Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 31/10/2024
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-106099)
Injection intraveineuse de billes magnétiques, injection d’un produit de contraste dans les enveloppes du cerveau, incision de la peau : 420 souris subissent ces interventions sous anesthésie, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance léger à modéré, toutes tuées à l’issue. Les femelles reproductrices reçoivent des fongicides avant l’accouplement, pendant la gestation et pendant l’allaitement, et leur descendance est suivie jusqu’au stade adulte pour observer les vaisseaux du cerveau. Les séances d’imagerie durent jusqu’à une heure par jour, sur deux jours. Les doses administrées sont celles autorisées dans l’eau potable par l’Union européenne et présentées comme non nuisibles pour la santé, alors que l’objet déclaré du projet est de déterminer les effets nocifs qui peuvent en découler.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
De récentes études épidémiologiques suggèrent que l’exposition aux pesticides est associée à des troubles neurodéveloppementaux. La majorité de ces études se focalisent sur les neurones et les cellules gliales, cependant une composante reste encore largement inexplorée : la composante vasculaire. Ce projet est divisé en deux parties : – Partie 1 du projet dans l’Etablissement utilisatuer 1 : administrations de fongicides aux animaux géniterus, afin d’étudier les fonctions vasculaires des animaux issus de femelles traitées avant l’accouplement, pendant la gestation et lactation puis après leur sevrage. – Partie 2 du projet dans l’Etablissement utilisateur 2 : étude de l’action des fongicides sur le développement cérébral, plus particulièrement la composante vasculaire, avec deux techniques d’imagerie fonctionnelle peu invasives, pour observer l’inflammation vasculaire, les flux liquidiens dans le cerveau ainsi que le couplage neurovasculaire. Nous réaliserons cette étude dans des modèles murins « sains » et prédisposés génétiquement aux troubles du spectre autitiques, et ce chez les deux sexes. Pour cette étude nous utiliserons un nombre total de 420 animaux.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Notre étude permettra de mieux comprendre le mode d’action des fongicides sur le développement cérébral d’animaux sains et prédisposés génétiquement aux troubles du spectre autistique, dans l’espoir d’identifier de nouvelles cibles thérapeutiques pour lutter au plus tôt contre les malformations cérébrales induites par les pesticides, même à faibles doses.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Certains lots de souris subiront des interventions (dans l’Etablissement Utilisateur 2) de type : injection intraveineuse de billes magnétiques, injection intra-cisternale de produit de contraste ou une incision de la peau. Toutes ces interventions seront réalisées sur un animal anesthésié et analgésié. La durée de la procédure 2 sera de 40 minutes environ (injection + imagerie). La procédure 3 sera séparée en 2 jours, l’imagerie durera 1h chaque jour. La procédure 4 durera environ 20 minutes.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Certains lots de souris subiront des interventions (injection intraveineuse) qui peuvent entraîner des effets modérés (irritation au site d’injection). Les lots d’animaux traités avec les fongicides seront exposés à des doses retrouvées dans l’eau potable, autorisées par l’Union Européenne (directive 2020/2184) et considérées comme non nuisibles pour la santé. Le but de notre étude est de déterminer les effets nocifs qui peuvent découler de cette exposition.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Les animaux utilisés pour la procédure 2 seront mis à mort afin de prélever les cerveaux et de faire nos analyses. Les autres animaux seront également mis à mort à la fin de la procédure.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
L’expérimentation animale sur un système murin est essentielle, car nous ne pouvons le remplacer par un système in vitro où il est impossible de recréer les multiples interactions cellulaires d’un système complexe en développement. Il n’existe pas non plus d’autres modèles à l’heure actuelle permettant de répondre à nos questions biologiques
2. Réduction
Le nombre d’animaux utilisés sera réduit autant que possible et correspond au minimum nécessaire pour obtenir des résultats scientifiques significatifs. Nous ne possédons pas assez de données pour réaliser une analyse de puissance. Ainsi, le nombre d’animaux utilisés dans ce projet (nombre d’animaux par expérimentation : 10) a été évalué au regard de nos données antérieures et de la littérature disponible.
3. Raffinement
Les élevages sont effectués en groupe avec enrichissement de l’environnement et toutes les précautions sont assurées afin de respecter au mieux le bien-être animal. Pour tout protocole nécessitant une anesthésie, des analgésiques seront coadministrés pour limiter toute souffrance à l’animal. En plus de l’anesthésie, une analgésie sera réalisée pour tout animal subissant une thoracotomie. Le personnel est formé sur l’ensemble de la prise en charge des animaux (gestion optimale de l’élevage, actes de chirurgie ou d’injection intrapéritonéale, gestion de l’anesthésie/analgésie, analyse des points limites). Les animaux sont transportés en groupe de 5 et de l’hydrogel sera placé dans les boîtes de transport afin que les animaux puissent s’hydrater pendant le trajet.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
La souris est un mammifère où les processus qui régissent le développement du système nerveux central et sa plasticité sont similaires à l’Homme. Cette étude sera sur le stade adulte et nous permettra de voir les effets à long terme d’une exposition prénatale sur le développement et les répercussions au stade adulte.