Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 02/10/2024
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-271429)
Un son intense de cinq secondes à une minute déclenche chez ces souris une crise d’épilepsie réflexe, souvent suivie de la mort. 1 760 souris vont être utilisées dans des procédures d’un niveau de souffrance modéré, testées deux fois, à un mois puis à trois mois d’âge, celles qui ne répondent pas aux critères de sélection et survivent au test étant tuées le jour même. Le projet consiste à dériver deux lignées d’une souche déjà construite, l’une dont 100 % des individus feraient une crise mortelle, l’autre dont 100 % survivraient à la crise, pour étudier la mort subite dans l’épilepsie. Le porteur résume les effets subis par les souris à « un stress induit par la stimulation auditive » et écrit que la convulsion, qui dure moins de huit secondes dans 99 % des cas, « n’engendre pas de souffrance intrinsèquement ».
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Le risque de mort subite chez un patient épileptique (SUDEP) est en moyenne trois fois plus élevé que dans la population saine. Aujourd’hui, on n’en connait pas la raison et beaucoup d’énergie est déployée pour mieux comprendre ce phénomène, chez l’Homme comme chez l’animal. Il existe un modèle de SUDEP chez la souris qui correspond à la présentation d’un son intense qui va déclencher une crise réflexe souvent suivie de la mort. Le bénéfice de ce modèle repose sur le fait qu’il n’est pas invasif et qu’il ne repose pas sur une stimulation électrique ou chimique. Seulement, il présente des inconvénients. Effectivement seules quelques lignées de souris y sont sensibles ; de plus, toutes les souris de ces lignées ne sont pas répondeuses. De surcroît, cette sensibilité s’estompe rapidement avec l’âge. C’est pour cette raison que nous avons développé une lignée de souris qui pallie ce problème. 100 % des souris de cette lignée présente une crise d’épilepsie suivies ou non de la mort. Nous souhaitons aller plus loin et, à partir de la lignée déjà construite, reprendre la sélection pour en dériver deux lignées. Une qui présenterait 100 % de crise létale suite à la stimulation sonore. Et l’autre qui présenterait 100 % de crise non létale suite à la stimulation sonore. C’est le sens de ce projet
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Ce modèle de SUDEP permettra 1/ d’évaluer si les anti-épileptiques ont aussi une capacité à empêcher la létalité qui peut survenir après une crise d’épilepsie ; 2/ d’apporter un modèle de SUDEP utile à la recherche fondamentale.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Chaque souris issue de la sélection sera soumise deux fois à un test de crise (à 1 mois et 3 mois d’âge) basé sur une stimulation sonore intense d’une durée de 5 sec à 1 minute, qui provoquera un stress.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Un stress induit par la stimulation auditif.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Les animaux répondant aux critères de sélection seront conservés en vue d’une possible sélection en vue d’être croisées pour obtenir la génération suivante. A chaque génération, le nombre de couples formés sera décroissant de 9 à 1 couples. Ceux non sélectionnables et ayant survécu au test seront euthanasiés le jour même.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Les crises d’épilepsie impliquent un grand nombre de modifications biologiques intégrées. L’animal ne peut pas être remplacé pour la compréhension de ses mécanismes biologiques intégrés.
2. Réduction
Les souris utilisées classiquement ne répondent pas à 100 % au test de la crise audiogène. Ce qui fait qu’il faut tester 2 à 4 fois plus de souris pour la même fiabilité des résultats. Les souris ainsi créées permettront de réduire le nombre de souris testée. Nous souhaitons tester deux portées issues de chaque couple. Cette stratégie est classiquement utilisée dans les sélections directionnelles puisque cela permet de constituer un échantillon d’environ 15 animaux.
3. Raffinement
Notre protocole suit des procédures standardisées soucieuses de minimiser toute souffrance des animaux. Ceci se traduit par une durée limitée du stress auditif (max 60 sec), une utilisation d’une cuve circulaire pour éviter les angles dans lesquels la souris pourrait se cogner. Il faut aussi mentionner que la convulsion en elle- même ne dure pas plus de 8 sec dans 99 % des cas et qu’elle n’engendre pas de souffrance intrinsèquement.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Seule la souris présente des crises audiogènes létales ; le rat ne présentant que des crises audiogènes non létales. Les animaux seront testés deux fois, à 30 jours et 90 jours d’âge.