Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 30/05/2025
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-442550)
Génétiquement privées d’une sous-population de neurones du toucher, 40 souris reçoivent un traitement quotidien pendant cinq jours, deux injections espacées de 72 heures, puis pour une partie d’entre elles quatre injections supplémentaires, avant neuf séances de stimulation mécanique de la patte arrière étalées sur quarante jours. La moitié d’entre elles est utilisée dans des procédures impliquant un niveau de souffrance sévère, l’autre moitié dans des procédures modérées. Toutes sont tuées pour prélever les tissus, après un transfert vers un second établissement où l’activité électrique de leur moelle épinière est explorée pendant trois semaines au maximum. Le porteur conclut que ses données antérieures « ne montrent aucun effet délétère » et ramène les nuisances à un isolement en box de deux heures et à la stimulation de la patte, alors que la moitié des souris est déclarée en souffrance sévère dans le même document.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Cette étude a pour but de comprendre le rôle d’une sous-population spécifique de neurone dans la modulation de la douleur. Pour ce faire, nous utilisons une souris génétiquement dépourvue de cette sous-population de neurone. Nos données démontrent, pour la première fois, un rôle majeur de cette sous-population dans la modulation de la douleur. Afin d’élucider les mécanismes sous-jacents à ce nouveau rôle anti-douleur de cette sous-population neuronale, nous souhaitons, dans cette étude (impliquant 2 établissements utilisateurs), explorer l’activité électrique mise en jeu au niveau de la moelle épinière. Les données émanant de cette nouvelle étude offriront une nouvelle base pour le développement de nouveaux traitements adaptés à différents types de douleurs, dont souffrent notamment les patients atteints de cancer.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
La prise en charge de la douleur est actuellement un enjeu majeur. En effet, 1/5 de la population mondiale est atteinte de douleurs chroniques, ce qui représente un problème socio-économique important et souligne que les mécanismes moléculaires et cellulaires intervenant dans la mise en place et le maintien des douleurs chroniques restent peu compris. Dans ce projet, nous allons nous intéresser à une sous-population spécifique de neurone ayant un rôle majeur dans la modulation de la douleur. A court terme, ce projet permettra donc d’accroitre nos connaissances fondamentales sur les mécanismes moléculaires et cellulaires impliqués dans les douleur chronique. Ainsi, nos travaux offriront à long terme une nouvelle base pour le développement de nouveaux traitements adaptés à différents types de douleurs, dont souffrent notamment les patients atteints de cancer.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Au sein de l’établissement utilisateur 1, l’ensemble des animaux recevront, premièrement un traitement une fois toutes les 24h, pendant 5 jours consécutifs. 1 semaine plus tard, l’ensemble des souris recevront deux injections espacées de 72h. Ensuite, et seulement une partie des souris, recevront, 4 semaines minimum après l’injection, quatre injections espacées de 48h. Les animaux mentionnés dernièrement feront l’objet d’une étude comportementale sur une durée de 40jours pour un total de 9 sessions de stimulations mécaniques de la patte arrière. Chaque session est composé d’un maximum de 7 stimulations mécaniques espacées sur une durée d’une heure. Cette étude a pour but d’évaluer la sensibilité mécanique de l’animal. L’ensemble des animaux de ce projet seront ensuite transférés de établissement utilisateur 1 à l’établissement utilisateur 2 pour l’exploration de l’activité électrique mise en jeu au niveau de la moelle épinière, pour une durée n’excédant pas 3 semaines.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Les nuisances du test comportemental sont l’isolement de l’animal en box individuel pendant une durée maximale de 2h ainsi que la stimulation mécanique de la patte arrière. Ces nuisances sont susceptibles de générer du stress mais le personnel est formé à la réalisation de ces actes. Nos données, issues d’études précédentes, ne montrent aucun effet délétère.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Tous les animaux impliqués dans chaque procédure seront euthanasiés afin de prélever les tissus nécessaires aux besoins de l’analyse.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Notre projet nécessite l’utilisation d’animaux et ne peut recourir à des stratégies de remplacement par des méthodes in vitro. En effet, la douleur ne peut être dissociée du système physiologique global de l’animal. L’étude comportementale, constituant le point de départ de notre étude, est le résultat d’une intégration complexe de l’information sensorielle de la périphérie vers le cortex somatosensoriel. Ainsi, l’expérimentation animale sur des souris est indispensable à l’étude des phénomènes physiologiques et à la réalisation de notre projet. De plus, l’utilisation de la souris en tant que modèle expérimental nous permet d’étudier le rôle de populations neuronales définies dans la physiologie de la douleur, grâce à la génération de modèles murins génétiquement modifiés.
2. Réduction
Sur la base d’études pilotes, nous avons réduit au minimum nos effectifs permettant toutefois d’avoir un effet statistique significatif. L’optimisation de notre plan expérimental (enchaînement de différents tests comportementaux non-invasifs sur le même animal, partage de tissus) permet d’estimer au mieux le nombre d’animaux nécessaire. L’utilisation d’outils informatiques prenant en compte la variabilité liée au traitement, aux tests comportementaux ainsi que le nombre minimum de souris pour obtenir suffisamment de matériel analysable, nous permettent de déterminer au plus juste le nombre d’animaux dans nos tests de comportement, ainsi que dans les analyses électrophysiologiques prévues dans ce projet. Le nombre indiqué tient compte de toutes ces variables.
3. Raffinement
Les stratégies d’optimisation suivantes seront mises en place au cours du projet afin de réduire au mieux voir supprimer la souffrance chez l’animal : a) planification des procédures expérimentales (disponibilité de locaux d’expérimentation, de matériel, période d’acclimatation des animaux aux pièces d’expérimentation) limitant le stress des animaux et favorisant la validité des expériences ; b) recours à l’anesthésie/analgésie ; c) établissement d’une grille de score et des points limites les plus précoces possibles. Le transport des animaux entre les deux établissements utilisateurs est assuré par un transporteur agréé (température et hygrométrie contrôlée pendant le transport). Les animaux arrivant à destination font l’objet d’une période d’acclimatation de 3 jours (au minimum) avant toute utilisation, afin de limiter le stress des animaux.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Notre sous-population neuronale d’intérêt étudiée chez la souris est similaire à celle décrite chez l’homme. Les animaux utilisés dans cette étude seront utilisés à partir de 3semaines d’âge, tel qu’il a été décrit dans la littérature.