Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 12/06/2025
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-792259)
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
La société développe des médicaments pour l’homme avec différentes voies d’administration possibles et visant divers récepteurs, enzymes ou d’autres cibles. Il est important de connaître la toxicité et la distribution du candidat médicament dans le corps. Ainsi, l’objectif de ce projet est de déterminer la toxicité et l’exposition dans le temps d’un candidat médicament dans le sang et les organes dans différentes espèces animales rongeurs (rat ou souris), après un traitement unique ou répété (si répété :1 mois maximum, 2 administrations maximum par jour) par voie orale, ou par voie intramusculaire, sous-cutanée, ou intrapéritonéale. 1) L’observation clinique journalière des animaux permettra de détecter d’éventuels signes de toxicité. 2) Des analyses sanguines sur prélèvement sanguin terminal permettront de compléter le recueil d’informations. 3) L’autopsie terminale des animaux permettra un examen des organes (poids, aspects macroscopiques), leur recueil éventuel pour analyses histologiques. 4) Les mesures de taux de candidat médicament dans le sang et les organes nous donneront ainsi une bonne indication quant à l’exposition du candidat médicament dans le temps, nous aideront à relier les expositions aux effets toxicologiques. Ce projet d’utilisation des animaux s’intègre dans un projet de Recherche exploratoire plus global de ce candidat médicament au profit de la santé humaine et sera fait en complément des études in vitro.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
L’implication des animaux dans ce projet va nous permettre d’avoir une meilleure connaissance du devenir du candidat médicament dans un organisme physiologiquement proche de l’homme sur une espèce (rat ou souris) qui sera utilisée dans toutes les études de toxicité réglementaires obligatoires avant le passage en clinique chez l’homme. Cette étude permettra 1) d’avoir une première approche de la gamme de doses sans effet toxique, de la comparer à la gamme de doses thérapeutiques efficaces et le cas échéant d’éviter d’engager un candidat médicament dans les études réglementaires de toxicité obligatoires qui sont lourdes et consommatrices d’animaux, 2) de déterminer d’éventuel(s) organe(s) cible(s) en termes de toxicité et 3) d’obtenir les expositions du candidat médicament dans le sang et les organes en fonction du temps. Ces expositions pourront être reliées aux effets pharmacologiques et toxicologiques du produit. Ce projet chez le rongeur aura un grand bénéfice dans le développement du candidat médicament car cette étude ne peut pas être substituée par des études cellulaires in vitro qui ne miment pas assez finement la complexité et la dynamique d’un modèle entier vivant et sa physiologie.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Contention et administration du produit par voie orale (gavage) ou par injection intramusculaire, sous-cutanée, ou intrapéritonéale, l’ensemble durant moins de 30 secondes à chaque administration et ce pour l’administration aigue et pour l’administration répétée pendant 1 mois maximum (au maximum deux fois par jour). Anesthésie générale profonde pour prélèvement terminal sanguin suivi de la mise à mort de l’animal avant de réaliser des prélèvements d’organes.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Les nuisances attendues sont celles liées à la contention de l’animal, l’administration du produit à tester (gavage, injection), à l’anesthésie avant les prélèvements sanguins terminaux pouvant conduire à un stress de l’animal ainsi que les effets indésirables éventuels du produit. Les effets indésirables liés au produit pourront être de l’ordre : prostration, hyperlocomotion, ou hypolocomotion, des comportements anormaux induits, des troubles digestifs ), des troubles du système nerveux central, des perturbations du métabolisme.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Chaque animal sera anesthésié pour prélèvement terminal sanguin pour analyses, avant une mise à mort suivie de prélèvements terminaux d’organes (cerveaux, coeur, foie, reins…) pour analyses.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
L’utilisation d’animaux pour des évaluations de toxicité et de toxicocinétique d’un candidat médicament est justifiée par la nécessité de pouvoir déterminer les effets de la molécule à tester sur un organisme entier, reflétant physiologiquement l’humain. La complexité et la dynamique de l’organisme et des interactions organes-médicament ne nous permettent pas de se limiter aux seuls modèles in vitro ou ex-vivo car ils ne représentent pas assez finement l’ensemble des mécanismes physiologiques. Toutefois, les candidats médicaments qui seront testés auront déjà passé une série de tests en phases précliniques précoces (in vitro) et qui permettent d’identifier les molécules les plus sélectives pour nos récepteurs d’intérêt et sans effets sur des cibles non désirées (cardiaque par exemple).
2. Réduction
Pour les prélèvements destinés aux analyses toxicocinétiques, le nombre d’animaux par temps selon nos données historiques est au maximum de 5 individus afin d’avoir une fiabilité de résultat en tenant compte de la variabilité inter-individus. Pour les prélèvements destinés aux analyses de biochimie et de numération-formule sanguine, le nombre d’animaux par temps selon nos données historiques est au maximum de 10 individus afin d’avoir une fiabilité de résultat en tenant compte de la variabilité inter-individus et permettre une analyse statistique. Chaque animal sera analysé sur l’ensemble des paramètres à son temps de sacrifice avec mesures des taux du candidat médicament dans le sang et dans d’autres organes (par exemple cerveau, coeur, foie, rein…), détermination de la numération-formule sanguine, mesures des paramètres de biochimie sanguine, observation macroscopique et pesée d’organes clefs en termes de toxicologie comme le coeur, le foie, les reins… et leur conservation le cas échéant pour analyse histologique.
3. Raffinement
Afin de réduire le stress, les animaux seront hébergés en animalerie et acclimatés au minimum 5 jours avant toute expérimentation pour s’habituer au nouvel environnement (contrôlé en continue). Pour le bien-être de l’animal et lui éviter un stress, chaque cage dispose d’un bloc de lanières de papier pour la nidation et d’un enrichissement (igloo ou tunnel), et ce, dès leur arrivée au laboratoire. Tout mal être identifié aboutira à une surveillance accrue de l’animal et à des soins si besoin (exemple : désinfection d’une plaie). Le personnel zootechnicien est sensibilisé pour remonter tout comportement suspect d’un animal anxieux soit durant le temps d’acclimatation, soit le jour même de l’expérimentation au moment de sa manipulation. Les groupes sociaux resteront ceux formés depuis l’arrivage jusqu’à la fin de l’étude. Les animaux disposeront de nourriture et eau de boisson à volonté sous surveillance quotidienne. Les traitements (oraux, injections…) se feront par du personnel formé avec du matériel adéquat pour chaque espèce rongeur. La méthode de mise à mort avec initialement un grand prélèvement terminal sanguin sera préalablement précédée d’une anesthésie gazeuse de l’animal. Le contrôle de l’anesthésie se fera par un contrôle du réflexe de retrait de la patte et en s’assurant d’une respiration abdominale. Les animaux feront l’objet d’une surveillance accrue pendant l’expérimentation. Si les points-limites préalablement établis sont atteints, l’animal sera euthanasié de façon anticipée afin de lui éviter toute souffrance.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Le rat et la souris sont des espèces relativement proches de l’homme, les données obtenues seront pertinentes afin d’extrapoler les résultats. Ces espèces sont utilisées dans les études de toxicité/toxicocinétique réglementaires obligatoires avant de passer un candidat médicament en phase clinique chez l’homme. Ces espèces sont 2 espèces de petite taille pour lesquelles il est possible d’avoir des effectifs assurant une robustesse dans les résultats et limitant les quantités nécessaires en produit administré. Le choix de l’espèce entre la souris et le rat va s’orienter selon : 1/le type de candidat médicament, 2/ les organes d’intérêt (exemple : le rat ne présente pas de vésicule biliaire par rapport à la souris) et 3/ du profil métabolique de l’espèce rongeur comparé au profil métabolique humain déterminé au préalable par des tests comparatifs in vitro. Les animaux seront utilisés au stade adulte : cela permettra de refléter un organisme mature et métaboliquement développé (en particulier au niveau du foie).