Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 01/08/2023
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-565634)
790 souris vont être utilisées, toutes tuées à l’issue, dans des procédures impliquant des niveaux de souffrance légers à sévères. Elles portent un modèle de progéria, une maladie de vieillissement accéléré, et subissent biopsie de la queue, gavages et prélèvements sanguins sous anesthésie pour l’étude du vieillissement intestinal. Le porteur indique que les animaux transgéniques présentent un vieillissement accéléré, la gravité sévère concernant 750 des 790 souris. Il décrit le recours au modèle animal comme « essentiel », tout en signalant avoir développé des « mini-colons » in vitro pour en limiter le nombre.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Le syndrome de Hutchinson-Gilford (HGPS) également appelé progeria est une maladie génétique pédiatrique conduisant à un vieillissement accéléré. Les enfants atteints présentent des retards de croissance, des malformations cutanées et osseuses et des anomalies cardiovasculaires, réduisant fortement leur espérance de vie. Cette maladie conduit à la production d’une protéine toxique appelée progerine difficilement détectable dans les tissus. La progérine est responsable d’un vieillissement cellulaire précoce et accéléré notamment au niveau des cellules souches. L’impact de la maladie sur le vieillissement intestinal n’a à ce jour jamais été caractérisé. Notre projet vise à caractériser lce viellissement dans un modèle de souris transgénique reproduisant la maladie et à l’élaboration d’un modèle murin facilitant la détection de la progérine dans les tissus.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Ce projet nous permettra d’explorer les perturbations profondes qui se produisent dans le tissu intestinal chez les enfants atteints de cette maladie génétique. Nous allons également créer un tout nouveau modèle tissu- et cellule-spécifique pour étudier les effets du vieillissement dans le contexte de la maladie progerique. Cette avancée pourrait nous permettre de développer des thérapies innovantes, et ainsi leur offrir la possibilité d’accroitre leur espérance de vie.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Le génotypage des souris se fera par une biopsie caudale en quelque secondes. Nous évaluerons la qualité de la permeabilité de la barrière par l’administration par gavage d’un composé non toxique de quelques minutes. Le gavage sera réalisé chez le même animal à la phase précoce, intermédiaire et tardive de la maladie progérique. Le prelevement sanguin pour detecter le composant se fera sous anesthésie générale brève de quelques minutes.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Les animaux porteurs de la maladie progérique vont présenter une viellissement accéléré. Le genotypage des souris nécessite une biopsie caudale dont la douleur est prévenue par l’application d’anesthésique cutané. Le gavage intestinal est une source de stress et nécessite une expertise afin d’éviter des fausses routes. Le prélèvement sanguin peut générer douleur et stress qui seront prévenus par une brève anesthésie générale .
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Tous les animaux seront mis à mort à la fin de chaque procédure du projet pour des analyses post-mortem des tissus. Cette analyse permettra de déterminer l’impact de la maladie sur l’homéostasie du tissu intestinal.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
L’étude de la physiopathologie du tissu intestinal, en renouvellement permanent, et en particulier dans un syndrome de veillissement accéléré, ne peut pas être réalisée en dehors du contexte d’un organisme complet, à l’issue d’un processus de développement et de viellissement caractéristique des mammiféres. Le modèle animal est donc essentiel à la compréhension de cette maladie.
2. Réduction
Nous utiliserons un nombre maximum de 360 animaux porteurs de la maladie progérique. Les animaux non utilisés pour cette caractérisation seront sinon éliminés avant l’apparition des premiers signes cliniques de vieillissement. Nous avons réduit le nombre d’animaux nécessaires à cette étude en développant un modèle de « mini-colons » in vitro dans tous les cas où cela semble possible. Ces mini-colons sont produits à partir de cellules souches intestinales prélevées après la mise à mort des animaux et pourront être utilisé pour des traitements in vitro. Enfin, la production de souris hétérozygotes portant la mutation de cette maladie et présentant un phénotype de vieillissement plus modéré sera privilégiée si les résultats scientifiques démontrent sa pertinence par rapport à la maladie humaine.
3. Raffinement
Nous garantirons la protection du bien-être des animaux porteurs du transgène, par la mise en place de mesures de raffinement spécifiques et adaptées : alimentation ramolie au sol, protection des nouveaux-nés contre l’hypothermie, points limites spécifiques basés sur le système de score reconnu pour ce modèle (pelage, démarche, activité, poids). Une surveillance quotidiennement par les zootechniciens et l’enrichissement de leur environnement seront assurés.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
La souris est un modèle de choix reproduisant cette maladie pédiatrique et permettra d’identifier, grâce à l’expression de rapporteurs conditionnels, les types cellulaires produisant la protéine toxique progérine au sein des tissus. Les animaux étudiés dans ce projet sont tous adultes car la protéine toxique progerine responsable du vieillissement accéléré ne s’exprime pas dans les stades précoces de vie.