Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 11/06/2025
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-326837)
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Le syndrome de l’intestin irritable est une maladie intestinale chronique impliquant des facteurs génétiques, environnementaux, nutritionnels. Chez les patients souffrant de ce syndrome sont observés des altérations de la barrière intestinale, une faible inflammation et des modifications de la flore bactérienne intestinale. Un stress psychologique chronique précoce comme le stress de séparation maternel induit des modifications de la fonction barrière de l’intestin durables et il est reconnu comme un important facteur de risque impliqué dans l’initiation et l’aggravation de symptômes du syndrome de l’intestin irritable. Des matrices laitières fermentées à base de lait de vache peuvent fournir un large nombre de peptides à action biologique bénéfique dans le tractus gastro-intestinal. Certains peptides peuvent agir sur les cellules productrices de mucus jouant un rôle crucial dans la protection de la barrière intestinale. De manière intéressante, il a été montré qu’un peptide à action bénéfique issu d’une matrice laitière fermentée était capable d’interagir avec les cellules intestinales en préservant l’équilibre intestinal et par conséquent de prévenir des effets néfastes dans un modèle expérimental de stress précoce. L’objectif de ce projet de recherche est d’évaluer et comparer les effets d’une consommation orale chronique de différentes matrices laitières fermentées (à base de lait de vache) contenant ce peptide et issues de technologie différentes, chez des jeunes rongeurs sur l’altération de la barrière intestinale ex-vivo induite par le stress de séparation maternel. Cette étude pré-clinique permettrait à terme d’identifier des matrices capables de réduire les perturbations intestinales et de proposer des solutions thérapeutiques.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Les produits fermentés font l objet d’une attention sociétale du fait des propriétés bénéfiques pour la santé humaine. Leurs bénéfices potentiels pour la santé reposent sur l’apport des micro-organismes qui atteignent vivants l’intestin ou par l ‘apport de métabolites spécifiques issus de l’activité des ces micro-organismes. Ce projet doit permettre d’identifier des matrices laitières intéressantes dans protection de la barrière intestinale dans un modèle de fragilisation de celle-ci qui reproduit les mêmes caractéristiques que le syndrome de l’intestin irritable . Ces travaux visent à développer des traitements préventifs et thérapeutiques pour ce syndrome.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Les animaux recevront par voie orale, des matrices laitières ou du sérum physiologique à une fréquence de 1 fois par jour pendant 10 jours. Les gestes de l’administration orale sont de courte durée, (approximativement 30 sec) effectués par l’agent expérimenté en charge de ces études. Les ratons seront soumis au stress de séparation maternelle trois heures par jour sur une période de 15 jours à heure fixe le matin (9h-12h) puis replacés par portée avec leur mère respective.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Des nuisances ou effets indésirables attendus sur les animaux peuvent être : une mobilité réduite liée à la préhension pour le gavage, geste d’une durée inférieur à 1 minute ainsi qu’une douleur ou irritation du tube digestif d’administration. Le stress de séparation maternelle d’une durée de trois heures pendant quinze jours pourrait engendrer une perte de poids des ratons.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Tous les animaux seront euthanasiés afin d’effectuer des prélèvements de tissus post-mortem pour différentes analyses et dosages.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Le Syndrome de l ‘intestin irritable est une pathologie dont l’origine est méconnue et dont la physiopathologie est complexe (ex. dysfonctionnement de l’axe intestin-cerveau, augmentation de la perméabilité intestinale, altération de la flore intestinale etc..), par conséquent, il n’est pas possible de reproduire cette pathologie en recherche pré-clinique sur un modèle in vitro. Ainsi dans l’objectif de tester des traitements en l’occurrence des matrices laitières sur les paramètres le plus caractéristiques pour cette pathologie comme l’altération de la barrière intestinale, le modèle animal semble l’approche la plus appropriée pour l’obtention de résultats transposables à l’homme.
2. Réduction
L’amélioration de la performance pour le bien-être animal acquise par les études précédentes a abouti à une réduction de la mortalité chez les ratons et permet l’utilisation du nombre d’animaux utilisés au plus juste. Le nombre calculé nécessaire, basé sur des études antérieures en prenant compte la variabilité inter-individuelle est de 10 animaux par groupe pour cette étude. Il a été calculé à l’aide de tests statistiques adaptés.
3. Raffinement
Pour assurer une fiabilité des résultats et limiter le nombre d’animaux utilisés, une attention particulière sera accordée au bien-être de l’animal (contrôle de l’environnement, respect du cycle jour nuit). A leur arrivée les animaux seront hébergés individuellement au calme et surveillés pendant une période d’acclimatation (7 jours). L’acclimatation permet de récupérer du stress lié au transport et de s’adapter aux nouvelles conditions de vie. Ce n’est qu’à l’issue de cette période que les animaux seront inclus dans l’étude. Dans le but d’améliorer le bien-être de ces animaux captifs, des bûchettes en peuplier et des nids de cellulose seront disposés dans chaque cage. Une surveillance quotidienne des animaux sera effectuée pour détecter à temps toute anomalie et minimiser la durée de toute souffrance constatée. Toute souffrance, toute détresse ou tout inconfort réels ou potentiels des animaux seront minimisés ou soulagés par le choix de points limites les plus précoces et compatibles avec notre objectif scientifique recherche.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
La souche de rat utilisée présente une bonne analogie physiologique intestinale et pharmacologique avec celle de l’homme et est utilisé pour étudier les mécanismes impliqués dans le Syndrôme de l ‘intestin irritable. Nous utiliserons cette espèce qui a fait l’objet d’études précédentes menées dans notre équipe (soumises à autorisation de projet) avec ce partenaire industriel et qui ont permis une bonne connaissance et conduite de ce modèle de stress de séparation maternelle. Le modèle de stress de séparation maternelle implique l’utilisation de femelles gestantes et de leurs descendants mâles et femelles en période néonatale, 5 jours après leur naissance et l’intégrité de la barrière épithéliale intestinale sera étudiée à l’issue du 24 ème jour de naissance, après euthanasie à partir de prélèvements intestinaux.