthodes d’enrichissement et de la litière. En fonction du lieu d‘hébergement, un accès à un parc extérieur pourra être possible. Un training est réalisé en renforcement positif. Une socialisation des animaux sera réalisée afin de limiter l’apparition de stéréotypie. Pour limiter le stress lié à l’alimentation individuelle, les chiens du pool seront habitués progressivement à manger leur ration avec un deuxième individu puis seul. La durée de l'alimentation individuelle est réduite au minimum (~1h30-2h), il n’y a pas d’isolement visuel, olfactif ni auditif. Afin d’identifier et gérer tout signe clinique secondaire à l’obésité, des examens cliniques, évaluation du body score et suivis sanguins sont réalisés ainsi que des pesées. Les animaux seront gardés dans le pool s’ils restent en bonne santé avec un score corporel minimum cible de 7/9. Certains points d'arrêts seront à prendre en compte : -L'apparition de troubles articulaires avec boiterie permanente -L'apparition de pancréatite -L'apparition de diabète -L'apparition de troubles comportementaux. Dans ces cas l'animal sera retiré du pool. Les individus pourront être sortis du pool d'animaux obèses après environ 2-3 ans. De plus, une procédure interne décrit des critères d’alerte clinique spécifiques au chien, classifiées en fonction de leur degré de gravité dans une grille d’évaluation clinique. Un arbre décisionnel précise en fonction des signes cliniques observés la conduite à tenir pour le/les animaux concernés. Pour réduire l’inconfort provoqué par les prélèvements, les opérateurs qualifiés réalisent une contention adaptée de l’animal et une anesthésie et/ou analgésie et/ou un changement du site pourra être mis en place. Les animaux sont observés quotidiennement, ou plus si jugé nécessaire, ce qui permet de détecter tout signe comportemental anormal (spontané ou provoqué) et/ou toute anomalie physique non attendue. En cas de déviation de l'état normal d'un animal, le responsable de la procédure, le vétérinaire désigné ou le vétérinaire d'astreinte, décidera d'augmenter les fréquences d'observations, d'isoler l'animal et/ou d'envisager un traitement pour soulager l'animal. Les conditions d’hébergement sont adaptées à l’espèce et à l’âge pour maximiser leur confort et leur bien-être. La SBEA garantit l’amélioration des techniques de soins et des conditions de vie pour les animaux.

Choix des espèces

Il s’agit des espèces cibles pour les produits. Des données concernant l’espèce doivent être fournies au dossier pour l’obtention de l’AMM. Une pré-sélection des chiens pourra être réalisée à partir de l’âge de de 2 mois. Le processus de prise de poids pourra ensuite être débuté en fin de croissance, c’est-à-dire vers l’âge d‘environ 8 mois. L’âge dépendra de l’objectif des études et du scope d’utilisation du produit testé (AMM).

Provoquer des vomissements chez des chiens pour mesurer ce qui les arrête : 150 chiens adultes vont être utilisés dans des procédures d'un niveau de souffrance léger. Chacun reçoit un produit émétisant jusqu'à une fois par semaine sur trois séances consécutives, avec huit vomissements en moyenne et des signes de nausée et de léthargie pendant l'heure qui suit. S'y ajoutent douze à vingt prélèvements sanguins par animal après administration du produit testé. Le porteur indique que le donneur d'ordre fixera les effectifs et qu'à l'issue du projet tous les chiens resteront disponibles pour d'autres procédures expérimentales.

Objectifs

L’objectif de ce projet est de développer un nouveau traitement antiémétique chez le chien en vérifiant son efficacité, ainsi qu’en recherchant et confirmant la dose efficace pour la durée d’action souhaitée à l’aide d’un modèle de nausées vomissement déjà établi chez le chien.

Bénéfices attendus

Ce projet permettra la mise à disposition de nouveaux antiémétiques canins permettant de soulager les chiens lors de traitement anticancéreux ou d’autres évènements induisant des nausées. Ces nouveaux médicaments permettront d’améliorer l’efficacité par rapport aux traitements existants, en proposant par exemple une durée d’action plus longue.

Procédures

Durant les différentes procédures expérimentales de ce projet, les interventions suivantes pourront être réalisées : une administration en sous-cutannée d’un produit émétique commercialisé sur animaux vigiles (quelques secondes), au maximum une fois par semaine sur un maximum de 3 séances consécutives, puis un repos de minimum 4 semaines sera appliqué avant de nouvelles administrations si besoin. Une administration d’un produit de référence (antiémétique commercilisé) ou d’un placebo en sous-cutanée sur animaux vigiles (quelques secondes). Une administration d’un antiémétique en cours de développement en sous cutanée ou toute autre voie d’administration adaptée sur animaux vigiles (quelques secondes), au maximum une fois par semaine sur 3 séances consécutives. Quelques prélèvements sanguins sur animaux vigiles (quelques secondes) : 12 à 20 prélèvements sanguins espacés de façon croissante et régulière durant les jours suivant l’administration du produit d’essai.

Impact sur les animaux

L‘objectif de ce projet est de vérifier l’efficacité de nouveaux traitements antiémétiques chez le chien en induisant des nausées/vomissements. De nombreuses publications sur ce sujet montrent que la durée moyenne des vomissements est d’environ 20 minutes et que tous les symptômes de nausée disparaissent dans l’heure suivant l’administration du produit émétisant. Lors de la validation de notre modèle, les signes observés après l’administration du produit émétisant sont : l’inconfort pendant les vomissements dont le nombre observé, chez le groupe non traité avec un antiémétique, est de 8 vomissements en moyenne. Ces vomissements sont tous survenus entre 5 et 38 minutes après induction et disparaissent par la suite. D’autres symptômes tels qu’une léthargie et des signes évoquant des nausées ont été observés rapidement après l’induction. Tous ces signes disparaissent après 1 heure maximum et les chiens récupèrent complétement leur état normal. D’autres signes incluant des évènements de tremblements passagers ont également été observés de façon occasionnelle. Ces nuisances liées à l’administration du produit émétisant sont des effets secondaires connus pour ce produit commercialisé. Il n’est pas attendu d’effets majeurs indésirables avec les nouveaux produits en développement car les premiers tests de toxicité auront déjà été réalisés par les donneurs d’ordre. En revanche, quelques effets secondaires liés à ce produit peuvent éventuellement ne pas avoir encore pu être anticipés comme des légères réactions locales. Les nuisances attendues liées aux prélèvements éventuels des animaux durant ces études sont celles liées au stress de la contention et de l’introduction de l’aiguille entraînant une sensibilité légère et transitoire au point d’introduction.

Devenir

A l’issue du projet tous les animaux seront disponibles pour une autre procédure expérimentale, suite à un repos suffisant.

Remplacement

Le recours aux chiens sur ce projet est justifié car il n’existe pas de méthode alternative pour vérifier l’efficacité d’un traitement antiémétique et rechercher la dose la plus adaptée. Ces études sont des étapes obligatoires pour le développement et la mise sur le marché de nouveaux médicaments vétérinaires.

Réduction

Afin d'établir un minimum de statistiques descriptives (moyenne, écart-type, médiane et écart interquartile du nombre d’observations) sur les données obtenues, au moins 6 animaux par groupe (formulation ou dose) sont nécessaire. Pour répondre aux attendus réglementaires sur les études de détermination et confirmation de dose, il est nécessaire d’augmenter le nombre d’animaux entre 8 et 10 par groupe. Le Donneur d’Ordre s’engagera pour chaque étude à ce que le nombre d’animaux utilisé corresponde au minimum pour obtenir des résultats interprétables et répondre à l’objectif de l’étude. Le nombre d’animaux sera réduit avec leur réutilisation sur plusieurs procédures expérimentales. De plus les études de preuve de concept pourront être conduites avec un design en cross over permettant également de limiter le nombre d’animaux utilisés.

Raffinement

Les animaux seront mis à jeun environ 2 heures avant l’administration du produit émétisant. Ces conditions d’alimentation sont adaptées pour le bien-être de l’animal qui vomit de nombreuses fois en très petites quantités. Les animaux seront observés pendant une heure après l’induction du vomissement afin de caractériser et d’évaluer les signes apparus. Les animaux pourront être hébergés individuellement, en restant en contact visuel, olfactif et sonore avec leurs congénères pour une durée maximum de quatre heures après l’administration des traitements. Durant cette période, tout sera mis en œuvre pour limiter le stress qui pourrait être induit sur les animaux avec une surveillance accrue de ceux-ci pendant cette période. Un suivi au point d’administration du produit d’essai pourra être réalisé pour vérifier les éventuelles réactions locales lorsque des nouvelles formulations sont testées. En cas d’apparition d’un signe de souffrance ou d’un signe clinique sévère chez l’animal les points limites suivants ont été définis : vomissements très intenses à répétition (plus de 10 en 20 minutes ou qui durent plus de deux heures), prostration de l’animal, difficultés respiratoires. Dès l’apparition de ces symptômes, l’animal sera pris en charge par le vétérinaire désigné et un traitement adapté sera prescrit pour le soulager.

Choix des espèces

Le chien est l’espèce cible du produit en développement. L’efficacité du produit doit être vérifiée et la dose optimale confirmée pour le bon développement du nouveau traitement. Il n’existe pas de méthode de remplacement pour ce type d’évaluation. Les chiens seront des adultes correspondant à l’âge cible des traitements administrés.

Apprendre à piquer et à prélever sur un "gros animal" : 16 chiens sont utilisés à cette fin par des stagiaires, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance léger. Chaque chien subit sur une année scolaire jusqu'à 20 administrations et 5 prises de sang, toujours vigile, les injections étant faites par des apprenants en cours de formation, ce qui peut occasionner des douleurs et des hématomes. Réformés à 3 ans, ils sortent du projet et sont proposés à l'adoption. Le porteur décrit un établissement "très réputé" pour cette formation, répondant à des "demandes fortes des professionnels", et affirme que le chien reste une espèce "indispensable" pour le développement de médicaments.

Objectifs

Ce projet consiste à former des personnes travaillant au sein d’établissements utilisateurs d’animaux à des fins scientifiques en tant qu’applicateur de procédures expérimentales sur l’espèce chien. Le but est d’acquérir les techniques de manipulations classiques pour réaliser des administrations et des prélèvements en évitant toute souffrance pour l’animal et en garantissant la sécurité de l’opérateur et de l’animal. En parallèle, avec l’utilisation de l’animalerie pédagogique, les apprenants avec encadrement sont initiés aux différentes techniques de base en matière d’hébergement, élevage , techniques d’anesthésie, soins pré/post opératoires et observations des animaux dans le respect du bien être animal.

Bénéfices attendus

Ces travaux pratiques font partie intégrante de la formation des techniciens applicateur de procédures utilisant des animaux à des fins scientifiques. L’obtention de leur diplôme ou habilitation leur donne la possibilité de travailler dans le cadre de projets scientifiques sur animaux vivants et permet aux employeurs de bénéficier de techniciens compétents techniquement et opérationnels réglementairement dès leur entrée dans l’entreprise. La méthode d’apprentissage basée sur les règles de bien être animal permet d’acquérir les bons gestes afin de garantir sécurité et respect éthique de l’animal. L’animalerie pédagogique permet aux apprenants d’acquérir d’autres notions importantes tel que le maintien des ces animaux en milieu confiné, l’observation quotidienne, l’élevage, l’hygiène et la prophylaxie. L’acquisition des ces compétences théoriques et pratiques démontre l’importance d’avoir des animaux hébergés dans de bonnes conditions et une approche des règles de bien être facilite leur manipulation. Les entreprises sont à la recherche de personnel formé et autonome rapidement. Notre établissement est très réputé dans la formation de techniciens applicateurs grâce à l'expertise technique de formateurs reconnus depuis de nombreuses années et un outil pédagogique tel que l’animalerie complètement rénovée cette année.

Procédures

Toutes les administrations et prélèvements sont réalisées sur animaux vigiles. Le nombre d’administrations et de prélèvements sanguins pour chaque animal est inférieur à 25 pour une année scolaire. L'animal est soumis à 2 administrations maximum par semaine et la durée d'administration est inférieure à 1 minute. Le nombre d'administrations pour un animal est inférieur à 20. Les prélèvements sanguins sont effectués 1 fois par semaine maximum. La durée de prélèvement est inférieure à 1 minute. Le nombre de prélèvements pour un animal est inférieur à 5.

Impact sur les animaux

Les procédures réalisées dans ces séances de travaux pratiques sont faiblement invasives.Les nuisances attendues pour les animaux seront liées au stress de la manipulation et aux douleurs éventuelles associées aux injections effectuées par des étudiants en apprentissage. La prise de sang peut également engendrer un hématome au niveau du site de prélèvement. La durée de ces nuisances est de l'ordre de quelques secondes pour les injections et quelques minutes pour l'hématome au niveau du site de prélèvement.

Devenir

Tous les animaux sont conservés à l'issue de cette procédure Ces animaux sont proposés à l'adoption à l'âge de 3 ans.

Remplacement

Afin de valider la formation réglementaire à l'expérimentation animale (niveau applicateur), il est nécessaire que les personnes pratiquent les techniques les plus usuelles et les moins invasives pour les maîtriser au mieux et ceci en complément des autres supports utilisés (vidéos, démonstrations sans animal ou avec « peluche »). La réalisation d’interventions directes sur l’animal, avec encadrement professionnel, est incontournable et reste l’objectif principal de ces formations professionnelles. Le but étant de permettre aux futurs applicateurs d’acquérir les bons gestes en évitant stress et souffrance aux animaux.

Réduction

Le nombre d'animaux utilisés a été calculé de manière à prendre en compte le degré de stress et/ou de douleur potentiellement occasionné chez l'animal, tout en permettant une bonne formation pratique des personnes. L’organisation des travaux pratiques est planifiée de manière à ne pas utiliser nos animaux plus d’une fois par jour ouvré et ce pendant maximum 1 heure par session pour la procédure d’administrations de substances et maximum 1 fois par semaine pour la procédure de prélèvements sanguins. La quantité d’animaux est calculée en fonction du nombre d’apprenants. Une salle de travaux pratiques peut accueillir jusqu’à 16 postes de travail. Les espèces sont séparées et la session dure au maximum 2 heures. 8 chiens sont nécessaires au maximum pour une session de 2 heures. Cette journée type ne se reproduit pas tous les jours de la semaine. Avec 3 salles de travaux pratiques et pour réduire l’utilisation, la planification des sessions de travaux pratiques est lissée au maximum sur la semaine en utilisant les différentes espèces. Les professeurs utilisent d’autres espèces comme les rongeurs ou le lapin lorsqu’ils sont sur un même créneau horaire. A partir de 3 ans d’âge, les animaux sont réformés et sortent du projet pour être proposé à l’adoption. Toutes les phases de vidéos, démonstrations à vide ou sur mannequins permettent de réduire l’utilisation d’animaux vivants. L’entraînement en amont sous forme de répétitions à vide, vise à acquérir plus rapidement le geste sur animal vivant ce qui permet de réduire son utilisation.

Raffinement

Les animaux utilisés dans ce projet sont hébergés en groupe socialement harmonieux de 4 ou 8 individus. Les animaux bénéficient d’un programme d’enrichissement alternatif et évolutif (Exemple: plateforme, balle, altère, litière, fenêtre d’observations, musique...). Les animaux disposent entre 2 heures le weekend et 7 heures les jours ouvrés d'une salle détente de 70m² leur permettant de courir librement et d'évoluer sur des structures en 3 dimensions. Tous les animaux sont entraînés à évoluer dans les salles de travaux pratiques par les apprenants. Régulièrement, les animaux sont introduits dans la salle de cours ou dans le bureau de l’animalerie pour améliorer la future socialisation avant proposition d’adoption. Une attention particulière est portée sur la nécessité de travailler dans le calme afin d'éviter tout stress inutile chez l'animal. Les élèves peuvent également proposer des mesures de raffinement observées pendant leur période de stage en entreprise. Après chaque procédure d'administration ou de prélèvement, les apprenants effectuent un acte de renforcement positif (récompense alimentaire, caressing). Tous les animaux sont suivis avant, pendant et après les manipulations avec mise en place d'un suivi clinique avec points limites et utilisation d'analgésiques le cas échéant

Choix des espèces

Le chien est une espèce nécessaire à l’apprentissage du futur technicien applicateur de procédures expérimentales sur animaux. En effet, cette espèce nous permet de former les futurs techniciens à la manipulation, l'élevage et aux techniques sur les gros animaux, qui sont des demandes fortes des professionnels. Le chien reste une espèce indispensable pour le développement de médicaments. Les chiens sont âgés au minimum de 1 an à leur arrivée et sont mis à l'adoption à 3 ans d’âge en fin d’année scolaire.

Valider un aliment pour chats à haute teneur en humidité mobilise 45 chats adultes, dans des procédures classées en souffrance légère, réutilisés ensuite ou proposés à l'adoption. Les 45 passent dix jours en hébergement individuel, puis les trente retenus y retournent cinq jours, puis deux fois trois jours au cours d'une étude de vingt-six semaines. Chacun subit jusqu'à trois prises de sang sur animal éveillé, après application d'une pommade anesthésique, et le porteur reconnaît que l'isolement peut provoquer de l'angoisse et l'aliment une dégradation des selles. Le projet doit vérifier si cet aliment couvre les besoins nutritionnels du chat adulte, et le porteur écrit dans le même mouvement qu'il permettra de s'assurer que les indicateurs évalués "ne démontrent aucune anomalie".

Objectifs

Ce projet a pour objectif d’évaluer si un aliment pour chats ayant une haute teneur d’humidité répond aux besoins nutritionnels établis pour un chat adulte. Pour cela nous sélectionnerons 30 chats sur un effectif total de 45 chats, que nous répartirons en 2 groupes : un groupe de 15 chats sera nourris avec un aliment contenant un niveau d’humidité courant, l’autre groupe de 15 chats sera nourri avec un aliment à plus forte teneur en humidité. Nous évaluerons l’impact d’une exposition de 6 mois à cette alimentation sur le bien-être physique et physiologique des chats inclus dans l'étude.

Bénéfices attendus

Ce projet permettra de s'assurer qu'un aliment à haute teneur en humidité répond aux besoins nutritionnels spécifiques du chat adulte en bonne santé et que les indicateurs évalués ne démontrent aucune anomalie.

Procédures

Les animaux seront exposés aux interventions suivantes: 1) Hébergement individuel: 10 jours pour un maximum de 45 chats, puis pour les 30 chats sélectionnés une première fois pendant une période de 5 jours puis 2 fois sur une période de 3 jours lors de l'étude de maintenance d'une durée totale de 26 semaines. 2) Prises de sang: Les chats sélectionnés pour l'étude seront soumis à 3 prises de sang maximum sur la durée du projet. Les prises de sang se feront sur chats éveillés 15 à 20 minutes après application d'une pommade anesthésique locale.

Impact sur les animaux

Les effets indésirables qui pourraient être observés sont: 1) il n'est pas exclu que certains animaux voient leur poids varier pendant l'étude; 2) Il sera possible que la consistance des selles pour certains chat se dégrade; 3) Certains animaux pourraient se lasser de l'aliment proposé pendant l'étude; 4) Certains animaux pourraient exprimer des angoisses pendant l'hébergement individuel; 5) Une douleur et/ou un stress liés pourraient être ressentis à la prise de sang. Toutes ces nuisances et effets indésirables seront mis sous contrôle et des actions seront mises en place s'ils persistent au delà des points limites définis les procédures expérimentales concernées.

Devenir

Les procédures étant légères, les chats seront réutilisés ou le cas échéant proposés dans un programme d'adoption.

Remplacement

Il n'existe pas de méthode alternative permettant de prouver l'adéquation nutritionnelle d'aliments humides pour chats adultes. Par conséquent, il n'est pas possible de remplacer le recours à l'espèce animale étudiée dans ce projet, soit le chat.

Réduction

Les analyses statistiques menées par l’équipe indiquent que 15 chats par groupe seront nécessaires afin de conclure fermement quant à l’adéquation de l’aliment à haute teneur en humidité avec les besoins nutritionnels des chats adultes. Ces 30 chats seront sélectionnés parmi un panel de 45 chats sur des critères d’âge, d’état corporel et de santé digestive, rénale et urinaire.

Raffinement

Le raffinement a porté sur les points suivants: 1) Conditions d'hébergements: La surface des lieux d'hébergements sont supérieurs aux minimums requis par la loi. Les chats sont hébergés en groupe. Ils bénéfiecient d'un enrichissement sonore, de paniers, de coussins, d'hamac et de plateformes à différentes hauteurs. 2) Entretien et socialisation: Les chats bénéficient de périodes d'interactions et de socialisation quotidiennes, assurées par le personnel affecté aux soins (jeux divers et variés); 3) Prise de sang: Un anesthésique local sous forme de gel sera appliqué sur la peau 15 minutes avant la prise de sang. Pour ce protocole, il y aura un suivi quotidien des consommations alimentaires, des consistances fécales et des variations de poids hebdomadaires.

Choix des espèces

Les aliments testés sont formulés et exclusivement destinés aux chats. Les chats utilisés seront des chats adultes entre 1 ans et 8 ans.