Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 08/11/2022
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-189879)
432 souris vont être utilisées, toutes tuées à l’issue, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance léger. Sous anesthésie gazeuse, elles subissent des prélèvements de sang à la queue, des immunisations sous-cutanées et une ponction intracardiaque, pour tester 17 peptides candidats à un vaccin destiné à stériliser les mâles et les femelles. Les nouveau-nés issus des croisements de contrôle sont aussi mis à mort. Le porteur affirme que ces interactions entre système immunitaire et appareil reproducteur ne permettent pas d’envisager d’autre modèle que l’animal.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Les objectifs du projet sont les suivants : (1) rechercher la capacité de peptides pré-sélectionnés à déclencher une réaction immunitaire susceptible d’altérer de manière réversible les capacités reproductrices des mâles et des femelles ; (2) tester la spécificité d’espèce de la réponse immunitaire en injectant des peptides de séquences spécifiques de l’espèce hôte ou d’une autre espèce ; (3) comprendre les mécanismes immunitaires mis en jeu au niveau systémique et au niveau de tractus reproducteur mâle ou femelle.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Ce projet permettra de sélectionner les meilleurs peptides, parmi un panel de 17 peptides provenant de cibles protéiques différentes, pour envisager une stratégie d’immunocontraception. Cette étude sera la première à porter sur un nombre aussi élevé de peptides et offrira donc des possibilités d’association des différents peptides pour passer à l’étape suivante, qui consistera à élaborer un cocktail de ces etides sous une forme galénique acceptable pour l’homme, qui ne soit donc pas des injections répétées.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Toutes les interventions se dérouleront sous anesthésie gazeuse à l’isoflurane : prélèvement de sang à la veine latérale de la queue, immunisation par injection sous-cutanée et ponction intra-cardiaque.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Les doses choisies pour les injections (100µg de peptide) sont basées sur de nombreuses études déjà publiées, nous ne nous attendons donc pas à ce que les immunisations soient une source d’effets indésirables. Toutefois, les sites des injections feront l’objet d’une surveillance particulière tout au long du projet pour éviter des infections ou nécroses, ou toute autre réaction anormale.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Tous les animaux immunisés (432) seront mis à mort pour prélever du sérum immun et des tissus afin de pouvoir analyser la réponse spécifique à chaque peptide testé. Les animaux utilisés pour les tests de reproduction in vivo (144 femelles et 24 mâles) seront mis à mort après utilisation pour 3 peptides pour les femelles et 5 peptides pour les mâles. Les nouveaux-nés potentiellement issus de ces croisements seront aussi mis à mort.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Dans ce projet, nous faisons appel à des notions d’immunité (vaccination) et nous évaluons les conséquences sur la fertilité des animaux après des réactions impliquant les interactions entre le système immunitaire et le tractus reproducteur (mâle ou femelle). Ces interactions entre différents systèmes biologiques ne permettent pas d’envisager de modèles autres que des animaux. Etant donné que ce projet est basé sur des interactions entre différents systèmes biologiques d’un même organisme, il n’y a pas d’alternatives non animales disponibles. Des aproches in silico on été mises en oeuvre en amont du projet pour sélectionner et synthétiser les peptides immunogènes les plus suceptibles de déclencher la réponse immuntaire souhaitée.
2. Réduction
Le nombre des individus par lot ainsi que le nombre de lots ont été réduits au minimum de manière à garantir la prise en compte de la varaibilité inter-individuelle (surtout que les souris utilisées sont une souche non consanguine) tout en permettant d’appliquer des tests statistiques sur les paramètres quantifiés. Les comparaisons statistiques se feront entre deux groupes par le biais d’un test non paramétrique de Mann & Whitney.
3. Raffinement
Les peptides utilisés ici ont été présélectionnés grâce à une étude préable dans l’équipe faîte sur une espèce sauvage, limitant ainsi le recours à des animaux pour cette phase.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Les souris sont un modèle de choix pour les études des processus physiopathologiques de la reproduction, notamment pour leur temps de génération court. Les connaissances sur les propriétés cellulaires des spermatozoïdes chez cette espère sont aussi une spécificité de notre équipe de recherche.