Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 31/10/2022
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-361862)
34 160 souris vont être utilisées, toutes tuées à l’issue, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance allant de léger à sévère. Elles reçoivent un vaccin antitétanique puis une dose de toxine tétanique, et le porteur indique qu’environ la moitié développe une paralysie de la patte injectée, entraînant l’euthanasie dès qu’elle est avérée. Ce titrage sur souris répond à une exigence réglementaire de la Pharmacopée européenne pour libérer les lots de vaccins. Le porteur affirme que la réponse immunitaire nécessite l' »organisme entier » et qu’une méthode sérologique est en développement pour supprimer à terme l’épreuve par la toxine.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Le titrage de l’activité des vaccins antitétaniques est décrit dans la Pharmacopée européenne (Ph Eu 2.7.8: Titrage de l’activité du vaccin tétanique adsorbé, méthode B: épreuve de virulence sur souris). Le contrôle des vaccins tétaniques par un laboratoire officiel de contrôle est règlementaire.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
La conformité des résultats d’activité des vaccins pour la valence antitétanique est réglementairement nécessaire à la libération des lots de vaccins et donc à leur mise à disposition des patients. A l’issue des essais les animaux ne présentant aucune symptomatologie peuvent être réutilisés pendant une durée maximale à des fins de formation de nouveaux opérateurs à la contention et aux administrations.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Les animaux sont soumis à des injections par voie sous-cutanée de solutions vaccinales plus ou moins diluées et d’une dose d’épreuve de toxine tétanique: J0: vaccination de tous les animaux à l’exception de ceux utilisés pour déterminer la dose de toxine tétanique qui paralyse 50 % des animaux: administration de 0,5 mL de vaccin. La vaccination d’un animale dure environ 10s. J28: administration de la toxine à tous les animaux: administration de 0,5 mL de toxine. L’administration dure environ 10s par animal.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Les actes expérimentaux entrainent la nuisance d’une piqure d’aiguille. Les administrations sous-cutanées ne sont pas accompagnées de réactions au point d’injection ni de modifications du comportement ou de l’apparence des animaux. Les lots d’animaux permettant de déterminer ou de vérifier la DP50 de la toxine tétanique et ceux correspondant aux groupes immunisés avec des faibles doses de vaccin développent une paralysie plus ou moins importante de la patte où a eu lieu l’administration de la toxine. Environ 50% des animaux utilisés vont développer une paralysie.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
A la fin d’un essai tous les animaux sont euthanasiés car ils ne peuvent être réutilisés en essai.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
La réponse immunitaire engendrée par la vaccination nécessite l’organisme entier. A ce jour aucune méthode in vitro n’est disponible pour évaluer l’activité des vaccins tétaniques. Ces dernières années la méthode sérologique est développée dans notre laboratoire afin de supprimer à terme le challenge avec la toxine tétanique et de rendre un résultat de conformité basé sur la concentration en anticorps des sérums des animaux vaccinés.
2. Réduction
Plusieurs stratégies permettent de limiter l’utilisation des animaux comme le test de deux lots de vaccins en même temps que la référence pour limiter les lots de référence, la limitation des retests et la mise en place du contrôle d’une partie seulement des lots fabriqués pour des vaccins dont la conformité et la stabilité a pu être démontrée au fur et à mesure des années.
3. Raffinement
Un enrichisseent est mis à disposition des animaux: lanières cartonnées ou rouleau de coton pendant le premier mois puis maisonettes en plastiques rouge transparente la dernière semaine. (Les maisonnettes permettent une meilleure observation de la symptomatologie qui se manifeste après l’épreuve en fin d’essai). Dès qu’un animal en essai présente une paralysie avérée de la patte ayant reçue la toxine il est euthanasié. Un enrichisseent est mis à disposition des animaux: lanières cartonnées, rouleau de coton puis maisonettes en plastiques rouge transparente. Dès qu’un animal en essai présente une paralysie avérée de la patte ayant reçue la toxine il est euthanasié.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
La Pharmacopée Européenne propose 2 espèces pour réaliser ce test réglementaire (chapitre 2.7.8): le cobaye ou la souris. La méthode mise en place en routine dans notre laboratoire est la méthode B sur souris Les souris peuvent être commandées à un poids de 20 à 22G ou à 5 semaines.