Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 2023-03-14 00:00:00
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-918163)
36 souris vont être utilisées, toutes tuées à l’issue, dans des procédures classées de souffrance légère. L’intervention se limite à un génotypage avant l’âge de dix jours, puis à une simple observation jusqu’à seize semaines, huit mutantes et huit témoins étant suivies, les autres tuées dès le sevrage. Il s’agit d’une étude pilote destinée à vérifier qu’une mutation humaine du gène TAF8, reproduite chez la souris, ne provoque pas de « phénotype dommageable » avant d’engager une analyse comportementale ultérieure. Le porteur affirme qu’il n’est « pas possible de remplacer ces animaux » et prévoit d’en prélever les organes pour des analyses moléculaires.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Nous nous intéressons aux protéines qui sont associées avec l’expression des gènes. Une étape importante est la reconnaissance des gènes par des protéines particulières qui sont présentes dans toutes les cellules. De manière surprenante, des mutations dans les gènes codant pour ces protéines ont été identifiées chez des patients humains présentant un retard de croissance et du développement moteur, une microcéphalie, des difficultés d’alimentation, et une déficience intellectuelle sévère. Nous avons développé un modèle de souris qui reproduit unede ces mutations humaines. Nous souhaitons dans un premier temps valider l’absence de phénotype dommageable des souris homozygotes adultes.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Ce projet est un projet préliminaire qui nous permettra de confirmer l’absence de phénotype dommageable chez les souris homozygotes Taf8PH/PH. Une fois, l’absence de phénotype dommageable avérée, nous soumettrons une autre saisine pour l’analyse des capacités intellectuelles des animaux mutants. A terme, ces projets apporteront des connaissances fondamentales sur le fonctionnement de la transcription et permetteront de mieux comprendre la cause de déficiences intellectuelles chez l’homme.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Les souriceaux seront génotypés avant l’âge de 10 jours (1 prélèvement durant 1 seconde).
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Les patientes étudiées présentent des difficultés d’alimentation, un retard de croissance et du développement moteur (hypotonie axiale, spasticité progressive) et une déficience intellectuelle sévère. Des crises d’épilepsie pendant l’enfance ont également été observées. Aucun effet indésirable sévère n’est attendu chez les animaux Taf8PH/PH mais une attention sera portée au suivi du développement moteur, de l’alimentation et à l’occurrence éventuelles de crises d’épilepsie chez les nouveaux nés.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Le but de cette saisine est l’observation des animaux de leur naissance jusqu’à 16 semaines qui correspond à l’âge maximal prévu pour les analyses futures. Tous les animaux seront génotypés mais seules 8 souris Taf8PH/PH et 8 souris contrôles (+/+ ou PH/+) seront conservées pour l’observation jusqu’à l’âge de 16 semaines: les autres souris seront euthanasiées au moment du sevrage. les animaux suivis seront eux euthanasiés à 16 semaines.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Le but de ce projet pilote est de vérifier qu’une mutation qui a été identifiée chez des patientes humaines n’induit pas, à l’état homozygote, de phénotype dommageable ou affectant le bien être des souris, avant d’initier un projet d’analyse comportementale. Il n’est donc pas possible de remplacer ces animaux. Ce modèle murin servira à moyen terme à dériver des lignées cellulaires permettant de faire une analyse moléculaire, permettant, à plus long terme de minimiser le nombre d’animaux utilisés.
2. Réduction
Le nombre de 6 portées minimum contenant en tout au moins 8 animaux Taf8PH/PH homozygote a été choisi pour nous assurer de l’absence de phénotype. Les mêmes animaux seront analysés tout au long de leur vie (naissance jusqu’à 16 semaines) pour minimiser le nombre d’animaux utilisés. Les organes de ces animaux seront prélevés en fin de procédure pour des analyses moléculaires.
3. Raffinement
Le but de cette saisine est de vérifier que la mutation Taf8PH à l’état homozygote ne provoque pas de phénotype dommageable, même si aucun problème n’est attendu puisque les patientes humaines sont viables et se caractérisent principalement par une déficience intellectuelle. L’élevage des animaux sera fait par un personnel compétent dans des conditions du respect du bien être animal, par du personnel compétent sensibilisé à la possibilité de l’apparition d’un phénotype délétère chez les mutants. Cette évaluation sera faite en conditions normales d’hébergement avec enrichissement et en maintenant les liens sociaux entre les animaux. A la naissance, la capacité d’alimentation de tous les souriceaux sera évaluée par la présence de lait dans l’estomac. L’état des animaux sera évalué 3 fois par semaine (propreté, déplacement, vivacité et posture) jusqu’à l’âge de 16 semaines. En cas de souffrance animale, l’avis du vétérinaire sera démandé pour une éventuelle action avant euthanasie si aucune solution ne se présente..
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Nous souhaitons modéliser une mutation découverte chez l’homme et associée à des problèmes cognitifs. La souris est un modèle de choix qui nous permettra de dériver des lignées cellulaires utiles pour les études moléculaires in vitro tout en analysant le développement du système nerveux et le comportement des animaux mutants. Le but de cette saisine est de nous assurer de l’absence de phénotype délétère chez les homozygotes: les animaux seront donc observés de la naissance jusqu’à 16 semaines où ils seront euthanasiés.