Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 05/06/2024
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-442809)
Proposés à l’adoption à la fin du projet, quatre lapins mâles sont ponctionnés à la veine marginale de l’oreille tous les quinze jours pendant deux ans, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance légère. Chaque prélèvement suppose un quart d’heure en cage de contention le temps d’obtenir une vasodilatation, puis une dizaine de minutes d’aiguille, et laisse un hématome que le porteur dit se résorber avant le prélèvement suivant. Leur sang sert à préparer les repas infectieux de moustiques femelles gorgées sur membrane artificielle avec les virus Zika et de la dengue. Le porteur retient le lapin parce que son sang donne selon lui de meilleurs taux d’infection que le sang de bœuf, et parce que la position de La Réunion rend l’acheminement de sang commandé à un fournisseur coûteux et risqué pour la chaîne du froid.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Les maladies à transmission vectorielle représentent un défi majeur en matière de santé publique et de développement économique. L’objectif de ce projet est d’examiner le rôle des moustiques vecteurs dans la dynamique de transmission des arbovirus . A cet effet, la compétence vectorielle des moustiques échantillonnés sera examinée. Les expériences pour mesurer la compétence vectorielle seront réalisées en laboratoire confiné de niveau 3 , avec les virus Zika et le virus de la dengue. Nous effectuerons des infections expérimentales par gorgement des femelles de moustiques sur membranes artificielles. Le repas de sang infectieux sera composé d’un mélange de sang de lapin, de virus et d’ATP (Adénosine Triphosphate) utilisé comme phagostimulant.Différents tests effectués par un consortium de laboratoire de recherche travaillant sur ZIKA ont démontré que l’origine du sang utilisé affecte l’infection viral et la dissémination.Ces résultats démontrent que le sang de lapin a une efficacité optimale (en comparaisant avec du sang de boeuf) de l’infection e de la dissémination du virus ZIKA. Pour le projet nous utiliserons deux lapins KBL(NZW) mâles de 11 semaines que nous ponctionnerons toutes les semaines à tour de rôle car l’idéal c’est d’espacer de deux semaines les prélèvements pour chaque lapin en ne dépassant pas 10% du volume totale (environ 6ml pour un lapin de 1kg) ,l’animal ne subissant aucune contrainte notable due à une telle perte de sang.La ponction de la veine marginale de l’oreille est la méthode à choisir chez le lapin. La vasodilatation,si elle est nécessaire,sera provoquée par l’application d’une substance légèrement irritante qui sera enlevée de l’oreille après le prélèvement de sang.Avant chaque prélèvement nous appliquerons du désinfectant au niveau du site de prélèvement ainsi qu’un anesthésiant local ;Les lapins seront hébergés dans une animalerie agréée , et mis dans des cages adaptées avec un enrichissement comprenant mélange de fourrage ainsi que cube de bois.Lors des prélèvements les lapins seront disposés dans des cages de contention adaptées et seront manipulés par du personnel compétent.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Les maladies à transmission vectorielle représentent un défi majeur en matière de santé publique et de développement économique. La Réunion et les îles du sud-ouest de l’Océan indien (SOOI) ont été victime ces dernières années d’émergences épidémiques de nombreuses arboviroses d’importance médicale.Les bénéfices attendus sur ce projet sont multiples : Comprendre tous les mécanismes d’infections du virus ZIKA du vecteur à la population humaine, mettre en place des méthodologies pour inhiber le virus au sein du vecteur , mettre en place des méthodes thérapeutiques pour réduire les symptômes de la maladie.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Maintien du lapin dans une cage de contention bien qu’adaptée pendant une quinzaine de minutes le temps de la vasodilatation et prélèvement Introduction d »une aiguille de 22 à 24G pour le prélèvement sanguin qui dure environ 10 minutes . Ces prélèvements se feront sur chaque lapin tous les 15 jours pendant 2 ans (à raison de 2 groupes de lapins sur la durée totale du projet)
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Les nuisances sont les suivantes : Maintien du lapin dans une cage de contention bien qu’adaptée pendant une quinzaine xde minutes le temps de la vasodilatation et du prélèvement Introduction d »une aiguille de 22 à 24G pour le prélèvement sanguin et dans une moindre mesure perte de volémie même si le volume prélevé à chaque prélèvement ne dépassera pas 10% du volume total ce qui ne devrait pas entrainer une perte de volémie nuisible pour l’animal.Une réaction de retrait du lapin liè à l’introduction d’une aiguille qui sera limitée par l’application de Lidocaine , un anesthésiant local, au niveau du site d’injection Apparition d’un hématome au niveau du site de prélèvement qui aura le temps de se résorber en 15 jours vu que nous alterneront les prélèvements sur chaque lapin d’une semaine à l’autre.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Les animaux auront subis peu de contrainte et pas de modification physiologique nous proposerons par le biais de notre SBEA les animaux à l’adoption.cela déjà été réalisé par le passé avec une adoption de 100% des animaux (lapins)
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
les essais d’infection réalisées sur d’autres sangs ont montré un trés faible taux d’engorgement des moustiques en effet d’aprés les comparatifs d’infection et de dissémination virale selon le sang utilisé , les résultats démontrent que le sang de lapin a une efficacité optimale (en comparaison avec du sang de boeuf) de l’infection de de la dissémination du virus ZIKA.De plus la situation géographique complexifie nettement l’acheminement régulier ( coût exorbitant, ainsi que risque de non respect de la chaîne du froid) de sang de lapin issue d’établissement agrée fournisseur d’animaux de laboratoire et produits biologiques découlant.
2. Réduction
Le nombre de lapins a été limité à 2 au vue du besoin en sang pour ce projet.
3. Raffinement
Les prélèvements pour chaque lapin en ne dépassant pas 10% du volume totale (environ 6ml pour un lapin de 1kg) et se feront tous les 15 jours pour chaque lapin ,l’animal ne subissant aucune contrainte notable due à une telle perte de sang. Nouds appliquerons sytématiquement de la lidocaine,un anesthésiant local, sur le site de prélèvement pour éviter toutes génes ou douleurs. Les lapins seront hébergés dans une animalerie agréée , et mis dans des cages adaptées avec un enrichissement comprenant mélange de fourrage ainsi que cube de bois. Lors des prélèvements les lapins seront disposés dans des cages de contention adaptées et seront manipulés par du personnel compétent.Ils auront accés à l’eau ainsi qu’a la nouriture ad libidum.Une surveillance quotidienne par les zootechniciens sera effectué.La perte de volume est compensée en quelques heures par un transfert de liquide de l’espace extra-cellulaire vers l’espace intra-vasculaire, ainsi que par une excrétion diminuée d’urine et par le fait de boire davantage.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
D’aprés les comparatifs d’infection et de dissémination virale selon le sang utilisé , les résultats démontrent que le sang de lapin a une efficacité optimale (en comparaison avec du sang de boeuf) de l’infection de de la dissémination du virus ZIKA.De plus la situation géographique de l’île de la Réunion complexifie nettement l’acheminement régulier ( coût exorbitant, ainsi que risque de non respect de la chaîne du froid) de sang de lapin issue d’établissement agrée fournisseur d’animaux de laboratoire et produits biologiques découlant. Les lapins seront commandés au stade jeunes adultes afin d’être assez matures pour supporter sans effets secondaire les prélèvements et seront maintenus en vie pendant deux ans car au-delà les animaux commencent à viellir et à développer potentiellement des maladies liées à leur âge avancé.