Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 02/11/2022
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-904688)
90 souris mères porteuses vont être utilisées, toutes tuées à l’issue, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance léger. Elles reçoivent un transfert d’embryons par voie naturelle, sans chirurgie, pour valider une technique de revitalisation de lignées transgéniques, puis sont euthanasiées faute de pouvoir être réutilisées. Le porteur indique que le passage de la sonde peut irriter le vagin et que les petits nés seront gardés pour l’élevage. Il affirme ne pas pouvoir mettre au point cette technique sans recourir aux animaux, la réussite se mesurant au nombre de naissances.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
L’objectif est d’avoir une méthode de révitalisation des lignées de souris transgéniques sans geste chirurgical.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Le bénéfice attendu est la validation d’une technique de réimplantation d’embryon sans geste chirurgical
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Un seul transfert par voie naturelle d’embryons de souris (durée quelques secondes).
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Le passage de la sonde peut irriter le vagin. Les souris anesthésiées restent en observation jusqu’à leur complet réveil en bonne forme, dans leur cage placée sur une platine chauffante à 37°C. En fonction de l’évaluation de la douleur, du doliprane par voie orale peut être donné. L’évaluation de la douleur se fait notamment avec l’aide d’une grille de scoring.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Les mères porteuses seront euthanasiés après la manip car elles ne peuvent plus être réutilisées pour une autre manip. Les petits générés pourront être gardés et utilisés en fonction des besoins de l’élevage ou d’autres procédures expérimentales.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Nous ne pouvons pas faire une mise au point d’une nouvelle technique de revitalisation sans l’utilisation d’animaux. Nous avons besoin de savoir si la technique marche et pour cela nous avons besoin de voir s’il y a des naissances.
2. Réduction
Réduire le nombre d’animaux au minimum pour atteindre la compétence du transfert d’embryon jusqu’à 80%
3. Raffinement
Raffiner en utilisant au mieux les animaux. Renforcement de l’enrichissement des cages contenant les mâles vasectomisés isolés. La durée d’isolement des mâles est réduite au maximum. Eviter tout stress des animaux pendant les manips (gestation…) Des points limites sont définis. Les animaux opérés lors du transfert d’embryon seront soumis à une attention particulière pour la gestion de la douleur avec réadministration d’antalgique si nécessaire après la chirurgie. Les cages hébergeant les femelles réimplantées sont enrichies avec une cabane, du sopalin. Deux femelles maximum sont mises par cage. Une surveillance quotidienne est réalisée. Le transfert se passe sous anesthésie avec une prise en charge analgésique appropriée à la procédure. Des points limites et spécifiques sont mis en place.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Nous revitalisons les lignées pour toute entrée de souris transgéniques. Les femelles C57Bl6 productrices de blastocyste sont des femelles sexuellement matures de 6 à 8 semaines. Les mâles C57Bl6 mis en accouplement avec les femellles C57Bl6 pour récupérer les embryons sont également sexuellement matures. Les femelles mères-porteuses sont des femelles adultes, àgées au minimum de 8 semaines tout comme les mâles vasectomisés.