Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 02/02/2023
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-292350)
38 souris vont être utilisées dans des procédures impliquant un niveau de souffrance léger, la plupart tuées à l’issue et trois réutilisées pour un autre usage. Elles reçoivent une injection intranasale de composés métalliques, parfois précédée d’une injection de mannitol sous anesthésie, avant que leur cerveau soit prélevé pour de l’imagerie par rayons X en trois dimensions. Le porteur indique que les animaux sont euthanasiés dans un délai de trente minutes à vingt-quatre heures pour ce prélèvement. Il affirme avoir « besoin de cerveaux » et n’avoir « pas d’autre alternative » que le recours aux rongeurs, sans détailler de méthode de remplacement.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Le but de ce projet est de réaliser de l’imagerie-x en 3 dimensions sur des cerveaux de souris. Il s’agit de s’approcher de l’histologie, en utilisant l’imagerie x en 3D afin d’obtenir des informations dans l’espace, plutôt qu’en 2 dimensions. Pour cela, il convient d’administrer des composés par voie intranasale avant euthanasie, prélèvement et imagerie des cerveaux.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Nous espérons obtenir des images de type « histologie » en 3-dimensions, permettant l’identification de l’organisation spatiale des astrocytes et des neurones dans les cerveaux.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
1 injection intraveineuse sous anesthésie gazeuse (pour certains (entre 12 et 26 souris selon les résultats), mannitol en IV, 100 µL, 12 mmol)+ injection intranasale de composés 2×5µL (pour tous les animaux) à 1 mg/mL de métal. Durée de l’expérience avant euthanasie: de 30 minutes à 24h maximum.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Le mannitol est un composé permettant l’ouverture transitoire de la barrière hématoencéphalique. Il est à administrer à petite dose et à débit modéré. Les expérimentateurs sont familiers avec son utilisation. L’administration des autres composés se limite à de faibles volumes. Afin de limiter le stress des animaux, les souris seront anesthésiées lors des différentes administrations et des analgégiques seront disponibles en cas de besoin.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Euthanasie pour prélèvement sous anesthésie gazeuse, pour tous les animaux.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Nous avons besoin de cerveaux pour cette expérience et n’avons pas d’autre alternative que l’utilisation de rongeurs.
2. Réduction
Les nombres indiqués dans ce projet sont maximaux (38). L’accès au faisceau de rayons-x étant limité et fractionné, nous allons travaillé par petit nombre d’animaux. Il est hautement probable que nous réduisions le nombre total d’animaux utilisés. Les analyses au fur et à mesure des expériences nous permettrons cette réduction. Il n’est pas nécessaire de prévoir des analyses statistiques : des analyses d’images sont effectuées (analyse de contraste).
3. Raffinement
Des mesures de raffinement sont prises afin de réduire la douleur, la souffrance et l’angoisse notamment en mettant en place une anesthésie préinjection par méthode gazeuse (par isoflurane: simple, rapide, reproductible). Les animaux sont également placés par groupe avant l’expérience, avec nourriture et eau à disposition ainsi que des enrichissements dans les cages (cotons, tunels etc). Dans ce protocole, nous commençons par les temps les plus courts. Dans le cas où des animaux présenteraient des points limites, nous serions dans l’obligation d’adapter la procédure, soit en réduisant le volume injecté par narine (pour un meme volume final administré), soit en modifiant la formulation du composé. De plus, des analgésiques sont disponibles au laboratoire comme la buprénorphine, en cas de besoin.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Nous avons déjà démarré l’étude sur des souris et désirons poursuivre les investigations sur ce modèle. Au stade de jeunes adultes (7 semaines). Il n’est pas nécessaire d’utiliser des juvéniles ni des animaux plus âgés.