Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 08/11/2022
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-359479)
48 souris vont être utilisées, toutes tuées à l’issue, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance modéré. Elles reçoivent un télétransmetteur implanté sous la peau, sont isolées en cage individuelle trois semaines pour l’enregistrement de l’électrocardiogramme, puis subissent une exploration électrophysiologique par voie transœsophagienne sous anesthésie avant d’être tuées sans réveil, pour étudier les effets de la suralimentation postnatale sur le cœur. Le porteur classe l’isolement en cage individuelle comme une atteinte modérée. Il affirme que ce projet, reposant sur des échanges entre plusieurs organes, doit être conduit sur un animal entier.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Les maladies liées au surpoids sont en constante augmentation non seulement dans nos sociétés occidentales mais aussi dans les pays émergeants. Ces pathologies associent des désordres cardiovasculaires (hypertension artérielle, athérosclérose, coronaropathies, néphropathies) à des anomalies métaboliques majeures (dyslipidémies, diabète). Leurs origines, plurifactorielles, sont bien entendu à rechercher dans une inadaptation de notre patrimoine génétique aux modifications profondes de l’alimentation et du niveau d’activité physique, liées aux changements de nos sociétés. Des travaux récents tendent à montrer que des altérations précoces de l’environnement, notamment nutritionnel, pourraient infléchir durablement l’orientation pondérale, métabolique et cardiovasculaire des individus et participer à l’augmentation du risque cardiovasculaire observée dans les pays développés. Préciser et comprendre les mécanismes responsables de la survenue de ces altérations cardiovasculaires et métaboliques induites par des modifications précoces de l’alimentation, et mieux comprendre l’origine de cette plus grande susceptibilité du cœur à ces situations pathologiques permettraient d’améliorer les actions de prévention et même de prise en charge de ces pathologies.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Ce projet a pour but une meilleure connaissance des conséquences cardiaques des modifications précoces de prise alimentaire et d’éventuelles altérations des interactions neuro-cardiaques issues de ces troubles alimentaires. Les laboratoires impliqués dans ce projet procéderont ultérieurement en fonction de leurs résultats à l’identification de cibles thérapeutiques potentielles et tenteront une stratégie de traitement (prévention des altérations neuro-cardiaques).
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
L’ensemble des animaux sera soumis à 2 interventions successives : l’implantation de télétransmetteurs en position sous-cutané pour mesurer l’électrocardiogramme, puis l’exploration électrophysiologique transoesophagienne pour tester la vulnérabilité du coeur à faire des arythmies cardiaques. L’ensemble des expérimentations est réalisé sous anesthésie générale. Les animaux seront équipés du dispositifs de mesure de l’électrocardiogramme pendant 3 semaines, durée de leur mise en cage unique.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
La caractérisation fonctionnelle des animaux repose d’une part sur l’enregistrement de l’électrocardiogramme par système holter implanté. Ces animaux implantés devront être isolés en cage unique pour des raisons techniques et de bien-être afin d’éviter les blessures entre animaux. L’implantation du holter en sous cutanée est bien maitrisée et aucune nuisance supérieure à une sévérité légère n’est attendue par l’acte chirurgical (implantation sous-cutanée necessitant seulement 3 petites incisions de la peau). L’isolement sera pris en compte pour le suivi journalier de l’animal et est classé comme sévérité modérée. L’exploration électrophysiologique trans-oesophagienne a été choisie car elle est réalisée sous anesthésie générale de l’animal et ne nécessite pas de chirurgie, à l’inverse de l’exploration intracardiaque et, n’induit pas de lésion ni de douleur. L’animal ne se révveille pas suite à cette expérimentation.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Après avoir effectué l’enregistrement ECG par télémétrie, puis effectuer l’exploration électrophysiologique trans-oesophagienne, les animaux seront mis à mort sous anesthésie gazeuse (sans réveil).
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Ce projet de recherche, qui repose sur des interactions entre différents organes (tissu adipeux, cerveau, foie, cœur et vaisseaux) ne peut pas être approché par des techniques reposant sur la culture cellulaire et les modèles in silico. Il nécessite d’être conduit sur un animal entier, de sa naissance à sa maturité.
2. Réduction
N’existant pas de méthode substitutive qui puisse éviter de recourir à l’usage d’animaux, cette étude sera réalisée en accord avec le principe des 3R avec notamment le but de réduire le nombre d’animaux (utilisation d’un même animal pour plusieurs mesures). Pour réduire la variabilité interindividuelle et donc le nombre de souris nécessaires pour démontrer un effet, nous utiliserons des lots d’animaux du même âge au moment de l’initiation du protocole. Nous avons fait le choix de méthodes (télémétrie, transoesophagien), compatibles entre elles permettant de réduire le nombre de groupes utilisés et obtenir le maximum d’informations sur chaque animal. Au niveau statistique, le nombre d’animaux a été déterminé par le logiciel G*Power avec un risque Alpha de 0.05 et une puissance de 0.95 ( avec une différence absolue attendue de 20 à 30% entre les groupes). Les résultats seront comparés entre les souris des 2 groupes (alimentation normale / suralimentation) par un test de comparaison de pourcentages et tests de comparaison de moyennes. Un nombre de 24 animaux maximum par groupe sera utilisé, soit 48 animaux au total.
3. Raffinement
L’ensemble de la procédure d’implantation du capteur de télémétrie sera réalisé sous anesthésie générale gazeuse. L’animal est monitoré jusqu’à son réveil complet puis placé dans une couveuse en cage unique pour récupérer. Le jour de la procédure, des visites régulières sont effectuées. Des soins per- et postopératoires appropriés serontégalement réalisés: analgésie locale puis injection d’analgésique avant le réveil pour prévenir la douleur. Une injection d’analgésique sera effectuée si un signe de douleur persiste dans les 2 jours suivant l’implantation. Une grille d’évaluation clinique de l’animal permettra son suivi et le respect des points limites. Les animaux seront hébergés en présence d’outils de raffinement (nid en cellulose et carré de cellulose).
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Notre équipe de recherche a une longue expérience de projets expérimentaux conduits chez la souris. Nos appareils de mesure sont adaptés à la souris. La souris nous permet d’envisager les effets de la suralimentation sur un modèle très étudié dans différents projets, au niveau national et international, et qui sert de témoin « sauvage » aux études sur animaux génétiquement modifiés. Les animaux que nous utiliserons auront un âge de 6 mois, stade d’âge avancé, où la suralimentation devrait générer des troubles fonctionnels cardiaques.