Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 28/08/2025
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-432983)
105 souris vont être utilisées dans des procédures impliquant un niveau de souffrance modéré, pour un seul geste, l’amputation des deux millimètres distaux de la queue au sevrage, à vingt et un jours, en une dizaine de secondes. Ces souris portent une mutation identifiée chez deux jeunes patients atteints d’épilepsie sévère, et le porteur indique qu’elles font des crises récurrentes, sont hyperactives et se toilettent davantage. L’amputation se pratique sans anesthésie, le porteur estimant qu’une anesthésie générale serait « une nuisance additionnelle non justifiée » au regard de la gravité de la procédure. Celles qui n’ont ni le génotype ni le sexe voulus, seuls les mâles modifiés étant gardés, sont tuées « très rapidement », les autres après reproduction, à six mois au plus tard.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Notre projet a pour but de maintenir une lignée de souris génétiquement altérées qui permettent d’étudier l’encéphalopathie épileptique du développement (DEE). Ces souris reproduisent une mutation humaine identifiée chez deux jeunes patients atteints d’épilepsie sévère accompagnée par un retard cognitif grave et progressif. Les souris portant cette mutation ont des crises d’épilepsie récurrentes et présentent des troubles du comportement et de la cognition (elles ont hyperactive et moins anxieuse que les souris normales). L’étude des mécanismes neuronaux causant les DEEs est le principal domaine de recherche de notre équipe. L’utilisation des souris génétiquement altérées s’inscrira dans le cadre d’un programme de recherche multicentrique (= impliquant plusieurs laboratoires) qui se propose de développer des nouvelles méthodologies diagnostiques et thérapeutiques pour les DDE.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
L’utilisation de nos souris génétiquement altérées permettra de mieux comprendre les mécanismes de base de l’encéphalopathie épileptique du développement. Cette pathologie restent actuellement intraitable. En outre, le programme multicentrique auquel nous contribuons en nous appuyant sur nos souris génétiquement altérées, se propose de développer des nouvelles méthodologies diagnostiques et thérapeutiques à appliquer à l’encéphalopathie épileptique du développement. Le présent projet permettra de maintenir la lignée de nos souris génétiquement altérées pour que l’on puisse en disposer pour les projets qui porteront sur notre thématique.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Au moment du sevrage (à l’âge de 21 jours) on effectuera une biopsie de la queue par prélèvement de 2mm à son extrémité. La durée de la manipulation est d’environ 10 secondes.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Des publications précédentes ont mis en évidence que nos souris génétiquement altérées présentaient des crises d’épilepsie, de l’hyperactivité, une réduction de l’anxiété et une augmentation du comportement d’auto-toilettage. La gestion de la lignée impliquera de réaliser une caractérisation génétique à partir d’un prélèvement de tissu. Ce prélèvement consistera en l’amputation des 2 mm distaux de la queue des animaux. Cela peut générer une légère douleur et un léger stress.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Les souris incluses dans la présente demande permettront de maintenir une lignée d’intérêt et de produire des lots expérimentaux pour alimenter les projets de l »équipe portant sur l’encéphalopathie épileptique du développement. Les souris qui n’auront pas les bonnes caractéristiques génétiques ou le bon sexe (on ne gardera que les mâles génétiquement altérés) seront mises à mort très rapidement. Les autres seront gardés le temps qu’ils se reproduisent puis seront mises à mort (à l’âge de 6 mois au maximum).
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Ce projet est nécessaire pour la production et la mise à disposition d’animaux génétiquement modifiés utilisés dans le cadre d’autres projets. Il n’existe aucune alternative satisfaisante (pour notre lignée) à la biopsie de tissus pour avoir accès au matériel génétique afin de le caractériser. Les projets qui seront alimentés par les souris reproductrices décrites dans cette demande d’autorisation, consistent typiquement à explorer les mécanismes neuronaux sous-jacents à l’encéphalopathie épileptique du développement, en utilisant des souris réalisant certains types de comportements (enregistrements de neurones sur souris vigiles) ou en ayant recours à des enregistrements électrophysiologiques sur tranches de cerveau. Dans les deux cas, l’utilisation de souris est, par nature, indispensable.
2. Réduction
Le schéma de reproduction vise la génération de la population minimale de reproducteurs nécessaires au maintien de la lignée et à la gestion des projets de recherche.
3. Raffinement
Les méthodes mises en oeuvre pour réaliser la biopsie nécessaire au génotypage sont éprouvées, précises, rapides et standardisées permettant de minimiser les nuisances causées aux animaux par leur manipulation et par le prélèvement lui-même. Une anesthésie générale constituerait une nuisance additionnelle non justifiées au regard du niveau de gravité de la procédure. Une fois le prélèvement réalisé, l’animal est remis dans sa cage et un suivi de la cicatrisation au point de prélèvement est assuré.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Nos souris génétiquement altérées portent une mutation génétique isolée chez des patients humains atteints d’encéphalopathies épileptique du développement. En outre, ces souris présentent des caractéristiques qui miment plusieurs aspects de la maladie comme les crises d’épilepsie et des comorbidités comme les troubles du comportement et de la cognition. Les animaux du présent projet seront utilisés en tant que reproducteurs jusqu’à l’âge de 6 mois. Un mâle est un bon reproducteur jsuqu’à cet âge; au-delà l’efficacité des accouplements peut baisser.